Том 14, № 4 (2024)
- Год: 2024
- Дата публикации: 31.10.2024
- Статей: 20
- URL: https://iimmun.ru/iimm/issue/view/71
Весь выпуск
ОБЗОРЫ
Принцип эколого-молекулярного консенсуса в реконструкции филогении микроба чумы Yersinia pestis
Аннотация
Во второй половине XX века усилиями ученых многих стран была сформулирована стройная теория природной очаговости чумы (ТПОЧ, sylvatic plague), в которой предпринималась попытка описать историю происхождения и эволюции возбудителя этой инфекции — микроба Yersinia pestis. Но накопленные знания в этом отношении оставались крайне ограниченными. Методы филогенетических построений в догеномное время с точки зрения современной филогенетики были достаточно примитивными, «ручными», свойственными ранней эмпирико-интуитивной геккелевской филогенетике. Внедрение с началом XXI века геномных методологий в изучение возбудителя чумы позволило детально описать внутривидовое разнообразие (подвидов, геновариантов) этого особо опасного патогена на уровне географических и местных популяций (отдельных природных очагов) по всему миру и довести диагностику и описание внутривидового разнообразия до высокой степени совершенства. Были сделаны два важных открытия. Во-первых, был надежно установлен прямой предок чумного микроба, им оказался возбудитель кишечной инфекции — дальневосточной скарлатиноподобной лихорадки (Y. pseudotuberculosis 0:1b). Во-вторых, была показана эволюционная молодость возбудителя чумы, «молекулярные часы» показали время его дивергенции от предковой популяции не ранее 30 тыс. лет назад. Таким образом, был полноценно охарактеризован корень филогенетического древа Y. pestis. Тем не менее молекулярно-генетические (МГ) достижения пока не позволяют раскрыть секреты его филогенеза — происхождения и последовательности мировой экспансии. В качестве важнейшей причины видится высокая зависимость МГ реконструкций филогенеза от выбора модели эволюции анализируемых признаков: традиционно принимают модель нейтральной эволюции, но ее адекватность в отношении филогении Y. pestis ставится под сомнение многими известными экологическими (в широком понимании) фактами. В то же время МГ достижения способствовали созданию экологического (ЭКО) подхода, опирающегося на положения теории природной очаговости чумы в обновленной версии, в соответствии с которой возбудитель чумы является эволюционно молодым патогенном, произошедшим от психрофильного псевдотуберкулезного предка. Презумптивный ЭКО сценарий не имеет очевидных естественно-научных и исторических противоречий и может служить нуль-гипотезой для совершенствования МГ методологии филогенетических построений чумного микроба и других подобных микроорганизмов. Высказывается мнение, что создание реальной филогении чумного микроба возможно только на основе интеграции МГ и ЭКО подходов.
Перспективы разработки терапевтических вакцин против папилломавирусной инфекции
Аннотация
Вирус папилломы человека (ВПЧ) является одной из серьезных проблем общественного здравоохранения. Длительно существующая ВПЧ-инфекция является главной причиной возникновения злокачественных заболеваний у мужчин и женщин. Рак относится к заболеваниям с высоким уровнем смертности. Установлено, что ВПЧ-инфекция примерно на 70% связана с раком влагалища, на 50% — с раком половых органов у мужчин, на 90% — с раком анального канала и 60% — c раком головы. Ежегодно у большого количества людей развиваются разные виды рака, инициированные ВПЧ, ведущим из которых является рак шейки матки. Рак шейки матки — один из наиболее распространенных и агрессивных видов рака, угрожающих здоровью, является четвертым по распространенности в мире раком у женщин. По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), на 2020 г. около 600 случаев заболеваемости раком шейки матки регистрируется ежедневно в различных странах мира. Возникновение рака шейки матки тесно связано с такими факторами, как длительно существующая (персистирующая) инфекция ВПЧ и соматические мутации генома хозяина. Несмотря на то что поражения, вызванные ВПЧ могут быть выявлены и удалены на ранней стадии с помощью высокоэффективных методов скрининга и хирургических процедур, канцерогенный риск, вызванный ВПЧ-инфекцией продолжает увеличиваться, и есть определенные сложности в ее устранении, особенно в странах с низким уровнем развития. Решением данного вопроса является создание терапевтических вакцин как на этапах профилактики, так и лечения. На сегодняшний день существует три лицензированные профилактические вакцины против ВПЧ на основе вирусоподобных частиц типа L1 (L1-VLP): бивалентная (ВПЧ-2), четырехвалентная (ВПЧ-4) и нонавалентная (ВПЧ-9) вакцины. Использование этих вакцин позволило эффективно устранить около 90% случаев инфицирования ВПЧ во всем мире. Однако терапевтического эффекта данных вакцин в отношении персистирующей ВПЧ-инфекции и вызванных ею поражений замечено не было. Особенностью терапевтических вакцин, разрабатываемых для онкобелков Е6/Е7, является активация клеточного иммунитета, что считается идеальным иммунным способом устранения вирусной инфекции. В представленном обзоре приведена информация, касающаяся классификации, механизма действия и клинических эффектов вакцин против ВПЧ, а также разработки и перспективных направлений в отношении терапевтических вакцин, используемых для профилактики и лечения злокачественных заболеваний.
Новые перспективные антисептики для индивидуальной антивирусной защиты при сезонных инфекциях, включая COVID-19
Аннотация
Сезонные вирусные инфекции верхних дыхательных путей широко распространены во всем мире. Пандемия коронавируса SARS-CoV-2 показала важную значимость своевременной персонализированной профилактики острых вирусных заболеваний и их бактериальных осложнений. Одним из основных направлений профилактики вирусных инфекций является разработка эффективных антисептиков для инактивации вирусов на руках и слизистых оболочках. Для эффективного уничтожения SARS-CoV-2 ВОЗ рекомендованы два антисептика: 70%-й раствор этанола и гипохлорит натрия. Предложенные антисептики являются устаревшими, обладают раздражающим действием на кожные покровы и слизистые оболочки. В связи с этим перспективным направлением исследований становится разработка новых антисептиков, обладающих избирательной токсичностью, малой летучестью, низким значением коэффициентов в системе «масло–вода», слабовыраженными липофильными свойствами, низкой всасываемостью в вакуольные структуры кожи и низким содержанием токсичных примесей. Одним из таких антисептиков является анавидин. Проведены разработка и отбор молекул, следующим запланированным этапом будет являться оценка эффективности и безопасности новых молекул, включая доклиническую и раннюю фазу клинических испытаний, в том числе в профилактики вирусных инфекций, включая SARS-CoV-2.
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
Генетический профиль карбапенем-устойчивых штаммов Acinetobacter baumannii
Аннотация
Цель исследования — молекулярно-генетическая характеристика карбапенем-устойчивых штаммов A. baumannii, включающая определение клональной принадлежности, анализ структуры резистома и вирулома, описание генетического окружения детерминант устойчивости, сравнительный генетический анализ, оценку филогенетических связей. Материалы и методы. Материалом исследования служили карбапенем-устойчивые штаммы A. baumannii (n = 7). Проведено полногеномное секвенирование ДНК штаммов A. baumannii и биоинформатический анализ результатов с использованием web-сервисов и баз данных. Результаты. Исследуемые штаммы A. baumannii принадлежали сиквенс-типам ST2Pas/ST2062,2063Oxf (n = 5) и ST78Pas/ST1757Oxf (n = 2). Согласно данным филогенетического анализа, нуклеотидные последовательности исследуемых штаммов A. baumannii ST2Pas/ST2062,2063Oxf группировались в единый кластер, а последовательности штаммов A. baumannii ST78Pas/ST1757Oxf объединялись с последовательностью штамма A. baumannii AbCTX5, выделенного во Франции в 2015 г. Показано, что штаммы A. baumannii характеризовались наличием как собственных генов карбапенемаз (OXA-51 подобных), так и приобретенных генов. В частности, у представителей ST2Pas/ST2062,2063Oxf определены гены blaOXA-23, а у штаммов A. baumannii ST78Pas/ST1757Oxf — blaOXA-72 в составе плазмидной ДНК. Установлено, что штаммы A. baumannii ST78Pas/ST1757Oxf обладали дополнительными генами бета-лактамаз расширенного спектра. Так, у обоих штаммов присутствует ген цефалоспориназы CTX-M-115, ассоциированный с ISKpn26, а штамм A. baumannii NNAb_2023.3 имеет дополнительный ген blaCARB-16. Для большинства исследуемых штаммов A. baumannii характерно наличие приобретенных генов ферментов, связанных с модификацией макролидов (mph(E), msr(E)), хлорамфениколов (catB8), аминогликозидов (aadA, aph(3'')-Ib, aph(6)-Id, aac(6')-Ib, aph(3')-Ia, armA). Сравнительный анализ показал, что у штаммов A. baumannii ST2Pas/ST2062,2063Oxf гены резистентности к макролидам, аминогликозидам и сульфаниламидам находятся в составе Tn6279-подобного транспозона, а гены аминогликозидаз aph(3'')-Ib, aph(6)-Id ассоциированы с IS91-подобным мобильным элементом. У штаммов A. baumannii ST78Pas/ST1757Oxf гены устойчивости к аминогликозидам, макролидам, сульфаниламидам и гены бета-лактамаз сгруппированы на участке от 60 до 80 тыс. п.н. между генами glmS и hutC. Все штаммы A. baumannii характеризовались наличием мутаций в генах gyrA и parC, ассоциированных с устойчивостью к фторхинолонам. Таким образом, получены новые знания о генетическом профиле карбапенемустойчивых штаммов A. baumannii, являющихся представителями эпидемически значимых международных клональных линий.
Оценка субпопуляционного состава лимфоцитов в периферической крови и индуцированной липополисахаридом цитокинсекреторной активности в культурах мононуклеарных лейкоцитов больных с лихорадочной и менингеальной формами клещевого энцефалита
Аннотация
Введение. Результаты многих исследований особенностей иммунного ответа у больных с различными клиническими формами клещевого энцефалита (КЭ) являются достаточно противоречивыми. Целью исследования было изучение особенностей изменений субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови и активности спонтанной и липополисахарид (ЛПС)-стимулированной продукции цитокинов в культурах мононуклеарных лейкоцитов у больных с лихорадочной и менингеальной формами острого КЭ. Материалы и методы. I и II группы соответственно включали 16 и 12 больных с лихорадочной и менингеальной формами острого КЭ, а контрольная группа — 13 здоровых доноров, у которых в первую неделю болезни в периферической крови методом проточной цитофлуориметрии были проанализированы гемограмма, абсолютное и относительное число Т-лимфоцитов, Т-хелперов/индукторов, Т-цитотоксических лимфоцитов и NK-клеток, а также дважды в динамике — при госпитализации и через 2 недели при выписке — методом иммуноферментного анализа в кондиционной среде культур мононуклеарных лейкоцитов крови была проведена оценка концентраций спонтанной и ЛПС-стимулированной секреции TNFα, IL-1β, IL-6, IL-10, IL-8 и MCP-1. Для статистического анализа использовали U-критерии Манна–Уитни и критерий Вилкоксона. Результаты. Во II группе у больных с клинически более тяжелой менингеальной формой КЭ уровни спонтанной и/или ЛПС-стимулированной секреции провоспалительных цитокинов IL-1β, IL-6, MCP-1 и TNFα были существенно ниже, а IL-8, напротив, выше, чем у пациентов с лихорадочной формой КЭ. Кроме того, у больных с менингеальной формой КЭ уровни спонтанной и/или ЛПС-индуцированной секреции IL-6 и TNFα не имели статистически значимых различий от контрольных значений, что также свидетельствовало о подавлении их продукции. Напротив, в I группе уровни спонтанной и/или ЛПС-индуцированной продукции IL-1β, IL-6, MCP-1 и TNFα были значительно выше, чем в контроле. Спонтанная секреция иммуносупрессорного цитокина IL-10 у пациентов обеих групп существенно превышала таковую у здоровых лиц. Независимо от клинической формы у пациентов с КЭ в крови выявлено существенное снижение по сравнению с условно-здоровыми донорами относительного числа лимфоцитов, относительного и абсолютного числа Т-цитотоксических клеток. У больных с менингеальной формой КЭ отмечалось статистически значимое повышение числа нейтрофилов в гемограмме, снижение относительного и абсолютного количества NK-клеток по сравнению с больными с менее тяжело протекающей лихорадочной формой КЭ. Выводы. Развитие менингеальной формы у больных острым КЭ ассоциировано с более выраженной дизрегуляцией иммунного ответа, приводящей к дефициту NK-клеток, количественному дисбалансу субпопуляций Т-лимфоцитов, увеличению числа нейтрофилов в периферической крови и подавлению продукции провоспалительных цитокинов, ответственных за реакции врожденного иммунитета.
Оценка корреляции биологического разнообразия микробиоты ротоглотки со степенью тяжести и частотой обострений у пациентов с атопическим дерматитом
Аннотация
Атопический дерматит (АтД) — многофакторное воспалительное заболевание кожи, характеризующееся зудом, хроническим рецидивирующим течением и различными возрастными особенностями. Патогенез АтД еще полностью не выяснен. Важным фактором возникновения и прогрессирования АтД является дисбаланс симбиотической микробиоты. Научная литература содержит небольшое количество информации об участии микроорганизмов ротоглотки в иммунопатогенезе АтД. Цель исследования — провести анализ биологического разнообразия микробных сообществ ротоглотки в группах пациентов с различной степенью тяжести АтД и на разных стадиях АтД (ремиссия/обострение). В исследование были включены 97 пациентов с различной степенью тяжести АтД. Также было проведено культуральное исследование выделений из ротоглотки. Посев материала проводили на расширенный перечень питательных сред и инкубировали при температуре 37°С в течение 5 суток. Для оценки биологического разнообразия микробиоты ротоглотки использовался коэффициент постоянства (C), позволяющий классифицировать отдельные микроорганизмы как постоянные, дополнительные или временные. Статистические расчеты проводились с использованием программного обеспечения StatTech (версия 4.0.0, разработчик ООО «Статтех», Россия). В ходе исследования у включенных в него пациентов было выделено и идентифицировано 58 видов микроорганизмов. В ходе статистического анализа были получены значимые различия в частоте выделения, в зависимости от различной степени тяжести АтД, для таких микроорганизмов, как Streptococcus vestibularis и Rothia dentocariosa. При выделении R. dentocariosa из ротоглотки вероятность возникновения обострения АтД снижалась в 6 раз. При выделении S. vestibularis вероятность возникновения обострения АтД, в отличие от R. dentocariosa, увеличивалась в 5 раз. Таким образом, выявление переходов отдельных микроорганизмов от транзиторной к дополнительной и постоянной микробиоте и наоборот, в зависимости от стадии и тяжести АтД, позволяет нам проанализировать влияние определенных микроорганизмов на патологические процессы при АтД и установить предпосылки для открытия новых микробиологические предикторов обострения и ремиссии АтД.
Особенности генов гемагглютинина вирусов гриппа и возможности их рекодирования
Аннотация
Мир уже вступил в стадию возрастания вероятности возникновения новой пандемии, что побуждает к поиску новых вакцин против гриппа, поскольку эффективность существующих к нему вакцин лишь субоптимальная. С пандемией Covid-19 открылась возможность использования мРНК-вакцин, и перспектива поиска новых противогриппозных вакцин на основе мРНК гена гемагглютинина (НА) представляется весьма привлекательной. Как правило, мРНК-вакцина является продуктом рекодирования, обеспечивающего стабильность мРНК. Однако результаты рекодирования мРНК бывают неоднозначными. Цель данного сообщения — проанализировать особенности генов и белков НА и рассмотреть возможности и ограничения их рекодирования. Источником первичных структур белков НА и их генов служили общедоступные в Интернете базы данных. Определяли аминокислотный состав и частоту дипептидов, нуклеотидный и динуклеотидный составы, %GС, трансляционный код и составы соседствующих ди- и трикодонов, распределение по первичной структуре НА явных и синонимических мутаций. Подтипы H1N1 и H3N2 имеют в их НА генах как частные, так и общие особенности (ограничения), различаясь не только по числу замен в самом белке, но и по числу и распределению синонимических кодонов в гене, не проявляющихся в первичной структуре самого белка НА, но выступающих, по-видимому, как скрытый фактор, обусловливающий низкую эффективность классических противогриппозных вакцин. Выявление нескольких ограничений в структуре генов НА предполагает, что любая ее модицификация (в любом гене) должна не противоречить каждому из ограничений, установленных природой. Частота динуклеотидов СрG у всех исследованных штаммов низкая, но возможность оптимизации ее у штаммов H1N1 из-за запрета квартета в гене НА кодонов, кодирующих аргинин, особенно ограничена и может быть реализована через синонимические кодоны других аминокислот (аланина, пролина, треонина или серина). По сравнению с подтипом H1N1 у подтипа H3N2 можно предвидеть больше возможностей в конструировании стабильной мРНК гена НА.
Грипп и негриппозные ОРВИ у детей. взаимосвязь профиля цитокинов, параметров системы «перекисное окисление липидов — антиоксидантная защита» с клинико-лабораторными показателями
Аннотация
Грипп и другие острые респираторные вирусные инфекции (ОРВИ) наносят существенный ущерб здоровью населения РФ по причине их сезонной циркуляции и преимущественному поражению детей раннего возраста. Данных о показателях профиля цитокинов, неспецифической системы «ПОЛ — АОЗ» и их взаимосвязях с клиническими характеристиками при данных заболеваниях у детей дошкольного возраста крайне мало. Целью настоящего исследования явилась оценка параметров цитокинового профиля, системы «ПОЛ — АОЗ» и их взаимосвязи с клинико-лабораторными характеристиками заболеваний у детей дошкольного возраста с гриппом и другими ОРВИ. Обследовано 86 детей дошкольного возраста (3–6 лет): с установленным диагнозом грипп (n = 31), негриппозными ОРВИ (n = 28), практически здоровые дети (контрольная группа (n = 27). Всем детям методом твердофазного иммуноферментного анализа проводили определение в сыворотке крови концентрации С-реактивного белка и цитокинов IL-1β, IL-4, IL-6, IL-8, TNFα, IFNα, IFNγ. Для оценки состояния системы «ПОЛ — АОЗ» использовались спектрофотометрические, флюорометрические и иммуноферментные методы анализа. В группе детей с гриппом в сравнении с другими ОРВИ выявлена более высокая частота встречаемости интоксикационного синдрома. В цитокиновом профиле у детей обеих клинических групп в сравнении с контрольными значениями увеличивались показатели, как провоспалительного, так и противовоспалительного характера. В группе детей с негриппозными ОРВИ в неспецифической системе «ПОЛ — АОЗ» найдены более высокие значения конечных продуктов ПОЛ на фоне сниженной концентрации жирорастворимых витаминов, общей антиокислительной активности, уровня GSH, активности СОД. В группе с гриппом повышены значения первичных и конечных продуктов ПОЛ, снижены значения ретинола, α-токоферола, общей антиокислительной активности, выше уровни GSSG и СОД. Отмечены многочисленные корреляционные зависимости в группе детей с ОРВИ: IL-1β — кетоны, IL-6 — кетоны, IL-8 — кетоны, TNFα — кетоны, IL-4 — кетоны, IFNγ — одышка, IFNα — кашель, Дв.св. — лихорадка, Дв.св. — АСТ, ШО — интоксикация, ретинол — лихорадка, GSSG — кашель. Группа с гриппом отличалась следующими взаимосвязями: IL-4 – кетоны, IL-4 – лихорадка, IFNα – кетоны, ДК – АСТ. Можно заключить, что у детей дошкольного возраста с ОРВИ и гриппом изменения в цитокиновом профиле сопровождаются ростом про- и противовоспалительных цитокинов, повышенной интенсивностью реакций липопероксидации на фоне сниженных значений антиоксидантных факторов. В группе с ОРВИ отмечаются взаимосвязи конечных токсичных продуктов липопероксидации — шиффовых оснований — с показателем интоксикации, а также наличие защитных механизмов в виде связей интерферонов с клиническими проявлениями заболевания. Группа с гриппом отличалась наличием зависимостей протективного характера, что может иметь благоприятный эффект в условиях развития патологического процесса. Полученные данные помогут расширить понимание патогенетических механизмов иммунной реактивности и неспецифических реакций липопероксидации у пациентов дошкольного возраста и сформулировать соответствующие мероприятия по коррекции.
Исследование изменений лейкоцитарной формулы крови в период пандемии
Аннотация
Актуальность. Возможность зоонозной передачи высокопатогенных штаммов коронавирусов человеку не вызывала большой обеспокоенности у медицинских работников, что стало неожиданностью и привело к пандемии, вызванной коронавирусной инфекцией, весной 2020 г. Осенью 2023 г. наблюдалось увеличение количества инфицированных коронавирусом людей. В 2024 г. наблюдаются вспышки гриппа, характеризующиеся волновым изменением температуры, что может говорить о появлении нового штамма вируса. В настоящее время представляет интерес изучение последствий влияния новой коронавирусной инфекции на иммунную систему человека. К настоящему времени были изучены отдельные параметры лейкоцитарной формулы крови, но совокупному воздействию уделено недостаточно внимания, в связи с тем, что многие показатели ведут себя неоднозначно и не было возможности определить суммарное воздействие на иммунную систему. Целью работы является исследование моделей, описывающих динамику изменения показателей иммунограмм в период пандемии у детей и подростков, проживающих в Пермском крае. Задачи исследований заключались в анализе дифференциальных уравнений, описывающих изменение параметров иммунограмм; обобщении результатов исследований по деструкции иммунитета в результате воздействия коронавирусной инфекции. Результаты. Исследованы дифференциальные уравнения на экстремум и определены возрастные параметры пациентов, имеющие наибольшее отклонение показателей от референтного интервала. Заключение. Несмотря на то что отдельные элементы проточного цитофотометрического анализа носят колебательный характер с большими импульсами, обобщение показателей проточного цитофотометрического анализа (ПЦФМ) показало интересную картину, характеризующуюся плавным изменением в сторону увеличения отклонения у старшего подросткового возраста при всех исследуемых параметрах. Показатели ПЦФМ, находящиеся в референтном интервале, имели одинаковое направление в сторону отрицательного отклонения с увеличением возраста с тем отличием, что в состоянии болезни отклонение было в 2 раза больше. В состоянии отсутствия заболевания превышение показателей ПЦФМ имело положительную тенденцию с увеличением возраста, а понижение показателей ПЦФМ от реферетного интервала имело отрицательную тенденцию. В состоянии заболевания при пониженных иммуноглобулинах при превышении референтного интервала ПЦФМ наблюдается выпуклое отклонение в отрицательную сторону при увеличении возраста. При понижении от референтного интервала наблюдается выпуклая кривая с положительным отклонением. При повышенных иммуноглобулинах при превышении референтного интервала ПЦФМ имеет выгнутое положительное отклонение, при понижении референтного интервала ПЦФМ также имеет выгнутое положительное отклонение, превышающее почти в 5 раз.
Влияние новой коронавирусной инфекции на показатели гемограммы в раннем периоде выздоровления пациентов с ишемической болезнью сердца
Аннотация
Лабораторные данные, особенно общий анализ крови, играют важную роль при лечении инфекционных заболеваний, в том числе COVID-19. Однако у больных с ишемической болезнью сердца (ИБС) и COVID-19 общий анализ крови анализируется редко и недостаточно, чтобы полностью оценить воздействие новой коронавирусной инфекции на пациентов с кардиологическими заболеваниями. Цель исследования — изучение влияния новой коронавирусной инфекции на показатели гемограммы в раннем периоде выздоровления пациентов с ИБС зрелого и пожилого возраста. Исследование выполнено в Курской городской клинической больнице скорой медицинской помощи в 2021–2022 гг. В нем приняли участие 58 пациентов зрелого возраста (45–59 лет), страдающих ИБС, перенесших новую коронавирусную инфекцию, и 62 пациента пожилого возраста, страдающих ИБС, перенесших новую коронавирусную инфекцию. Забор крови проводился в утренние часы из поверхностных вен предплечья в специальные пробирки Vacutainer с активатором свертываемости. У пожилых пациентов через 3–4 недели после выздоровления сохранялись значимые изменения показателей красной крови — снижение содержания в периферической крови эритроцитов, гемоглобина и гематокрита. У пожилых пациентов с ИБС, перенесших новую коронавирусную инфекцию средней степени тяжести, через 3–4 недели отмечался также повышенный относительно группы сравнения уровень лейкоцитов, нейтрофилов, сегментоядерных нейтрофилов и СОЭ. Следует обратить внимание, что в раннем периоде реконвалесценции пациентов с ИБС пожилого возраста с перенесенной новой коронавирусной инфекцией была статистически значимо повышена величина СОЭ, что подтверждает сохранение воспалительного процесса. Проведя оценку информативности исследованных параметров общего анализа крови по рассчитанным показателям Кульбака, установлена наибольшая информативность для тромбоцитов, лейкоцитов и СОЭ. Таким образом, среди проанализированных показателей общего анализа крови наибольшей информативностью и прогностической значимостью в отношения протекания раннего реконвалесцентного периода пациентов с ИБС пожилого возраста, переболевших новой коронавирусной инфекцией, обладают тромбоциты, СОЭ и лейкоциты, которые предлагается использовать в качестве биомаркеров раннего реконвалесцентного периода.
Динамика резистентности организма в постковидном периоде
Аннотация
Несмотря на официальное окончание пандемии новой коронавирусной инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2, вопрос о состоянии специфической и неспецифической резистентности в постковидном периоде и возможных последствий перенесенного COVID-19 остается не до конца изученным. Проведено клинико-лабораторное обследование 124 пациентов в различные сроки после перенесенной COVID-19-инфекции. 62 пациента полностью выздоровели и 62 имели признаки постковидного синдрома. У всех пациентов оценивали общее количество лейкоцитов и лейкоцитарную формулу, а при наличии постковидного синдрома определяли общее содержание IgA, IgМ, IgG и IgE в сыворотке крови, а также количество лимфоцитов CD3, CD4, CD8 и CD19. Результаты показали, что вне зависимости от наличия постковидного синдрома у всех пациентов в течение полугода после перенесенной COVID-19-инфекции содержание лейкоцитов в периферической крови ниже, чем у не болевших. При этом восстановление абсолютного количества нейтрофилов происходит только спустя 12 месяцев. При наличии постковидного синдрома абсолютное количество CD3+, CD4+ и CD19+ лимфоцитов было более низким, чем у здоровых. При этом в период от 3 до 15 месяцев титр IgA у пациентов с ПКС был достоверно ниже, а общее содержание IgM и IgG выше, что не сопровождалось какими-либо клиническими или лабораторными признаками воспаления. Содержание общего IgЕ в крови было достоверно выше и нарастало к концу периода наблюдения. Снижение активности неспецифической защиты, а также показателей клеточного и гуморального иммунитета у пациентов с постковидным синдромом сопровождается увеличением у них частоты вирусных и бактериальных инфекций различной локализации. Если в течение первого пулугодия увеличение общего IgЕ в крови не сопровождается клиническими признаками атопии, то спустя 6 месяцев частота аллергических проявлений нарастает. В этот же период учащаются случаи суставного синдрома в виде артралгий или прогрессирующей деструкции суставов. Атопические проявления часто сочетаются с суставным синдромом. Таким образом, после перенесенной COVID-19-инфекции в организме длительное время сохраняется низкий уровень неспецифической защиты. У пациентов с постковидным синдромом низкая неспецифическая и специфическая резистентность организма проявляется вирусными и бактериальными инфекциями слизистых оболочек и кожи. Дисбаланс в иммунной системе способствует формированию аллергических и аутоиммунных процессов.
Нарушения Т-клеточного звена иммунитета через 6–12 месяцев после острой фазы коронавирусной инфекции: скрининговое исследование
Аннотация
При острой вирусной инфекции, вызванной вирусом SARS-CoV-2, отмечается снижение уровня Т-лимфоцитов в периферической крови пациентов, что, по-видимому, тесно связано с нарушениями функционирования тимуса, которые могут сохраняться длительное время после перенесенного заболевания. Поэтому целями данного исследования явились изучение уровня Т-клеточных эксцизионных колец (TREC, от англ. «T-cell receptor excision circles»), а также оценка состояние иммунной системы пациентов на основе скрининга по основным субпопуляциям лимфоцитов периферической крови человека после перенесенного COVID-19. Были сформированы следующие группы пациентов: пациенты, которые были обследованы через 6–12 месяцев после перенесенного острого COVID-19 с нормальным содержанием TREC (TRECn, n = 109); пациенты, которые также были обследованы через 6–12 месяцев после перенесенного острого COVID-19, но обладавшие сниженным содержанием TREC в периферической крови (TREClow, n = 29); условно здоровые добровольцы (HC, n = 18). Для оценки уровней TREC применяли набор реагентов «TREC/KREC-AMP PS», для выявления основных субпопуляций лимфоцитов использовали многоцветную проточную цитометрию. Обследованные группы достоверно не различались по уровню CD3+ клеток. Однако в случае CD4+ Т-клеток было обнаружено, что обе группы пациентов TREClow и TRECn длительное время сохраняют сниженное относительное содержание этих клеток в циркулирующей крови по сравнению с контрольными значениями (40,8% (31,6; 50,1) и 46,4% (40,0; 53,0) против 53,5% (47,36; 56,9) при p < 0,001 и р = 0,004 соответственно). Абсолютное содержание CD4+ Т-лимфоцитов у TREClow пациентов было снижено как НС, так и TRECn (701 кл/1 мкл (478; 807) против 1005 кл/1 мкл (700; 1419) при р = 0,020 и 876 кл/1 мкл (661; 1046) при р = 0,008 соответственно). Содержания CD8+ Т-лимфоцитов было достоверное увеличено в обеих группах пациентов после острого COVID-19 — 29,4% (20,7; 39,7) в группе TREClow, 26,5% (21,1; 32,7) в группе TRECn против 21,3% (17,1; 26,0) в группе сравнения при p = 0,024 и р = 0,026 соответственно. Кроме того, в группе TRECn абсолютное содержание CD8+ Т-клеток достоверно превосходило значения контроля (508 кл/1 мкл (372; 622) против 356 кл/1 мкл (247; 531) при р = 0,044). Полученные нами результаты указывают факт нарушения функционирования Т-клеточного звена приобретенного иммунитета у пациентов после перенесенной коронавирусной инфекции, которые могут быть тесно связаны с процессами созревания и дифференцировки Т-клеток в тимусе. Длительное снижение уровня TREC в циркуляции может оказывать существенные влияния на состояние иммунной системы пациентов и нуждается в проведении иммунокорригирующей терапии.
Поствакцинальный иммунитет и частота пневмоний у медицинских работников после применения различных схем вакцинации против гриппа между 1 и 2 пиками заболеваемости COVID-19
Аннотация
Введение. В отсутствии вакцины против SARS-CoV-2 сезонная вакцинация против гриппа в период пандемии способствовала снижению восприимчивости и тяжести течения COVID-19. Цель — оценить состояние поствакцинального иммунитета к гриппу, частоту и тяжесть пневмоний у медицинских работников после применения различных схем вакцинации против гриппа, между 1 и 2 пиками эпидемического подъема COVID-19. Материалы и методы. Проведен сравнительный анализ результатов уровней антител к штаммам вируса гриппа и частоты развития пневмонии у 487 медицинских работников: I группа — непривитые в 2020–2021 (n = 281), II группа — вакцинированные против гриппа (Совигрипп) (n = 98), III группа — получившие сочетанную вакцинацию против гриппа и пневмококка (Превенар 13) (n = 108). Результаты. Через 6 месяцев после вакцинации наиболее высокие показатели выявлены к вирусу гриппа A(H3N2), уровень серопротекции (≥ 1:40) от 49,0% у непривитых (I группа) до 53,4–53,2% у получивших сочетанную вакцинацию (III группа), а также вакцинированных только от гриппа (II группа), p > 0,05; к штамму A(H1N1) уровень серопротекции в I группе — 24,5%, ниже (p < 0,04), чем у II группы — 32,7%, но не различается от уровня 40,4% в III группе; к штамму B уровень серопротекции самый низкий: от 19,4% в группе непривитых до 22,4% во II группе и 23,4% в III группе. Частота развития пневмоний в I (3,9%), II (3,1%) и III группах (4,6%) не различались, однако среди всех вакцинированных пневмонии по тяжести клинического течения были легкими, тогда как у непривитых сотрудников кроме легкого течения (45,4%, у 5 из 11 человек) пневмонии в 36,4% (4 из 11 человек) случаев оценивались как средней тяжести и в 18,2% (2 из 11 человек) случаев как тяжелые, с летальными исходами. Выводы. Проведенное исследование показало, что через 6 месяцев после проведения сезонной иммунизации против гриппа между 1 и 2 пиками эпидемического подъема COVID-19 иммуногенность вакцины соответствует критерием CPMP по штамму A(H3N2). У всех вакцинированных (100%) отмечено легкое течение пневмоний с клиникой COVID-19, у непривитых в 36,4% случаев имело место среднетяжелое течение и в 18,2% — тяжелое течение с летальным исходом.
Иммуногенность и безопасность вакцины DTPW-HEP B-HIB (PRP-T) (Пентавак) у младенцев в возрасте 2–7 месяцев: клиническое испытательное постмаркетинговое исследование 4 фазы
Аннотация
Вакцины играют критически важную роль в охране общественного здоровья, особенно для детей. Крайне важно активно решать проблемы безопасности для поддержания доверия к вакцинации. Скептицизм вокруг вакцин может иметь существенные неблагоприятные последствия для общего благополучия всего населения, потенциально приводя к тому, что люди отказываются от жизненно важных прививок, тем самым создавая риски для общественного здравоохранения. Следовательно, обеспечение уверенности в безопасности вакцин остается первостепенной задачей. Материалы и методы. Настоящее клиническое испытание четвертой фазы было проведено в качестве постмаркетингового исследования (PMS) на здоровых младенцах 2–7 месяцев (N = 539) для оценки иммунитета и безопасности индийской пятивалентной вакцины против дифтерии, столбняка, коклюша, гепатита В и Haemophilus influenza типа b [DTPW-HEPB-HIB (PRP-T)/PENTAVAC] в четырех различных центрах в провинции Тегеран. Образцы крови обследованных младенцев были собраны до введения вакцины (возраст 2 месяца) и через 1 месяц после третьей дозы (возраст 7 месяцев) для определения антител против всех антигенов пятивалентной вакцины методом ELISA. Результаты. Показано, что уровни серозащиты и защитных антител после трех доз вакцины против антигенов Haemophilus influenza типа b, дифтерии, столбняка, вирус гепатита В и коклюша составили 99,1%, 98,7%, 99,8%, 99,4% и 69,6% соответственно. Статистический анализ показал, что величина P для всех компонентов вакцины была сопоставима (P < 0,001). Пять наиболее распространенных побочных эффектов применения вакцины были представлены в виде умеренной лихорадки (10%), эритемы в месте вакцинации (9,1%), воспаления (4,3%), боли в месте вакцинации (3,3%) и беспокойства (2,6%). Выводы. Результаты настоящего исследования продемонстрировали выраженное увеличение уровня антител против всех пяти компонентов вакцины. В свете полученных результатов можно заключить, что вакцина Пентавалент не только эффективна в повышении иммунитета против указанных заболеваний, но и несет минимальный риск побочных эффектов в исследуемой популяции. Приводимые результаты вносят вклад в совокупность доказательств, подтверждающих безопасность и эффективность вакцин, подчеркивая их решающую роль в защите общественного здравоохранения.
Оценка титра антител после антиидиотипной вакцинации против бешенства с адъювантом нанохитозаном
Аннотация
Введение. Бешенство — зоонозная инфекция с летальностью 100%. Антиидиотипические антитела (Ab2) из куриного иммуноглобулина (IgY) могут использоваться в качестве замещающего антигена вируса бешенства. Целью настоящего исследования было изучение потенциала вакцины против бешенства на основе антиидиотипических антител (Ab2) с нанохитозаном в качестве адъюванта, с оценкой уровня титра антител, нейтрализующих вирус бешенства. Материалы и методы. Ab2 получают из очищенных куриных иммуноглобулинов. Нанохитозан производится из хитозана панциря креветок. Оценка вакцинации проводилась на крысах в сравнении с коммерческими вакцинами в качестве положительного контроля и физиологическим раствором в качестве отрицательного контроля. Характеристики использованной вакцины: IgY Ab2 IgY против антигена бешенства с Mr ~180 kDa, тяжелые цепи (Mr ~60 kDa) и легкие цепи (Mr ~30 kDa) IgY. Нанохитозан имеет размер менее 100 нм, хорошо растворяется и не вызывает побочных эффектов у экспериментальных животных. Результаты. Вакцина используется в концентрации 0,5%, где соотношение нанохитозана и Ab2 составляет 1:1, при концентрации Ab2 около 1000 единиц на мл суспензии Ab2. Выводы. Настоящее исследование позволяет заключить, что антиидиотипические антитела, растворенные в адъюванте нанохитозана, могут вызывать образование антител с титрами, которые статистически не отличаются от таковых, индуцированных коммерческими вакцинами против бешенства. Нанохитозан является потенциальным кандидатом в качестве адъюванта вакцины, безопасен в использовании и может усиливать иммуногенность антигена при подкожном введении. Согласно результатам данного исследования, титры антител после вакцинации рекомендуется измерять регулярно: например, каждую неделю в течение шести недель после вакцинации, что позволяет определить время пика титра антител для установления времени ревакцинации.
Характеристика белкового профиля ВИЧ у пациентов с впервые выявленной инфекцией
Аннотация
Эпидемия ВИЧ-инфекции остается одной из крупнейших в мире. Для диагностики данного заболевания разработан большой ряд методик, однако наиболее распространенным методом остается Вестерн-блот. Данный метод, основанный на определении специфических вирусных белков, позволяет оценить протекающие вирусные процессы. Несмотря на дискуссии относительно критериев положительного результата и выбора минимального набора вирусных белков для достоверной интерпретации полученных результатов, количество исследований белковых профилей ВИЧ-пациентов различных групп остается недостаточным, особенно в контексте Российской Федерации. Цель работы заключалась в оценке частот встречаемости вирусных белков ВИЧ у группы пациентов с впервые выявленной инфекцией. Материалом служили 2566 образцов сыворотки крови, поступивших от лиц с впервые выявленной инфекцией, для референсного анализа на ВИЧ. Осуществляли анализ методами ИФА и ИХЛА с последующим иммуноблоттингом. В дальнейшем для оценки жизненного цикла вируса и преобладания его отдельных стадий анализировали следующие вирусные белки: gp160, gp120, gp41, p55, p40, р24, p17, p66, p51, p31. Референсным белком для сравнения был выбран gp110/120 в связи с наименьшей частотой встречаемости среди группы продуктов гена env — 96,06%. Обнаружена достоверно сниженная частота встречаемости следующих белков различных групп: группы GAG — p55 (80,91%), p40 (72,14%), нуклеокапсида p18/17 (67,37%); группы POL — p68/66 (89,57%), p52/51 (81,91%), p34/31 (86,02%). Показаны достоверные отличия частот вирусных белков между возрастными группами, в том числе в зависимости от пола. Представлены гипотезы, интерпретирующие полученные данные. Сопоставление профиля антител к вирусным белкам с течением инфекционного процесса и состоянием пациента позволит обнаружить закономерности и принимать необходимые меры по оперативной диагностике с расширенными результатами, такими как срок инфицирования, вирусная нагрузка и тяжесть течения.
Распространенность и чувствительность к антибиотикам термотолерантных Campylobacter spp., выделенных от людей и птиц в Республике Гвинея
Аннотация
Введение. Проблема диарейных заболеваний остается актуальной для современного здравоохранения всех стран. Кампилобактериоз является наиболее распространенным инфекционным заболеванием, передающимся через пищевые продукты, а мясо птицы — общепризнанный фактор передачи. Цель исследования: оценка распространенности термотолерантных Campylobacter spp. в Гвинейской Республике у пациентов с диарейным синдромом и кур при различных типах содержания. Материалы и методы. Изучено 724 пробы испражнений пациентов с диарейным синдромом и 283 пробы помета кур, содержащихся в личных хозяйствах и птицефермах. Для бактериологического метода использовали селективные питательные среды. Идентификацию штаммов Campylobacter spp. проводили традиционными рутинными тестами (морфология клеток, оксидазный и каталазный тесты, гидролиз гиппурата натрия и индоксилацетата) и методом MALDI-ToF масс-спектрометрией. Чувствительность штаммов к антибиотикам определяли диско-диффузионным методом. Результаты интерпретировали в соответствии с критериями EUCAST версий 2019–2022 гг. Результаты. Campylobacter spp. был выявлен в 65 из 724 пробах испражнений пациентов с острой диареей, из них 83,08% были идентифицированы как C. jejuni и 16,92% — как C. coli. Из 237 штаммов Campylobacter spp., выделенных из помета кур были идентифицированы C. jejuni 54,0% и C. coli 46,0%. Кампилобактерии, выделенные от людей были устойчивы к тетрациклину 40,0%, к эритромицину 6,15%, к ципрофлоксацину 12,31%. Штаммы, выделенные от промышленной птицы, были устойчивы к тетрациклину 42,55%, к ципрофлоксацину 22,70% и эритромицину 11,35%. Штаммы, выделенные от домашних кур, характеризовались резистентностью к тетрациклину — 4,17%, к ципрофлоксацину — 1,04%, все штаммы были чувствительны к эритромицину. Выводы. В связи с широкой распространенностью Campylobacter spp., вызываемые ими инфекционные заболевания остаются актуальной проблемой. Изучение устойчивости к антибиотикам Campylobacter spp. среди домашней птицы может позволить разработать новые подходы к подтверждению значимости их как фактора передачи и усовершенствовать национальную систему профилактики кампилобактериоза.
КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ
Актуальные вопросы описторхоза
Аннотация
В статье проведен анализ статистических данных заболеваемости описторхозом на территории Российской Федерации и в зарубежных странах в 2020 г. по сравнению с 2019 годом, приведены абсолютные и интенсивные показатели заболеваемости в целом в стране и конкретно в субъектах Российской Федерации — республиках и областях, удельный вес гельминтозов в целом, и описторхоза, в частности, в общей структуре паразитарных заболеваний, а также удельный вес описторхоза в общей структуре биогельминтозов, его динамика, распространенность возбудителя данного паразитоза. Проведен сравнительный анализ показателей заболеваемости в регионах, где был зарегистрирован данный гельминтоз, со среднестатистическими показателями страны. В результате проведенной работы были сделаны выводы о том, что несмотря на снижение общей паразитарной заболеваемости в стране, в ряде регионов отмечается превышение среднестатистических показателей, местами значительное. Так, в Республике Коми интенсивный показатель превысил показатель по стране в 4 раза, в Курганской, Вологодской, Архангельской областях и Ненецком автономном округе — в 3 раза. В статье приведен анализ возрастных групп населения и удельный вес городского, а также сельского населения, пораженного описторхисом. Описторхоз остается актуальной социально значимой проблемой практического здравоохранения, занимая одно из ведущих мест среди всех паразитарных инвазий, а среди биогельминтозов — первое, что не может не вызывать настороженности, и наносит немалый ущерб здоровью населения. В статье определена особая клиническая и эпидемиологическая значимость описторхоза, которая объясняется тяжестью течения заболевания, поражением различных систем и органов, формированием серьезных осложнений, ведущих к инвалидности, а в ряде случаев к летальным исходам, наличием природных очагов, основная часть которых находится в Российской Федерации. Неблагополучными по описторхозу являются практически все территории, примыкающие к бассейнам рек Обь, Иртыш, Томь и их притокам. Приведены данные удельного веса обнаружения личинок гельминтозов в рыбе в 2020 г. и 2019 г. — в динамике с 2010 г. Проведен анализ литературных источников и научных статей по изучению описторхоза, распространению его возбудителя и значение для практического здравоохранения. Исходя из выше изложенного, важное значение в снижении заболеваемости и недопущении распространения данного паразитоза играет строгое соблюдение профилактических мер.
Серотонин и адреналин как ингибиторы образования внеклеточных ловушек нейтрофилов в эксперименте
Аннотация
Регуляция процесса нетоза нейтрофилов как провоцирующего фактора развития воспалительных и аутоиммунных заболеваний может составить основу высокоэффективной таргетной терапии. Цель — изучить модифицирующее действие серотонина и адреналина в отношении нетоза при фагоцитозе у крыс. Материалы и методы. Крысы линии Wistar, разделенные на контрольную (растворитель, 0,9% раствор NaCl) и опытные (серотонин и адреналин 1,43 и 0,143 мг/кг массы тела соответственно) группы. Внутрибрюшинное введение затравок — за 90 мин до забора крови, в которой определяли фагоцитарную активность (фагоцитарный индекс и фагоцитарное число) и степень суицидального нетоза нейтрофилов: с полной и частичной деконденсацией хроматина. Сравнение групп проводили с использованием парного критерия Стьюдента (для численных значений) и Мак-Немара (для дихотомических переменных). Степень линейной зависимости между выборками оценивали по критерию Пирсона (rxy). Результаты. Введение адреналина способствовало ингибированию нетоза на 41,5% относительно контроля (p < 0,001), серотонина — на 27,6% (p < 0,001). Соотношение нейтрофилов с полной деконденсацией хроматина и частичной для контрольной группы составило 1,0:0,9; для серотонина оно изменилось до 1,0:1,7, а для адреналина равнялась 1,0:1,4. Фагоцитарный индекс после введения серотонина возрос относительно контрольной группы на 4,9%, в то время как на фоне адреналина он снизился на 12,4% (p < 0,01). Выявлена высокая положительная корреляционная связь между нетозом и фагоцитарным индексом для контрольной и опытной с адреналином: rxy = 0,823–0,997. Для фагоцитарного числа и нетоза в тех же группах высокая отрицательная корреляция (rxy = –0,714–(–0,871)) и заметная положительная — для серотонина (rxy = 0,638). Заключение. Серотонин и адреналин в терапевтических дозировках способны оказывать выраженное ингибирующее действие в отношении нетоза, что может открывать перспективы к повышению эффективности терапии иммуновоспалительных и онкологических заболеваний. Использование серотонина является более предпочтительным, поскольку он обладает дополнительным иммуномодулирующим действием и не вызывает прямой стимуляции α- и β-адренорецепторов.
Лабораторное обеспечение серомониторинга поствакцинального иммунитета против коклюша
Аннотация
Одним из направлений эпидемиологического надзора за коклюшем является наблюдение за формированием гуморального иммунитета в индикаторной группе детей 3–4 лет с завершенной вакцинацией против коклюша и оценка доли серонегативных лиц. Это является прогностическим показателем для комплексной оценки заболеваемости в регионе. Применяемая для этого ранее реакция агглютинации (РА) стала вымещаться иммуноферментным анализом (ИФА). При этом возник вопрос об адекватности применения ИФА у лиц, привитых цельноклеточными вакцинами, и вопрос корректности интерпретация массовых результатов без унифицированного референтного значения IgG. Цель исследования — оценить напряженность гуморального противококлюшного популяционного иммунитета методом ИФА, определить особенности гуморальной защиты у привитых различными типами вакцин, выявить возрастные особенности, сформулировать рекомендации по оценке массовых результатов серомониторинга на основе сличительных исследований. За 2016–2020 гг. обследованы полностью привитые от коклюша дети (n = 1729) Самарской области; они распределены на 4 возрастные группы (< 3, 3–4 года, 5–7 лет, ≥ 7,1 лет) и на 3 группы по типу вакцинации: клеточные вакцины, бесклеточные вакцины, комбинированная. Биоматериал — сыворотка крови с выбраковкой несвоевременно отобранных и некачественных образцов. Для проведения ИФА использовано 2 набора, предназначенных для оценки поствакцинального иммунитета согласно инструкции производителя. Оба набора позволяют количественно определять IgG к B. pertussis, отличаются по единицам измерения и референтным значениям. Статистический анализ выполнен на программе StatTech v.2.6.2 (ООО «Статтех»). По результатам исследования наибольшая доля серонегативных детей находилась в группе привитых клеточными вакцинами, наименьшая среди привитых бесклеточными вакцинами. Установлено, что доля серонегативных привитых детей в «индикаторной группе» достигает 55,2%, что существенно выше допустимого уровня в 10,0%, и отличается в бóльшую сторону от литературных данных (30–40%), полученных преимущественно при использовании РА. Это может указывать на некорректность интерпретации результатов оценки именно поствакцинального иммунитета строго по референтным критериям иностранных производителей ИФА-наборов, в частности у привитых цельноклеточными вакцинами. Предложен способ расчета доли серонегативных лиц среди привитых от коклюша с использованием прогностической ценности отрицательных результатов применяемого набора в виде поправочного коэффициента. Необходимые значения прогностической ценности результатов были получены в ходе сличительных исследований случайной выборки сывороток крови от детей 3–4 лет (n = 70) с применением двух наборов для проведения ИФА («RIDASCREEN® Bordetella» и «SeroPertussis™ IgG») и построением внутрилабораторной сличительной панели. Для достоверной оценки доли серонегативных лиц в популяции следует отдавать предпочтение наборам с большей прогностической ценностью негативных результатов.