Том 13, № 4 (2023)

Естественные киллеры (NK-клетки) являются одной из групп лимфоцитов врожденного иммунитета. Часто NK-клетки изучают в контексте противоопухолевого и противовирусного иммунитета, а из-за нахождения в зоне границы контакта матери и плода (в матке) активно изучают их роль в развитии беременности. При этом их участие в антибактериальном иммунном ответе недостаточно изучено. Поскольку NK-клетки могут продуцировать цитокины, одним из возможных вариантов их участия в элиминации прокариотических патогенов является регуляция клеток иммунной системы — дендритных клеток, макрофагов и др. Однако в литературе также описаны варианты контактного цитолиза клеток, подвергшихся заражению внутриклеточными бактериями. Это возможно благодаря содержанию цитотоксических белков — перфорина, гранзимов, гранулизина в NK-клетках. В последние годы стало известно об участии NK-клеток в развитии иммунного ответа в отношении внеклеточных бактерий, в том числе группы ESKAPE, в состав которой входят условно-патогенные прокариоты, наиболее активно развивающие антибиотикорезистентность и вызывающие внутрибольничные инфекции. В обзоре авторами предпринята попытка обобщения данных научной литературы о роли NK-клеток в антибактериальном иммунитете. Изучение взаимодействия бактерий группы ESKAPE и NK-клеток также привлекает исследователей в связи со способностью прокариот изменять функции клеток иммунной системы, однако об оказываемых на NK-клетки эффектах известно крайне мало. При этом такие данные могли бы найти применение в аспекте поиска новых способов лечения онкологических заболеваний, а также стать основой для разработки новых подходов к регуляции характеристик NK-клеток при репродуктивных патологиях. Как упоминалось ранее, NK-клетки встречаются в децидуальной оболочке, где могут взаимодействовать с клетками плода, в том числе с клетками трофобласта. На сегодняшний день считается, что клетки могут взаимно регулировать свойства друг друга, что необходимо для протекания физиологической беременности. Вероятно, нарушение баланса в этой системе способно привести к развитию репродуктивных патологий. В обзоре суммированы имеющиеся на сегодняшний день данные об эффектах бактерий группы ESKAPE на NK-клетки, а также рассмотрены возможные механизмы развития нарушений взаимодействия NK-клеток и клеток трофобласта под влиянием бактерий группы ESKAPE. Поскольку в литературе нами встречено мало данных об этом явлении, экспериментальное изучение влияния бактерий группы ESKAPE на свойства NK-клеток видится необходимым этапом развития современной биологии.

Адекватный и репрезентативный мониторинг популяционного иммунитета к вирусу COVID-19, включая долгосрочное влияние на переболевших и вакцинированных людей, должен включать не только исследование гуморального, но также и Т-клеточного иммунного ответа. При этом важную информацию может дать не только способность клеток активироваться в ответ на специфический антиген, но и определение фенотипа реактивных клеток. Для этого нами разработан метод проточной цитометрии для оценки содержания антиген-реактивных Т-клеток, продуцирующих внутриклеточный IFNγ под воздействием на мононуклеарные клетки периферической крови (МКПК) человека антигенов вируса SARS-CoV-2, и проведена его валидация. Валидационные испытания методики проводили по следующим характеристикам: чувствительность, специфичность, прецизионность и робастность. Валидационные испытания методики по характеристикам «чувствительность» и «специфичность» проводили, исследуя положительные образцы доноров, переболевших COVID-19, с диагнозом, верифицированным лабораторными методами, и отрицательные образцы, отобранные от доноров с отрицательным анамнезом, не контактировавших с больными COVID-19, с отсутствием антител к антигенам SARS-CoV-2. Из крови доноров выделяли мононуклеарные клетки периферической крови методом центрифугирования в градиенте плотности фиколла и стимулировали специфические Т-клетки пептидами, соответствующими основным белковым антигенам коронавируса SARS-CoV-2 — пептиды S-белка и пептиды белков N, M, ORF3a и ORF7a. Учитывали данные на проточном цитометре, выделяя Т-клетки, продуцирующие IFNγ, и проводили статистический анализ полученных результатов. Значения площади, ограниченной ROC-кривой и осью ложноположительных классификаций (AUC) для популяций CD4 и CD8, составило от 0,97 до 1,00. Методика показала приемлемую сходимость и внутрилабораторную прецизионность, поскольку коэффициенты вариации для всех образцов МКПК не превышали 20%. Была подтверждена робастность при использовании МКПК в свежеприготовленном виде и после цикла заморозки/разморозки. По итогам валидации установлены границы определения позитивного и негативного отклика: для CD4-позитивных Т-клеток — 0,029%, для CD8-позитивных Т-клеток — 0,064–0,068%, а также критерии приемлемости для показателей отклика положительного и отрицательного контрольных антигенов. Таким образом подтверждена пригодность методики «Оценка антиген-реактивных Т-клеток, продуцирующих внутриклеточный IFNγ под воздействием на мононуклеарные клетки периферической крови человека антигенов вируса SARS-CoV-2, методом проточной цитометрии» для получения достоверных результатов при определении содержания внутриклеточного IFNγ в МКПК. Методику использовали при характеризации стандартных контрольных образцов для внутреннего контроля качества наборов ТиграТест® SARS-CoV-2.

Введение. Судьба эпидемического процесса COVID-19 зависит от популяционного иммунитета, способного предотвратить распространение возбудителя среди населения. Цель. Исследовать эволюцию популяционного гуморального иммунитета к SARS-CoV-2 населения Беларуси в динамике пандемии COVID-19.

Материалы и методы. Работу проводили по методологии оценки популяционного иммунитета к SARS-CoV, разработанной Роспотребнадзором России и Министерством здравоохранения Беларуси при участии НИИЭМ им. Пастера с учетом рекомендаций ВОЗ. Исследование одобрено комитетом по биоэтике Беларуси и локальным этическим комитетом НИИЭМ им. Пастера. Отбор участников проводили методом анкетирования с помощью технологии «облачного сервиса». Для проведения мониторинга популяционного иммунитета из общего числа волонтеров формировали когорту в составе 4661 человека, участвовавших в обследовании на всех этапах серомониторинга. Волонтеров рандомизировали по возрастным группам: 1–17; 18–29; 30–39; 40–49; 50–59; 60–69; 70+ лет, а также по территориальному и профессиональному признакам. Для определения антител к нуклеокапсиду (Nc Abs) и рецептор-связывающему домену (RBD Abs) гликопротеина S SARS-CoV-2 применяли соответствующие тест-системы в соответствии с инструкциями производителей.
Исследование проводилось в 4 этапа по единой схеме. Полученные результаты обрабатывали с использованием статистического пакета Excel 2010, и другими программными продуктами. Статистическую значимость различий оценивали с вероятностью p < 0,05, если не указано иначе.

Результаты. На 1-м этапе (15 месяц пандемии) популяционный иммунитет был обусловлен преимущественно только Nc+RBD+ Abs. Ко 2-му этапу, проведенному через 4 мес. их доля сократилась в 1,2 раза, но увеличились доля волонтеров, содержавших только RBD Abs в 1,7 раза. На 3-м и 4-м этапах, проведенных через 9 и 19 мес., доля лиц с RBD+Ncпо сравнению со 2-м этапом на 3,5%, доля лиц с Nc+RBD Abs увеличилась в 1,5 раза. Важнейшим фактором популяционного иммунитета стала вакцинация населения, охват которой к 4-му этапу достиг 70%. Среди вакцин чаще всего использовали векторные Спутник V и Спутник Light, реже — цельновирионную инактивированную BIBP-CorV.

Заключение. Эволюция популяционного гуморального иммунитета против SARS-CoV-2 включала совокупность изменений уровней циркулирующих Nc, RBD и Nc+RBD Abs. Сформировавшийся гибридный иммунитет способствовал снижению заболеваемости до спорадического уровня.

Корь — высококонтагиозная, вакцинопрофилактируемая антропонозная инфекция. Несмотря на политику активной вакцинации от этой инфекции населения всего мира, корь не исчезла совсем, она то затухает, то вновь появляются вспышки. Показано, что в заболевание корью вовлечены не только непривитые, что вполне понятно, но и привитые. Цель работы: исследовать особенности иммунного ответа у взрослых больных корью в условиях подъема заболеваемости в процессе элиминации этой инфекции. Исследованы 1158 сывороток крови от больных корью в возрасте от 18 до 70 лет, проживающих на территории Москвы и Московской области, методом ИФА (Euroimmun, Германия). Подавляющая часть заболевших приходится на возраст 18–40 лет — 72,36%. 69 сывороток, взятых в более поздние сроки (10–20 дней от высыпания), были исключены и рассмотрены отдельно. По уровню противокоревых IgG и их авидности были выделены: группа 1 с первичным типом иммунного ответа (582 сыворотки [53,44%]) — эти люди не были привиты в детстве; группа 2 (вторичный ответ) (446 сывороток [40,96%]) — эти люди были привиты в детстве, но утратили противокоревые антитела; 61 сыворотка с промежуточным уровнем параметров отнесена в группу 3. Для уточнения типа иммунного ответа группы 3 проведен дополнительный анализ спектра субклассов противокоревых антител. Показано, что в этой группе выявляется смешанный тип ответа: 31 человек отвечал с преобладанием первичного типа, а 30 человек — с преобладанием вторичного типа иммунного ответа. При этом 40 человек из 61 были вакцинированы от кори за 1–3 мес. до заболевания, то есть заболевание наложилось на становление поствакцинального иммунитета. Таким образом, выявленная нами ранее тенденция к утрате поствакцинального иммунитета среди старших школьников и молодых взрослых и вовлечение этих привитых в детстве людей в эпидемический процесс продолжает усугубляться.

Введение. Клинические данные свидетельствуют о том, что некоторые пробиотики могут быть полезны в лечении и профилактике вирусных инфекций. Однако эффективность пробиотиков при COVID-19 на сегодняшний день не установлена. Цель настоящего систематического обзора заключалась в оценке роли пробиотиков в профилактике и лечении COVID-19.

Материалы и методы.  Был проведен расширенный поиск информации по обозначенному выше вопросу в четырех электронных базах данных, включая Embase, Scopus, Web of Science и PubMed, во временном интервале с ноября 2019 г. по июнь 2022 г. После изучения списка соответствующих статей были определены дополнительные поисковые ограничения. Для поиска в базах данных использовалось несколько комбинаций ключевых слов, проверенных MESH. Отбор исследований осуществлялся в соответствии с критериями включения и исключения.

Результаты. Двадцать три статьи соответствовали критериям включения в исследование. В шести статьях была информация об исследованиях, проведенных in vitro, в остальных — об исследованиях, проведенных у людей (in vivo). Тип пробиотика был указан в восемнадцати исследованиях. В двух исследованиях в дополнение к пробиотикам использовались пищевые добавки (витамины, травы, минералы и т. д.). Самый большой размер выборки составил 445 850 участников, опрос которых проводился в мобильном приложении COVID Symptom Study. Большинство исследований показало, что пробиотики оказывают положительное влияние на течение COVID-19, что проявляется в начале ремиссии симптомов COVID-19 на ранних сроках заболевания и в более короткой продолжительности болезни (по данным 10 исследований), в более низких показателях смертности (3 исследования), а также в снижении числа госпитализаций и продолжительности пребывания в стационаре (3 исследования). Шесть исследований in vitro показали, что пробиотики были эффективны в отношении SARS-CoV-2 благодаря противовирусному действию. Только два исследования показали, что пробиотики при COVID-19 неэффективны или их применение приводят к негативным последствиям.

Выводы. Имеющиеся данные подтверждают роль пробиотиков в профилактике и лечении COVID-19. Эффективность пробиотиков при COVID-19 может быть объяснена наличием противовирусного потенциала бактериоцинов PlnE и PlnF Lactobacillus paracasei в отношении SARS-CoV-2.

Цель исследования: оценить результаты филогенетического анализа нуклеотидных последовательностей гена uge штаммов K. pneumoniae в перинатальном центре.

Материалы и методы.  Проанализировано 56 последовательностей гена uge K. pneumoniae. Ген uge детектировали методом ПЦР в режиме реального времени на амплификаторе «ДТ лайт» (Россия).

Результаты. Частота встречаемости штаммов K. pneumoniae среди пациентов отделений акушерско-гинекологического профиля составила в среднем 1,4% в 2020–2023 гг. В стационарах педиатрического профиля выделение штаммов в диапазоне 12–14% регистрируется в 2020, 2021 и 2023 гг. В 2022 г. зарегистрировано четырехкратное снижение выявления штаммов K. pneumoniae. Филогенетический анализ показал, что нуклеотидные последовательности достоверно сгруппировались в 14 кластеров. Ген фактора вирулентности K. pneumoniae uge регистрируется в 64,3%. Популяция выделенных от пациентов перинатального центра с 2019 по 2023 гг. штаммов K. pneumoniae, нуклеотидные последовательности которых проанализированы филогенетическим методом, является гетерогенной. Существуют кластеры, объединяющие геноварианты бактерий, выделенные в 2019 г., и не пополнившиеся новыми изолятами, что подтверждает эффективность проводимых противоэпидемических мероприятий, усиленных в период распространения новой коронавирусной инфекции, исключающих передачу инфекционного агента от источника восприимчивому организму во внутрибольничной среде. Определены аминокислотные замены в гене uge P249Q, N279L, отличающие гипервирулентные штаммы от тех, которые имеют меньшую степень патогенности. В четырех из пяти пар мать-ребенок нуклеотидные последовательности гена uge штаммов K. pneumoniae были генетически более близки друг другу и отличались от выделенных из биологического материала пациентов отделений, что свидетельствует о высокой степени их родства и с большой долей вероятности указывает на то, что источником штамма для ребенка явилась его мать, а не пациенты отделений или персонал учреждения. В одной паре мать–ребенок штаммы K. pneumoniae принадлежали разным кластерам. Изолят, выделенный 06.09.2021 г. из фекалий новорожденного ребенка (7 суток), группировался со штаммами, выделенными от пациентки родового отделения 12.12.2020 г. и в Лаосе в 2013 г. (CP035196). K. pneumoniae, выделенная 04.06.2021 г. из мочи женщины, достоверно группировалась со штаммами, вошедшими в 13 кластер.

Вывод. Продемонстрирована возможность совершенствования локального микробиологического мониторинга методами секвенирования и филогенетического анализа гена uge K. pneumoniae. Оценка изменения внутривидовой популяционной структуры возбудителей ИСМП необходима для своевременного и обоснованного реагирования на ухудшение эпидемиологической ситуации.

Введение. Несмотря на значительный прогресс в области интенсивной терапии, сепсис по-прежнему остается одной из основных причин неонатальной смертности. Поскольку уровень витамина D влияет на тяжесть течения инфекций, в настоящем исследовании было проведено сравнение уровня витамина D у инфицированных и неинфицированных недоношенных детей.

Материалы и методы.  Проведено поперечное исследование 87 недоношенных новорожденных (45 инфицированных и 42 неинфицированных младенца), госпитализированных в больницу Мешхед Гаем, Иран, в период с 2015 по 2017 г. Отбор пациентов осуществлялся методом случайной выборки. В группу инфицированных (n = 45) были включены младенцы с клиническими и лабораторными данными, соответствующими инфекции, и/или положительными высевами крови или спинномозговой жидкости. Уровни витамина D в сыворотке крови определяли у всех младенцев. Была использована разработанная нами анкета, содержащая демографические, клинические и лабораторные данные младенцев. Cтатистическая обработка данных проводилась в программе SPSS и включала оценку независимого t-критерия и критерия хи-квадрат.

Результаты. У 83% младенцев был выявлен дефицит витамина D, при этом у 34,5, 26,4 и 21,8% установлена тяжелая (менее 10 нг/мл), умеренная (10,1–20 нг/мл) и легкая степень дефицита (20,1–30 нг/мл) соответственно. Средний уровень содержания витамина D у младенцев составил 23,31±9,40 нг/мл в контрольной группе и 11,02±8,64 нг/мл в основной (p = 0,000). При раннем и позднем сепсисе в основной группе средний уровень витамина D составил 8,14±5,53 и 12,62±9,75 нг/мл (p = 0,121) соответственно. У 95% инфицированных и 71% неинфицированных младенцев уровень витамина D был менее 30 нг/мл (p = 0,003).

Выводы. Дефицит витамина D встречается у недоношенных детей довольно часто. Уровень витамина D в сыворотке крови у недоношенных новорожденных с сепсисом был ниже, чем у неинфицированных. Следовательно, коррекция дефицита витамина D может препятствовать развитию тяжелых форм неонатальной инфекции.

Заболеваемость раком шейки матки (РШМ) в России по-прежнему остается на высоком уровне и занимает четвертое место среди всех онкологических заболеваний. РШМ предшествует цервикальная интраэпителиальная неоплазия легкой, умеренной и тяжелой степени. Известно, что вирус папилломы человека (ВПЧ) служит основной причиной развития данной патологии и ответственен за 99% случаев развития рака. Несмотря на инфицирование ВПЧ онкологический процесс возникает только при наличии определенных условий. Существуют факторы риска, опосредованно влияющие на течение и возникновении дисплазии шейки матки. В последние годы активно обсуждается роль цервико-вагинального микробиома в возникновении и прогрессировании данной патологии. Многие исследования свидетельствуют о том, что дисбиоз, при наличии цервикальной интраэпителиальной дисплазии связан с повышенной вирусной нагрузкой ВПЧ, также уточняется роль конкретных микроорганизмов. Несмотря на быстро накапливающиеся знания о характере вагинального микробиома, при наличии предраковых процессов шейки матки, уровень его влияния на течение заболевания до конца не изучен и представляет большой интерес. Выявление микроорганизмов влияющих на возникновение и прогрессирование данной патологии позволит профилактировать и избирательно подходить к лечению дисбиоза. Целью нашего исследования было выявить связь между тканевым и просветным культуромом шейки матки и цервикальной интраэпителиальной неоплазией тяжелой степени. В исследовании оценивалась микробиота биоптата шейки матки и слизистой оболочки цервикального канала у пациентов с цервикальными интраэпителиальными изменениями. Согласно результатам исследования представители рода Streptococcus достоверно чаще встречались в биоптате шейки матки у пациенток с дисплазией тяжелой степени по сравнению с женщинами без интраэпителиальных изменений шейки матки, тогда как в посеве из цервикального канала эти результаты были сопоставимы, а бактерии из рода Corynebacterium обнаруживалась в биоптате шейки матки в 3 раза чаще, чем в мазке со слизистой оболочки цервикального канала. Микробиота биоптата шейки матки и цервикального канала качественно и количественно отличаются, в частности встречаемость представителей Streptococcus spp. отмечается чаще у пациентов с наличием дисплазии шейки матки, а Corynebacterium spp. — в биоптате шейки матки по сравнению с мазком из цервикального канала. Таким образом большое влияние на результат имеет способ сбора материала.

Статья подготовлена к 100-летнему юбилею кафедры микробиологии Военно-медицинской академии и 100-летию со дня присвоения имени Пастера Санкт-Петербургскому научно-исследовательскому институту эпидемиологии и микробиологии. В статье описан период становления микробиологических школ Казани и Санкт-Петербурга в конце XIX – начале XX в., развития в 20–30-е гг. и во время Великой Отечественной войны. Статья посвящена истории взаимодействия и сотрудничества между двумя школами, что послужило импульсом для их дальнейшего формирования. В ней представлены исторические вехи развития кафедр микробиологии Казанского государственного медицинского университета, Военно-медицинской академии, научных подразделений Казанского научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологии и Санкт-Петербургского научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологии, освещены аспекты формирования новых научных направлений, даны краткие биографические данные сотрудников кафедры микробиологии, деятельность которых была связана с работой в данных учреждениях. Представлены биографические сведения, личностные характеристики, основные направления научно-практической деятельности известных ученых микробиологов, работавших в разные периоды своей жизни в Петербурге (Ленинграде) и Казани (В.М. Аристовский, Р.Р. Гельтцер, П.Н. Кашкин, И.И. Пряхин, А.Р. Конова, А.Г. Григорьева-Беренштейн). Подробно освещены вопросы вклада совместных исследований ленинградских и казанских ученых в разработку и совершенствование методов промышленного производства антибиотиков, лечебно-профилактических сывороток, бактериофагов в период Великой Отечественной войны. Статья подготовлена с использованием первоисточников: публикаций, воспоминаний сотрудников кафедры микробиологии КГМУ, ВМА, КНИИЭМ, СПб НИИЭМ имени Пастера, документов из архивов отделов кадров, а также Национального архива Республики Татарстан, архивных материалов кафедр микробиологии КГМУ и ВМА. Описаны основные научные достижения представителей казанской и санкт-петербургской школы микробиологов, их научный вклад в развитие микробиологии. В заключении отмечается необходимость сохранения исторической памяти о вкладе российских ученых в развитие микробиологии.

Организация Северо-Западного окружного Центра по профилактике и борьбе со СПИД (СЗО Центр СПИД) берет свое начало на истоках зарождения эпидемии ВИЧ в Российской Федерации. За период 35-летней работы сотрудниками СЗО Центра СПИД был внесен неоценимый вклад в развитие диагностики ВИЧ-инфекции, внедрении новых клинических и профилактических технологий, консультирования пациентов и подготовки квалифицированных кадров. В юбилейной статье освещены основные этапы становления СЗО Центра СПИД как структурной единицы Санкт-Петербургского научно-исследовательского института имени Пастера. Рассмотрены разносторонние функции и задачи организации, носящие мультидисциплинарный характер, ее основные достижения всероссийского и мирового масштаба. Особое внимание уделено многолетнему международному сотрудничеству, результатам реализации различных программ и проектов при поддержке Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) и Объединенной программы Организации Объединенных Наций по ВИЧ/СПИД. СЗО Центр СПИД продолжает взаимодействие с основными научными организациями Санкт-Петербурга: Первым Санкт-Петербургский государственным медицинским университетом имени И.П. Павлова, Институтом экспериментальной медицины, Институтом мозга человека имени Н.П. Бехтеревой РАН и др. Проводимые совместные исследования неизменно вносят вклад в изучение эпидемиологии и клиники различных вирусных инфекций и коморбидных состояний. Полученные знания регулярно обобщаются в виде монографий, журнальных статей и демонстрируются на конференциях различного уровня. В настоящее время СЗО Центра СПИД представлен несколькими структурными подразделениями, в которой продолжается практическая и научная деятельности по изучению ВИЧ и вирусных гепатитов.