Comparative characteristics of nasal mucosa microflora in various forms of chronic rhinitis

Full Text

Введение

В течение последних десяти лет отмечен рост заболеваемости хроническим ринитом (ХР), обусловленный ухудшающимися экологическими условиями, увеличением респираторных аллергенов и вирусных заболеваний, прогрессирующим снижением местного и общего иммунитета, поздней обращаемостью за медицинской помощью [2]. При всех формах ХР происходит снижение защитных свойств слизистой оболочки полости носа, что может сопровождаться присоединением бактериальной инфекции. Дисбиоз слизистой оболочки способствует развитию вторичных иммунных расстройств и дезадаптации, которая при дисбактериозе содействует развитию патологических процессов. Имеются данные, что разные фенотипические варианты ХР [вазомоторный (ХВР), аллергический (ХАлР), атрофический (ХАР) и инфекционный (ХИР)] характеризуются своим спектром микроорганизмов в носовой полости, который существенно влияет на течение заболевания. Учитывая, что ХР первично имеют сходную симптоматику, выявление индивидуального набора возбудителей позволит осуществить и оптимизировать своевременное, персонифицированное лечение и профилактику данных состояний [4, 5]. Все это свидетельствует об актуальности изучения микрофлоры слизистой оболочки носа при различных фенотипических вариантах ХР.

Целью нашей работы явилось сравнительное изучение видового и количественного состава микробной флоры и частоты ее встречаемости у пациентов с различными формами ХР.

Материалы и методы

В работе приведены результаты лабораторного обследования больных с ХР общей численностью 79 человек (42 мужчин и 37 женщин) в возрасте от 18 до 70 лет (средний возраст составил 43,5±0,9 лет), из них 20 пациентов с ХАлР (12 мужчин и 8 женщин) в возрасте от 21 до 67 лет (средний возраст составил 45,1±1,9 лет),20 пациентов с ХВР (11 мужчин и 9 женщин) в возрасте от 24 до 55 лет (средний возраст составил 35,1±1,9 лет),18 больных ХАР (7 мужчин и 11 женщин) в возрасте от 33 до 70 лет (средний возраст составил 50,3±2,9 лет),21 пациент с ХИР (12 мужчин и 9 женщин) в возрасте от 20 до 67 лет (средний возраст составил 45,1±1,9 лет). Контрольной группой служили 40 практически здоровых доноров, не имеющих оториноларингологических жалоб и ринологического анамнеза, у которых отсутствовали изменения слизистой оболочки полости носа по результатам риноэндоскопии (23 мужчины и 17 женщин) в возрасте от 18 до 65 лет (средний возраст 43,8±1,3 лет). Исследуемые группы были сопоставимы по полу (р = 0,5) и возрасту (р = 0,6). Критериями включения в группы пациентов и контрольную группу были: возраст от 18 до 70 лет, информированное согласие на участие в исследовании. Критериями включения в основные группы являлись подтвержденные диагнозы: ХАлР, ХВР, ХАР, ХИР. Диагноз ХР верифицировался по клиническим данным, данным анамнеза и риноэндоскопии с использованием общепринятой классификации на основании клинических рекомендаций Министерства здравоохранения РФ. Диагностика ХР осуществлялась врачом-оториноларингологом при обращении пациента за лечением, с учетом полного комплекса инструментального обследования. Критериями исключения из вышеупомянутых групп явились: наличие тяжелых соматических заболеваний, в том числе — ВИЧ-инфекции, туберкулеза, наркотическая зависимость. Также в исследование не включались пациенты, отказавшиеся принять участие в данном научном исследовании. Исследование одобрено ЛЭК ФИЦ КНЦ СО РАН (протокол № 11 от 01.11.2020). Все этические принципы, предъявляемые ст. 24 Конституции РФ и Хельсинкской декларацией Всемирной медицинской ассоциации, в исследовании соблюдались.

Всем пациентам было проведено бактериологическое исследование слизистой оболочки полости носа. Взятие материала для этого исследования производилось при передней риноскопии со слизистой средней носовой раковины полости носа стерильным микробиологическим тампоном. Микробиологический тампон помещали в стерильную транспортную среду Эймса (Италия) с активированным углем и в течение 2 ч доставляли в лабораторию. Посев с тампона на поверхность твердых питательных сред осуществлялся стандартным полуколичественным методом. Выделение микроорганизмов проводили на питательных средах: 5% кровяном агаре, стафилококк-агаре, агаре Эндо и Сабуро. Культивирование для стрептококка и гемофильной палочки проводилось при повышенной влажности среды в атмосфере, содержащей 5–10% СО₂. Посев проводили секторным методом. Засеянные среды инкубировали в термостате при температуре 37°С в течение 24 ч. При необходимости выросшие колонии пересевали на скошенный мясопептонный агар для получения чистых культур и изучения признаков, используемых при идентификации. О чистоте культуры судили с помощью визуального и микроскопического контроля. Идентификацию выделенных культур проводили с использованием наиболее рационального в каждом случае набора методов (классические тесты, хромогенные среды, иммуносерологические методы, масс-спектрометрия MaldiToff). Рост микробов в 10² КОЕ/мл считали как скудный рост; в 10³ КОЕ/мл — умеренный рост; в 10⁵ и выше КОЕ/мл — массивный рост [8].

В соответствии с дизайном исследования первичное взятие материала проводилось до начала терапии. На первом этапе было проведено исследование микробиома слизистой оболочки полости носа; на втором этапе был изучен родовой и видовой состав полученных бактерий и грибов, проведена сравнительная характеристика микробного пейзажа слизистой оболочки носа у пациентов с ХР в зависимости от его этиологии; на третьем этапе проведена количественная оценка выделенных представителей микрофлоры.

Проводился статистический анализ полученных результатов с использованием пакета прикладных программ Statistica for Windows 8.0 (StatSoft Inc., США,2008) и Microsoft Excel (Microsoft, США,2007). Для оценки различий в группах использовались непараметрические критерии Краскела–Уоллиса (для трех и более групп сравнения), Манна–Уитни и Уилкоксона (для попарного сравнения). Критический уровень статистической значимости при проверки научных гипотез считался равным р < 0,05. Данные представлены в виде медианы (Me) и интерквартильного размаха (Q₂₅–Q₇₅) [10, 11, 12].

Результаты

Всего было произведено 119 бактериологических исследований состояния слизистой оболочки полости носа, из них 20 (16,8%) посевов выполнено пациентам с ХАлР,20 (16,8%) посевов — пациентам с ХВР,18 (15,1%) — пациентам с ХАР,21 (17,7%) — пациентам с ХИР и 40 (33,6%) посевов пациентам из группы контроля, не имеющих патологии носа, оториноларингологических жалоб и ринологического анамнеза.

 

Таблица 1. Наличие микроорганизмов на слизистой оболочке полости носа у больных различными вариантами ХР

Table 1. Microbial composition on the mucous membrane of the nasal cavity in patients with various types of chronic rhinitis

Наличие микроорганизмов Presence of microorganisms	Контрольная группа Control group n = 40 (1)		Больные ХАлР Patients with CAlR n = 20 (2)		Больные ХВР Patients with CVR n = 20 (3)		Больные ХАР Patients with CAR n = 18 (4)		Больные ХИР Patients with CIR n = 21 (5)		Уровень значимости отличий, р p value
	абс. abs.	%	абс. abs.	%	абс. abs.	%	абс. abs.	%	абс. abs.	%
Выявлена бактериальная или/и грибковая микрофлора Identified bacterial or/and fungal microflora	32	80	17	85	15	75	14	78	21	100	p = 0,083
Не выявлены бактериальные и грибковые агенты No bacterial and fungal agents detected	8	20	3	15	5	25	4	22	0	0

Примечание. ХАлР — хронический аллергический ринит; ХВР — хронический вазомоторный ринит; ХАР — хронический атрофический ринит; ХИР — хронический инфекционный ринит. Частота встречаемости (в %) рассчитана для каждой в отдельности группы пациентов.

Note. CAlR — chronic allergic rhinitis; CVR — chronic vasomotor rhinitis; CAR — chronic atrophic rhinitis; CIR — chronic infectious rhinitis. The frequency of occurrence (in %) was calculated for each individual group of patients.

 

В ходе исследования (табл. 1) было выявлено наличие микрофлоры на слизистых полости носа у 67 (84,8%) исследуемых пациентов с ХР и у 32 (80%) добровольцев из группы контроля. Рост микрофлоры у 100% исследуемых выявлен в группе пациентов с ХИР. Рост микрофлоры отсутствовал у 20 (15,2%) обследованных из групп с ХР.

 

Таблица 2. Морфологические виды выделенных микроорганизмов со слизистой оболочки полости носа у больных различными вариантами ХР

Table 2. Morphological types of microorganisms isolated from the nasal cavity mucous membrane in patients with various types of chronic rhinitis

Морфология выделенного микроорганизма Morphology of the isolated microorganism	Контрольная группа Control group n = 40 (1)		Больные ХАлР Patients with CAlR n = 20 (2)		Больные ХВР Patients with CVR n = 20 (3)		Больные ХАР Patients with CAR n = 18 (4)		Больные ХИР Patients with CIR n = 21 (5)
	абс. abs.	%	абс. abs.	%	абс. abs.	%	абс. abs.	%	абс. abs.	%
Кокковая флора Coccal flora	31	77,5	17	85	15	75	13	72	20	95
Палочковидные бактерии Rod-shaped bacteria	7	17,5	4	20	2	10	7	39 p1 <0,001	7	33 p1 <0,001
Грибковая флора Fungal flora	0	0	0	0	0	0	0	0	6	28 p1 <0,001

Примечание. Статистически достоверные различия: p₁ — с группой контроля. ХАлР — хронический аллергический ринит; ХВР — хронический вазомоторный ринит; ХАР — хронический атрофический ринит; ХИР — хронический инфекционный ринит. Частота встречаемости (в %) рассчитана для каждой в отдельности группы пациентов.

Note. Significant differences: p₁ — vs. control group. CAlR — chronic allergic rhinitis; CVR — chronic vasomotor rhinitis; CAR — chronic atrophic rhinitis; CIR — chronic infectious rhinitis. The frequency of occurrence (in %) was calculated for each individual patient group.

 

На следующем этапе исследования была определена морфология выделенных микроорганизмов (табл. 2). Кокковая флора выделена во всех группах исследования, наибольшее процентное содержание ее установлено в группе пациентов с ХИР, наименьшее — в группе пациентов с ХАР. Палочковидные бактерии выделены также во всех группах исследования, наибольшее их процентное количество определяется у пациентов из группы с ХАР, наименьшее — у пациентов из группы с ХВР. Грибковая флора выделена только у пациентов из группы с ХИР.

На следующем этапе в ходе исследования было выделено 11 родов и 22 вида микроорганизмов (табл. 3).

 

Таблица 3. Род выделенных микроорганизмов со слизистой оболочки полости носа у больных различными вариантами ХР

Table 3. The genus of microorganisms isolated from the nasal cavity mucous membrane in patients with various types of chronic rhinitis

Род и вид выделенного микроорганизма The genus and species of the isolated microorganism	Контрольная группа Control group n = 40 (1)		Больные ХАлР Patients with CAlR n = 20 (2)		Больные ХВР Patients with CVR n = 20 (3)		Больные ХАР Patients with CAR n = 18 (4)		Больные ХИР Patients with CIR n = 21 (5)
	абс. abs.	%	абс. abs.	%	абс. abs.	%	абс. abs.	%	абс. abs.	%
Кокковая флора/Coccal flora
Staphylococcus sp.	25	63	15	75	6	30	9	50	12	58
Staphylococcus aureus	10	25	3	15	0	0	1	6	9	43
Staphylococcus epidermidis	16	40	13	65	6	30	5	28	0	0
Staphylococcus haemolyticus	1	3	0	0	0	0	2	11	2	10
Staphylococcus saprophyticus	1	3	0	0	0	0	2	11	2	10
Streptococcus sp.	18	45	12	60	8	40	6	33	13	62
Streptococcus viridans	18	45	12	60	8	40	3	17	0	0
Streptococcus pyogenes	0	0	0	0	0	0	3	17	13	62
Neisseriae sp.	17	43	9	45	5	25	3	17	5	24
Neisseria flava	10	25	5	25	3	15	2	11	0	0
Neisseria mucosa	9	23	4	20	2	10	1	6	0	0
Neisseria meningitidis	0	0	0	0	0	0	0	0	5	24
Acinetobacter sp.	1	3	0	0	0	0	4	22	6	29
Acinetobacter pittii	0	0	0	0	0	0	1	6	2	10
Acinetobacter baumannii	1	3	0	0	0	0	2	11	2	10
Acinetobacter lwoffii	0	0	0	0	0	0	2	11	2	10
Палочковидные бактерии/Rod-shaped bacteria
Klebsiella spp.	5	13	0	0	2	10	7	39	0	0
Klebsiella pneumoniae	2	5	0	0	0	0	7	39	0	0
Klebsiella oxytoca	3	8	0	0	2	10	5	28	0	0
Escherichia spp.	0	0	0	0	0	0	0	0	3	14
Escherichia coli	0	0	0	0	0	0	0	0	3	14
Enterobacter spp.	0	0	3	15	0	0	0	0	1	5
Enterobacter cloacae	0	0	1	5	0	0	0	0	0	0
Enterobacter sakazakii	0	0	2	10	0	0	0	0	1	5
Corynebacterium spp.	0	0	2	10	0	0	0	0	1	5
Сorynebacterium ulcerans	0	0	1	5	0	0	0	0	1	5
Corynebacterium striatum	0	0	1	5	0	0	0	0	0	0
Pseudomonas spp.	0	0	0	0	0	0	0	0	1	5
Pseudomonas aeruginosa	0	0	0	0	0	0	0	0	1	5
Proteus spp.	2	5	0	0	0	0	0	0	1	5
Proteus mirabilis	2	5	0	0	0	0	0	0	1	5
Грибковая флора/Fungal flora
Candida spp.	0	0	0	0	0	0	0	0	6	29
Прочая грибковая флора Other fungal flora	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0

Примечание. ХАлР — хронический аллергический ринит; ХВР — хронический вазомоторный ринит; ХАР — хронический атрофический ринит; ХИР — хронический инфекционный ринит. Частота встречаемости (в %) рассчитана для каждой в отдельности группы пациентов.

Note. CAlR — chronic allergic rhinitis; CVR — chronic vasomotor rhinitis; CAR — chronic atrophic rhinitis; CIR — chronic infectious rhinitis. The frequency of occurrence (in %) was calculated for each individual patient group.

 

Во всех исследуемых группах выделены представители рода Staphylococcus, вид Staphylococcus aureus чаще встречается в группе с ХИР, не выявлялся у пациентов с ХВР; вид Staphylococcus epidermidis чаще встречается в группе с ХАлР, не выявлялся у пациентов с ХИР; Staphylococcus haemolyticus чаще встречается в группе с ХАР, не выявлялся у пациентов с ХАлР и ХВР; Staphylococcus saprophyticus чаще встречается в группе с ХАР, не выявлялся у пациентов с ХАлР и ХВР.

Во всех исследуемых группах выделены представители рода Streptococcus: вид Streptococcus viridans чаще встречается в группе с ХАлР, не выявлялся у пациентов с ХИР; вид Streptococcus pyogenes чаще встречается в группе с ХИР, реже у пациентов с ХАР, не выявлялся у пациентов с ХАлР, ХВР и у группы контроля.

Во всех исследуемых группах выделены представители рода Neisseriae: вид Neisseria flava чаще встречается в группе контроля и у пациентов с ХАлР, не выявлялся у пациентов с ХИР; вид Neisseria mucosa чаще встречается в группе контроля, меньше у пациентов с ХАлР, не выявлялся у пациентов с ХИР; вид Neisseria meningitidis встречается только у пациентов с ХИР.

Представители рода Acinetobacter выделены у пациентов с ХИР, меньше у пациентов с ХАР, и единично высеян у пациента из группы контроля. Вид Acinetobacter pittii чаще встречается в группе с ХИР, реже у пациентов с ХАР, не выявлялся у пациентов с ХАлР, ХВР и у группы контроля; вид Acinetobacter baumannii чаще встречается в группе с ХАР, реже у пациентов с ХИР, единично высеян у пациента из группы контроля, не выявлялся у пациентов с ХАлР, ХВР; вид Acinetobacter lwoffii чаще встречается в группе с ХАР, реже у пациентов с ХИР, не выявлялся у пациентов с ХАлР, ХВР и у группы контроля.

Из палочковидных бактерий род Klebsiella выявляется чаще у пациентов с ХАР, реже у пациентов из группы контроля и наиболее редко у пациентов с ХВР, не выявляется у пациентов с ХАлР и ХИР; при этом вид Klebsiella pneumoniae чаще встречается у пациентов с ХАР, реже у пациентов из группы контроля, а у пациентов с ХВР не выявляется вовсе, а вид Klebsiella oxytoca чаще встречается у пацентов с ХАР, реже у пациентов с ХВР и из группы контроля.

Из рода Escherichia был выявлен представитель вида Escherichia coli только в группе пациентов с ХИР.

Представители рода Enterobacter выделены у пациентов с ХАлР, меньше у пациентов с ХИР, не выявлены у пациентов из группы контроля, с ХВР, ХАР; при этом вид Enterobacter cloacae выявлен только у пациентов с ХАлР, а представители вида Enterobacter sakazakii встречались чаще у пациентов с ХАлР, единично у пациента с ХИР.

Представители рода Сorynebacterium выделены у пациентов с ХАлР, единично у пациента с ХИР, не выявлены у пациентов из группы контроля, с ХВР, ХАР; при этом вид Сorynebacterium ulcerans встречался с одинаковой частотой и у пациентов с ХАлР, и у пациентов с ХИР; вид Corynebacterium striatum выявлен только у пациентов с ХАлР.

Из рода Pseudomonas был выявлен представитель вида Pseudomonas aeruginosa только в группе пациентов с ХИР.

Из рода Proteus был выявлен представитель вида Proteus mirabilis в одинаковом процентном соотношении среди пациентов с ХИР и группы контроля.

Грибковая микрофлора выделена во всех исследованных группах только у пациентов с ХИР, представлена она грибами рода Candida.

Следовательно, при всех формах ХР и в группе контроля выявляется микрофлора, но наибольший дисбиоз определяется у пациентов с ХИР, наименьший — при ХВР.

На следующем этапе исследования проведена количественная оценка выделенных представителей микрофлоры (табл. 4).

 

Таблица 4. Количество выделенных микроорганизмов со слизистой оболочки полости носа у больных различными вариантами ХР

Table 4. The number of microorganisms isolated from the nasal cavity mucous membrane in patients with various types of chronic rhinitis

Род выделенного микроорганизма The genus of the isolated microorganism	Контрольная группа Control group n = 40 (1)		Больные ХАлР Patients with CAlR n = 20 (2)		Больные ХВР Patients with CVR n = 20 (3)		Больные ХАР Patients with CAR n = 18 (4)		Больные ХИР Patients with CIR n = 21 (5)
	Me	Q25–Q75	Me	Q25–Q75	Me	Q25–Q75	Me	Q25–Q75	Me	Q25–Q75
Кокковая флора/Coccal flora
Staphylococcus spp.	100	100;1000	100	100;1000	10 0	100;1000	100	100;1000	1000	100;1000000
									p1–5 < 0,001, p2–5 < 0,001, p3–5 < 0,001, p4–5 < 0,001
Streptococcus spp.	100	100;1000	100	100;550	550	100;1000	100	100;1000	100000	1000;100000
									p1–5 < 0,001, p2–5 < 0,001, p3–5 = 0,005, p4–5 = 0,006
Neisseriae spp.	100	100;1000	100	100;1000	100	100;1000	100	100;100	1000	1000;100000
									p1–5 = 0,002, p2–5 = 0,03, p4–5 = 0,01
Acinetobacter spp.	100	100;100	0	0	0	0	100	10;100	1000	1000;10000
			p1–2 < 0,001				p2–4 < 0,001 p3–4 < 0,001		p2–5 < 0,001, p3–5 < 0,001, p4–5 = 0,01
Палочковидные бактерии/Rod-shaped bacteria
Klebsiella spp.	100	100;100	0	0	550	100;1000	10000	10000;100000	0	0
			p1–2 < 0,001		p2–3 < 0,001		p1–4 = 0,002 p2–4 < 0,001 p3–4 = 0,03		p1–5 < 0,001, p3–5 < 0,001, p4–5 < 0,001
Escherichia spp	0	0	0	0	0	0	0	0	55000	10000;100000
									p1–5 < 0,001, p2–5 < 0,001, p3–5 < 0,001, p4–5 < 0,001
Enterobacter spp.	0	0	100	100;1000	0	0	0	0	10000	10000;10000
			p1–2 < 0,001		p2–3 < 0,001		p2–4 < 0,001		p1–5 < 0,001p2–5 < 0,001, p3–5 < 0,001, p4–5 < 0,001
Corynebacterium spp.	0	0	550	100;1000	0	0	0	0	1000	1000;1000
			p1–2 < 0,001		p2–3 < 0,001		p2–4 < 0,001		p1–5 < 0,001p3–5 < 0,001, p4–5 < 0,001
Pseudomonas spp.	0	0	0	0	0	0	0	0	1000	1000;1000
									p1–5 < 0,001, p2–5 < 0,001, p3–5 < 0,001, p4–5 < 0,001
Proteus spp.	100	100;100	0	0	0	0	0	0	10000	10000;10000
			p1–2 < 0,001		p1–3 < 0,001		p1–4 < 0,001		p2–5 < 0,001, p3–5 < 0,001, p4–5 < 0,001
Грибковая флора/Fungal flora
Candida sp.	0	0	0	0	0	0	0	0	5500	1000;10000
									p1–5 < 0,001, p2–5 < 0,001, p3–5 < 0,001, p4–5 < 0,001

Примечание. Достоверные различия: p_1–2 — между группой ХАлР и контрольной группой; p_1–3 — между группой ХВР и контрольной группой; p_1–4 — между группой ХАР и контрольной группой; p_1–5 — между группой ХИР и контрольной группой; p_2–3 — между группами ХАлР и ХВР; p_2–4 — между группами ХАлР и ХАР; p_2–5 — между группами ХАлР и ХИР; p_3–4 — между группами ХВР и ХАР; p_3–5 — между группами ХВР и ХИР; p_4–5 — между группами ХАР и ХИР; ХАлР — хронический аллергический ринит; ХВР — хронический вазомоторный ринит; ХАР — хронический атрофический ринит; ХИР — хронический инфекционный ринит.

Note. Significant differences: p_1–2 — between the CAlR group and the control group; p_1–3 — between the CVR group and the control group; p_1–4 — between the CAR group and the control group; p_1–5 — between the CIR group and the control group; p_2–3 — between CAlR and CVR groups; p_2–4 — between CAlR and CAR groups; p_2–5 — between CAlR and CIR groups; p_3–4 — between the CVR and CAR groups; p_3–5 — between CVR and CIR groups; p_4–5 — between the CAR and CIR groups; CAlR — chronic allergic rhinitis; CVR — chronic vasomotor rhinitis; CAR — chronic atrophic rhinitis; CIR — chronic infectious rhinitis.

 

У больных с ХАлР по данным бактериологического исследования слизистой полости носа выявлено статистически значимое увеличение титров выделенных микроорганизмов рода Enterobacter и Сorynebacterium относительно пациентов с ХВР, ХАР и контрольной группы.

У больных с ХВР по данным бактериологического исследования слизистой полости носа выявлено статистически значимое увеличение титров выделенных микроорганизмов рода Klebsiella относительно пациентов с ХАлР, ХИР.

У больных с ХАР по данным бактериологического исследования слизистой полости носа выявлено статистически значимое увеличение титров выделенных микроорганизмов рода Acinetobacter относительно пациентов с ХАлР, ХВР; рода Klebsiella относительно пациентов с ХАлР, ХВР, ХАР и контрольной группы.

У больных с ХИР по данным бактериологического исследования слизистой полости носа выявлено статистически значимое увеличение титров выделенных микроорганизмов рода Staphylococcus, Streptococcus, Escherichia, Enterobacter, Pseudomonas и Candida относительно контрольной группы и пациентов с ХАлР, ХВР, ХАР; рода Neisseriae относительно контрольной группы и пациентов с ХАлР, ХАР; рода Acinetobacter относительно пациентов группы ХАлР, ХВР, ХАР; рода Сorynebacterium относительно пациентов с ХВР, ХАР и контрольной группы; рода Proteus относительно пациентов с ХАлР, ХВР и ХАР.

Таким образом, наибольшее количество титров микроорганизмов определяется при ХИР, наименьшее — при ХВР.

Обсуждение

У пациентов из группы контроля в большинстве случаев присутствует микрофлора (80%). Микробиоценоз полости носа — динамичное состояние, композицию которого составляют множество микроорганизмов как постоянно персистирующих на слизистых оболочках дыхательных путей, так и случайно попадающих в нос с вдыхаемым воздухом [1, 13]. У пациентов с ХИР микрофлора присутствует в 100% случаев, что объясняется этиологией данного заболевания — наличием инфекционных агентов. Наименьшее количество представителей микробиоты выявлено у пациентов с ХВР, что вероятно обусловлено активным механическим очищением слизью слизистой носовой полости и частым использованием в лечении таких больных интраназальных глюкокортикостероидов с противовоспалительным действием и сосудосуживающих спреев [6, 16].

В группе контроля выявлен рост кокковой и палочковой флоры, у больных ХИР определяются все представители микробиоты: кокки, палочки и грибы, появление последних, вероятно, обусловлено частым лечением антибактериальными лекарственными средствами. При ХАР доля палочковидных бактерий преобладает относительно всех других форм ринита и контрольной группы и связана с частым обнаружением Klebsiella spp., являющейся одним из главных этиологических факторов развития атрофии слизистой оболочки полости носа.

При оценке кокковой флоры у здоровых пациентов выявляются представители рода Staphylococcus (чаще всего Staphylococcus epidermidis), эти же микроорганизмы обнаружены при ХАл, ХВР, ХАР. Известно, что при длительных ринитах в 25–28% проб при исследовании из отделяемого полости носа и носоглотки находят Staphylococcus epidermidis [14]. Его штаммы, выделенные при различных воспалительных процессах, обладают рядом генов вирулентности, ответственных за адгезию, инвазию, распространение и персистенцию микроорганизмов, благодаря наличию адгезинов, токсинов и ферментов, позволяющих «уходить» от воздействия иммунной системы хозяина и вызывать в месте локализации инфекционный процесс [18]. При ХИР на первом месте среди представителей рода Staphylococcus выявлялся вид Staphylococcus aureus. Staphylococcus aureus является доказанным патогенным представителем микробиоты полости носа, способствующим хронизации воспаления при ринитах различного генеза [15]. Уникальная способность Staphylococcus aureus продуцировать энтеротоксины со свойствами суперантигенов, влияющих на локальную поликлональную активность лимфоцитов, позволяет этому микроорганизму занимать одно из доминирующих положений в микробиоте верхних дыхательных путей [1].

Флора из рода Streptococcus представлена Streptococcus viridans, выявлена у всех пациентов с ХР, кроме больных из группы с ХИР. При ХИР микрофлора рода Streptococcus представлена Streptococcus pyogenes, ответственным за появление гнойного отделяемого из полости носа.

В контрольной группе род Neisseriae представлен видами Neisseria flava, Neisseria mucosa, аналогичные у всех пациентов с ХР, кроме больных с ХИР, где обнаруживается патогенный Neisseria meningitidis, способный утяжелить клиническое течение ХР.

Acinetobacter в группе контроля представлен видом Acinetobacter baumannii. При ХАР и ХИР выявляются 3 представителя данного рода: Acinetobacter baumannii, Acinetobacter lwoffii и — в наименьшем количестве — Acinetobacter pittii при ХАР.

У практически здоровых добровольцев бактерии рода Klebsiella представлены видами Klebsiella pneumoniaee, Klebsiella oxytoca. При ХВР выявляется только Klebsiella oxytoca. Практически у всех пациентов с ХАР выявляются все изученные виды микроорганизмов рода Klebsiella, что указывает на важнейшую патогенетическую роль данного возбудителя в развитии дегенеративных изменений эпителиоцитов при атрофическом рините.

Микрофлора рода Enterobacter обнаруживается при ХАлР (Enterobacter cloacae, Enterobacter sakazakii) и ХИР (Enterobacter sakazakii). Увеличение представительства условно-патогенных бактерий семейства Enterobacteriacea на слизистой оболочке носа при ХР свидетельствует о дисбиотическом изменении и их несомненной роли в развитии воспалительного процесса [7]. Микрофлора рода Сorynebacterium встречается при ХАлР (Сorynebacterium ulcerans, Corynebacterium striatum) и ХИР (Сorynebacterium ulcerans).

Род Proteus, а именно вид Proteus mirabilis, встречается в одинаковом процентном соотношении у пациентов из группы контроля и у пациентов с ХИР. Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa и Candida встречаются только у пациентов с ХИР.

У пациентов с ХИР из кокковой флоры выявлено статистически значимое увеличение титров выделенных микроорганизмов рода Staphylococcus, Streptococcus, Neisseriae относительно контрольной группы. Из палочковидной флоры у пациентов с ХАлР выявлено статистически значимое увеличение титров представителей рода Enterobacter, Corynebacterium относительно контрольной группы, у пациентов с ХВР и ХАР — увеличение титра микроорганизмов рода Klebsiella относительно контрольной группы, у пациентов с ХИР статистически значимое увеличение титров высеянной микрофлоры рода Klebsiella, Escherichia, Enterobacter, Corynebacterium, Pseudomonas относительно контрольной группы. Титры рода Candida определяются только при ХИР.

По результатам нашего исследования можно сделать заключение, что при воспалении в слизистой оболочке полости носа, независимо от его этиологии, происходит изменение количественного и видового состава микрофлоры. Мы считаем, что изменение микробиоты влияет на патогенез заболевания, способствует персистированию патогенных и/или условно-патогенных микроорганизмов. Утяжеление течения патологического процесса в этом случае связывают со способностью антигенов бактерий проявлять свойства суперантигенов и индуцировать активацию Т-лимфоцитов [9].

В контрольной группе в микрофлоре слизистой оболочки полости носа выявляются микроорганизмы: Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus saprophyticus, Streptococcus viridans, Neisseria flava, Neisseria mucosa, Acinetobacter baumannii, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Proteus mirabilis, которые не вызывают патологических изменений, и это свидетельствует о высокой активности локального и системного иммунитета в данный момент у практически здоровых лиц. Интересным фактом является выявление Proteus mirabilis и Acinetobacter baumannii у здоровых добровольцев при отсутствии у них клинических проявлений инфицирования, следовательно, возможно сосуществование с условно-патогенной флорой при сохранной функции иммунной системы, что доказывает отсутствие необходимости постоянной санации микрофлоры слизистой оболочки полости носа.

При ХАлР выявляются Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus viridans, Neisseria flava, Neisseria mucosa, Enterobacter cloacae, Enterobacter sakazakii, Сorynebacterium ulcerans, Corynebacterium striatum. Вероятнее всего данные микроорганизмы продуктами своей жизнедеятельности пролонгируют воспалительную реакцию, персистируют, вызывают сенсибилизацию организма с последующими гиперреактивными иммунными реакциями.

При ХВР выявляются Staphylococcus epidermidis, Streptococcus viridans, Neisseria flava, Neisseria mucosa, Klebsiella oxytoca, но в небольшом количестве, что связано с особенностями течения данного заболевания и терапии, и отражает обратимые изменения в слизистой оболочке полости носа.

При ХАР выявляются представители Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus saprophyticus, Streptococcus viridans, Streptococcus pyogenes, Neisseria flava, Neisseria mucosa, Acinetobacter pittii, Acinetobacter baumannii, Acinetobacter lwoffii, но преобладает — род Klebsiella (Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca), представители которого ответственны за дегенеративно-дистрофические изменения в эпителиоцитах слизистой оболочки полости носа, вызывая и усиливая ее атрофию.

При ХИР выявляются представители Staphylococcus aureus, Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus saprophyticus, Streptococcus pyogenes, Neisseria meningitidis, Acinetobacter pittii, Acinetobacter baumannii, Acinetobacter lwoffii, Escherichia coli, Enterobacter sakazakii, Сorynebacterium ulcerans, Pseudomonas aeruginosa, Proteus mirabilis, Candida. Выявлено отсутствие и/или снижение количества представителей нормофлоры, чаще выявляются патогенные и условно-патогенные бактерии, имеется самый выраженный дисбиоз микрофлоры слизистой оболочки полости носа по сравнению со всеми другими ХР, которые обуславливают длительность и тяжесть клинического течения. Особенностью при ХИР является появление роста грибковой флоры, возможно это обусловлено частыми антибактериальными курсами терапии и отсутствием реабилитации с целью восстановления нормофлоры.

About the authors

Olga V. Smirnova

Federal Research Center «Krasnoyarsk Science Center» of the Siberian Branch of the Russian Academy of Sciences, Scientific Research Institute of Medical Problems of the North

Author for correspondence.
Email: ovsmirnova71@mail.ru

DSc (Medicine), Professor, Head of the Laboratory of Clinical Pathophysiology

Russian Federation, 660022, Krasnoyarsk, Partizana Zheleznyaka str.,3 G

Natalia S. Goncharova

Federal Research Center «Krasnoyarsk Science Center» of the Siberian Branch of the Russian Academy of Sciences, Scientific Research Institute of Medical Problems of the North

Email: nzelenyk@gmail.com

PhD Student, Junior Researcher, Laboratory of Clinical Pathophysiology

Russian Federation, 660022, Krasnoyarsk, Partizana Zheleznyaka str.,3 G

References

Supplementary files