ПОИСК ОПТИМАЛЬНОЙ КОМБИНАЦИИ АНТИГЕНОВ ДЛЯ СЕРОДИАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Резюме. Методами генной инженерии получено четыре химерных рекомбинантных антигена: CBD-CFP10, CBD-ESAT6, ESAT6-CFP10 и CBD-P38, содержащих аминокислотные последовательности полноразмерных белков ESAT6 и CFP10 и зрелого белка P38 M. tuberculosis, состыкованные с аминокислотной последовательностью целлюлозосвязывающего домена эндоглюконазы А (CBD) из Cellumonas fimi. Рекомбинантные белки были очищены методом аффинной хроматографии на колонке с Ni-NTA-сефарозе 6В-CL и, наряду с PPDN-3, были использованы для определения их антигенной активности в непрямом варианте ИФА при серодиагностике ТБ. В работе исследовались сыворотки, полученные от больных туберкулезом легких (n = 321), от лиц, имеющих профессиональный контакт с больными ТБ (n = 42), от здоровых доноров (n = 366) и от больных заболеваниями легких нетуберкулезной этиологии (n = 68). Было выявлено наличие достоверной положительной корреляции между уровнями антител против всех исследованных антигенов, сравниваемых попарно. Показано, что антигены существенно отличаются по своим антигенным и иммунобиологическим свойствам, но дополняют друг друга в составе антигенных диагностических композиций и могут найти применение в тест-системах для серодиагностики ТБ. Использование данных антигенов позволит выявлять лиц, инфицированных ТБ, а также выявлять больных с активным ТБ. 

Об авторах

Е. В. Васильева

ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург

Автор, ответственный за переписку.
Email: ev_vasilyeva@pasteurorg.ru

младший научный сотрудник лаборатории биопрепаратов

197101, Россия, Санкт-Петербург, ул. Мира, 14

 

Россия

В. Н. Вербов

ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт–Петербург

Email: ev_vasilyeva@pasteurorg.ru
к.х.н., зав. лабораторией биопрепаратов Россия

А. Б. Беклемишев

ФГБУ НИИ биохимии СО РАМН, г. Новосибирск

Email: ev_vasilyeva@pasteurorg.ru
д.б.н., зав. лабораторией генной инженерии Россия

А. Л. Мамаев

ФГБУ НИИ биохимии СО РАМН, г. Новосибирск

Email: ev_vasilyeva@pasteurorg.ru
младший научный сотрудник Россия

А. О. Цырульников

ФГБУ НИИ биохимии СО РАМН, г. Новосибирск

Email: ev_vasilyeva@pasteurorg.ru
младший научный сотрудник Россия

Т. А. Степаненко

СПб ГБУЗ Городская многопрофильная больница No 2, Санкт-Петербург

Email: ev_vasilyeva@pasteurorg.ru
зав. отделением пульмонологии № 2 Россия

В. Б. Ивановский

СПб ГБУЗ Городской Противотуберкулезный диспансер, Санкт-Петербург

Email: ev_vasilyeva@pasteurorg.ru
к.м.н., заместитель главного врача по лечебной работе Россия

С. В. Лапин

Санкт-Петербургский Государственный медицинский университет имени академика Павлова, Санкт-Петербург

Email: ev_vasilyeva@pasteurorg.ru
к.м.н., зав. лабораторией НМЦ по молекулярной медицине Россия

Арег А. Тотолян

ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург, Россия 2 ФГБУ НИИ биохимии СО РАМН, г. Новосибирск

Email: ev_vasilyeva@pasteurorg.ru
член-корреспондент РАМН, д.м.н., профессор, заместитель директора по научной работе Россия

Список литературы

  1. Васильева Е.В., Вербов В.Н., Тотолян Арег А., Беклемишев А.Б., Мамаев А.Л., Цырульников А.О. Возможность использования различных антигенов M. tuberculosis в серодиагностике туберкулеза легких // Медицинский академический журнал. — 2012. — № 4 (12). — С. 24–26. Vasil`eva E.V., Verbov V.N., Totolyan Areg A., Beklemishev A.B., Mamaev A.L., Tsirul`nikov A.O. Vozmozhnost` ispol`zovaniya razlichnykh antigenov M. tuberculosis v serodiagnostike tuberkuleza legkikh [Possibilities of using of different M. tuberculosis antigens in serological diagnosis of lung tuberculosis]. Meditsinskiy akademicheskiy zhurnal — Medical Academic Journal, 2012, vol. 12, no. 4, pp. 24–26.
  2. Деркачева С.А., Ткаченко В.И., Беклемишев А.Б. Получение рекомбинантного антигена р38 M. tuberculosis и оценка возможности его применения в серодиагностике туберкулеза // Бюллетень СО РАМН. — 2007. — № 5 (127). — С. 62–68. Derkachiova S.A., Tkachenko V.I., Beklemishev A.B. Poluchenie rekombinantnogo antigena r38 M. tuberculosis i otsenka vozmozhnosti ego primeneniya v serodiagnostike tuberkulioza [Obtaining of recombinant antigen of M. tuberculosis and evaluation of possibilities its using in serological diagnostics of tuberculosis]. Byulleten` SO RAMN — Bulletin of the Siberian Branch of the Russian Academy of Medical Sciences, 2007, vol. 127, no. 5, pp. 62–68.
  3. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование // М., 1984. — 480 с. Maniatis T., Frich E., Sembruk Dzh. Metody geneticheskoy inzhenerii. Molekulyarnoe klonirovanie [Methods of gene engineering. Molecular cloning]. Moscow, 1984. 480 p.
  4. Салина Т.Ю., Морозова Т.И. Иммунологические методы в дифференциальной диагностике // Туберкулез и болезни легких. — 2011. — № 11. — C. 50–53. Salina T.Yu., Morozova T.I. Immunologicheskie metody v differentsial`noy diagnostike [Immunological methods in differential diagnostics]. Tuberkulez i bolezni legkikh — Tuberculosis and Lung Diseases, 2011, no. 11, pp. 50–53.
  5. Туберкулез в Российской Федерации, 2010 г. Аналитический обзор статистических показателей, используемых в Российской Федерации. — М., 2011. — 280 с. Tuberkulez v Rossiyskoy Federatsii, 2010 g. Analiticheskiy obzor statisticheskikh pokazateley, ispol`zuemykh v Rossiyskoy Federatsii [Tuberculosis in the Russian Federation, 2010. Analytical review of statistical indices, used in the Russian Federation]. Moscow, 2011. 280 p.
  6. Chegou N.N., Hoek K.G., Kriel M., Warren R.M., Victor T.C., Walzl G. Tuberculosis assays: past, present and future. Expert Rev. Anti Infect. Ther., 2011, vol. 9, no. 4, pp. 457–469.
  7. Cole S.T., Brosch R., Parkhill J. Deciphering the biology of Mycobacterium Tuberculosis from the complete genome sequence. Nature, 1998, vol. 393, no. 6685, pp. 537–544.
  8. Davidow A., Kanaujia G.V., Shi L., Kaviar J., Guo X., Sung N., Kaplan G., Menzies D., Gennaro M.L. Antibody profiles characteristic of Mycobacterium tuberculosis infection state. Infect. Immun., 2005, vol. 73, no. 10, pp. 6846–6851.
  9. Ireton G.C., Greenwald R., Liang H., Esfandiari J., Lyashchenko K.P., Reed S.G. Identification of Mycobacterium tuberculosis antigens of high serodiagnostic value. Clin. Vaccine Immunol., 2010, vol. 17, no. 10, pp. 1539–1547.
  10. Hatfield G. W., Roth D.A. Optimizing scaleup yield for protein production: Computationally Optimized DNA Assembly [CODA] and Translation Engineering. Biotechnology Annual Review, 2007, vol. 13, pp. 27–42.
  11. He X.Y., Li J., Hao J., Chen H.B., Zhao Y.Z., Huang X.Y., He K., Xiao L., Ye L.P., Qu Y.M., Ge L.H. Assessment of five antigens from Mycobacterium tuberculosis for serodiagnosis of tuberculosis. Clin. Vaccine Immunol., 2011, vol. 18, no. 4, pp. 565–570.
  12. Manca C., Lyashchenko K., Wiker H.G., Usai D., Colangeli R., Gennaro M.L. Molecular cloning, purification, and serological characterization of MPT63, a novel antigen secreted by Mycobacterium tuberculosis. Infect. Immun., 1997, vol. 65, no. 1, pp. 16–23.
  13. Min F., Zhang Y., Huang R., Li W., Wu Y., Pan J., Zhao W., Liu X. Serum antibody responses to 10 Mycobacterium tuberculosis proteins, purified protein derivative, and old tuberculin in natural and experimental tuberculosis in rhesus monkeys. Clin. Vaccine Immunol., 2011, vol. 18, no. 12, pp. 2154–2160.
  14. Pinto L.M., Grenier J., Schumacher S.G., Denkinger C.M., Steingart K.R., Pai M. Immunodiagnosis of tuberculosis: state of the art. Med. Princ. Pract., 2012, vol. 21, no. 1, pp. 4–13.
  15. Randall L.L., Hardy S. J. S. Correlation of competence for export with lack of tertiary structure of the mature species: a study in vivo of maltose-binding protein in E. coli. Cell, 1986, vol. 46, pp. 921–928.
  16. Singh S., Singh J., Kumar S., Gopinath K., Balooni V., Singh N., Mani K. Poor performance of serological tests in the diagnosis of pulmonary tuberculosis: evidence from a contact tracing field study. PLoS One, 2012, vol. 7, no. 7. Available at: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3393741, free access (accessed: 14.03.13).
  17. Steingart K.R., Dendukuri N., Henry M., Schiller I., Nahid P., Hopewell P.C., Ramsay A., Pai M., Laal S. Performance of purified antigens for serodiagnosis of pulmonary tuberculosis: a meta-analysis. Clin. Vaccine Immunol., 2009, vol. 16, no. 2, pp. 260–276.
  18. Steingart K.R., Flores L.L., Dendukuri N., Schiller I., Laal S., Ramsay A., Hopewell P.C., Pai M. Commercial serological tests for the diagnosis of active pulmonary and extrapulmonary tuberculosis: an updated systematic review and meta-analysis. PLoS Med., 2011, vol. 8, no. 8. Available at: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3153457, free access (accessed: 14.03.13).
  19. Wallis R.S., Pai M., Menzies D., Doherty T.M., Walzl G., Perkins M.D., Zumla A. Biomarkers and diagnostics for tuberculosis: progress, needs, and translation into practice. Lancet, 2010, vol. 375, iss. 9729, pp. 1920–1937.
  20. Walzl G., Ronacher K., Hanekom W., Scriba T.J., Zumla A. Immunological biomarkers of tuberculosis. Nat. Rev. Immunol., 2011, vol. 11, no. 5, pp. 343–354.
  21. Weldingh K., Rosenkrands I., Okkels L.M., Doherty T.M., Andersen P. Assessing the serodiagnostic potential of 35 Mycobacterium tuberculosis proteins and identification of four novel serological antigens. J. Clin. Microbiol., 2005, vol. 43, no. 1, pp. 57–65.
  22. Wu X., Yang Y., Zhang J., Li B., Liang Y., Zhang C., Dong M. Comparision of antibody responses to seventeen antigens from Mycobacterium tuberculosis. Clinica Сhim. Acta., 2010, vol. 411, iss. 19–20, pp. 1520–1528.
  23. Wu X.,Yang Y., Zhang J., Li B., Liang Y., Zhang C., Dong M., Cheng H., He J. Humoral immune responses against the Mycobacterium tuberculosis 38-kilodalton, MTB48, and CFP-10/ESAT-6 antigens in tuberculosis. Clin. Vaccine Immunol., 2010, vol. 17, no. 3, pp. 372–375.
  24. Xu J.N., Chen J.P., Chen D.L.Serodiagnosis efficacy and immunogenicity of the fusion protein of Mycobacterium tuberculosis composed of the 10-kilodalton culture filtrate protein, ESAT-6, and the extracellular domain fragment of PPE68. Clin. Vaccine Immunol., 2012, vol. 19, no. 4, pp. 536–544.
  25. Zhu C., Liu J., Ling Y., Yang H., Liu Z., Zheng R., Qin L., Hu Z. Evaluation of the clinical value of ELISA based on MPT64 antibody aptamer for serological diagnosis of pulmonary tuberculosis. BMC Infect. Dis., 2012, vol. 12: 96. Available at: http://www.biomedcentral.com/1471–2334/12/96, free access (accessed: 14.03.13).

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Васильева Е.В., Вербов В.Н., Беклемишев А.Б., Мамаев А.Л., Цырульников А.О., Степаненко Т.А., Ивановский В.Б., Лапин С.В., Тотолян А.А., 2014

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС 77 - 64788 от 02.02.2016.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах