A MULTIFACTORIAL IMPACT ON RESPIRATORY MORBIDITY IN PEOPLE OF REPRODUCTIVE AGE AND EFFECTIVENESS OF NATOPHERINE- AND ANDROPHERINE-CONTAINING ODORANTS REGARDING A NON-SPECIFIC RESISTANCE OF THE NASAL MUCOSA AND LOWERED MORBIDITY OF RESPIRATORY INFECTIONS

Full Text

Введение

Частая респираторная заболеваемость во взрослой популяции людей, остается значимой проблемой современной медицины. Особую актуальность это явление показало при пандемии новой короновирусной инфекции (Covid-19), которая, являясь высоко вирулентной, определила повышенную смертность в 2020-2021 годах как в России, так и в мире [1]. В 2022 году уровень респираторной инфекционной заболеваемости не снижался и был обусловлен вирусом гриппа, при котором также имела место высокая смертность от вторичных пневмоний [2, 3]. С этих позиций профилактика респираторных инфекций в эпидемические периоды является важной задачей современного здравоохранения.

В течении последних двадцати лет проведено большое количество научно-исследовательских работ, показавшие влияние половых феромонов на изменение свойств иммунной системы мелких лабораторных животных (мышей), с приобретением устойчивости к инфекционным агентам [4]. Было показано, что у самцов мышей, которым предъявляли запах самок, усиливался спонтанный синтез иммуноглобулинов, а также уменьшалась смертность от ранений в результате столкновений с соседями по клетке. Более того, показано, что предъявление запаха самок перед заражением самцов вирусом гриппа активирует неспецифическую иммунную реакцию, тем самым защищая самцов мышей от заражения верхних дыхательных путей и снижая их смертность [5].

В ранее выполненных работах показан положительный эффект половых феромонов на организм человека. В частности, показано влияние женского феромона на функциональное состояние молодых мужчин [6]. В данном исследовании показано, что длительная аппликация синтетических аналогов женских феромонов молодым мужчинам приводит к снижению частоты респираторных заболеваний, повышению уровней секреторных иммуноглобулинов, а у лиц с аллергическими заболеваниями к снижению уровней эозинофилии в периферической крови [6]. Кроме того доказано, что женские феромоны могут оказывать значительные воздействия на эмоциональное и физическое состояние пожилых мужчин, снижая концентрацию кортизола и повышая уровень тестостерона [7].

В тоже время, эффект женских и мужских феромонов на состояние мукозального иммунитета носоглотки, в частности цитокинового профиля, и неспецифическую резистентность слизистой оболочки носа не исследовано.

Исходя из выше сказанного, была поставлена цель исследования – изучить влияние факторов катамнеза и показателей, отражающих функционирование мукозального иммунитета слизистой оболочки носа, ее неспецифической резистентности, на формирование частой респираторной заболеваемости; а также оценить эффективность одорантов с натоферином (natopherine) и андроферином (andropherine) в отношении динамики этих показателей и снижения частоты респираторных инфекций у людей раннего репродуктивного периода.

Материалы и методы

Для выполнения поставленной цели было проведено пилотное проспективное исследование на 46 условно-здоровых юношах и девушках (расчет мощности выборки выполнен с помощью on-line калькулятора https://clincalc.com/stats/samplesize.aspx), обучающихся в Кемеровском государственном университете. Возрастной интервал был от 18 до 22 лет, юношей было 28 обследованных, девушек – 18.

Все юноши и девушки перед началом исследования прошли анкетирования для изучения катамнеза. Анкеты включали несколько разделов, отражающих социальное поведение испытуемых, в том числе особенности питания, их медицинский и наследственный анамнез, наличие вредных привычек, а также вопросы, связанные с половым опытом и наличием постоянных сексуальных отношений.

У всех испытуемых перед началом эксперимента был выполнен забор назофарингеального смыва по разработанной ранее методике [8], щеточная микробиопсия слизистой оболочки носа [9], а также забор слюны. Повторно эти же биологические материалы забирались в 14 день и на 30 день эксперимента.

В назофарингеальном смыве исследовались концентрации следующих цитокинов: интерлейкин 1 бэта (IL-1), фактор некроза опухоли альфа (TNF), интерлейкин 4 (IL-4), интерлейкин 6 (IL-6), интерлейкин 10 (IL-10), по описанной ранее методике [10] с использованием коммерческих наборов для проведения иммуноферментного анализа ЗАО «Вектор-Бест», Россия, г. Новосибирск.

Щеточная микробиопсия позволяла оценивать воспаление на слизистой оболочки носа и состояния её функционального эпителия (рисунок 1).

Рисунок 1. Щеточная микробиопсия слизистой оболочки носа. Нормальные проявления клеточных реакций на слизистой оболочки носа. Клетки функционального эпителия (А), клетки плоского эпителия (Б).

На каждом этапе исследования была собрана слюна для определения гормонов (тестостерона и эстрадиола). Образцы слюны были центрифугированы на скорости 3000 об./мин в течение 15 мин. По 1 мл каждого образца помещались в пробирки фирмы Eppendorf и хранились при температуре –20 °C. В образцах иммуноферментным методом с помощью коммерческого набора (Стероид ИФА-эстрадиол и Стероид ИФА-тестостерон; «Хема-Медика», Москва, Россия), обладающего достаточной чувствительностью, определяли содержание тестостерона и эстадиола. Особенности исследования тестостерона и эстрадиола в слюне описаны ранее [6].

Для изучения воздействия половых феромонов противоположного пола юношам в течение месяца предъявляли natopherine, девушкам – andropherine. Natopherine является коммерциализированым синтетическим аналогом женского феромона копулина (номер свидетельства о регистрации 449477), изготовленного Европейской лабораторией и распространяемого на территории России фирмой Parfume-Prestige M (ООО «АртБьюти»). В соответствии с информацией, представляемой компаниями, данное вещество состоит преимущественно из производных изовалериановой и масляной кислоты [11]. Andropherine – синтетический аналог мужского полового феромона андростенона (номер свидетельства о регистрации 449476). Согласно этих регистрационных свидетельств данные продукты могут длительно наноситься на кожу людей.

Соответственно, в ходе исследования молодые люди наносили ежедневно на поверхность кожи над верхней губой раствор синтетического феромона и дипропиленгликоля в концентрации, рекомендованной производителем (0,12% раствор), в течении одного месяца.

Учет частоты респираторных заболеваний был выполнен за 1 год до начала эксперимента, и через 1 год после его окончания. Согласно данных клинических рекомендаций респираторную заболеваемость считали частой при повторении ОРВИ 4 и более раза в год.

Статистическая обработка данных проводилась в пакетах программ Statistica for WINDOWS» фирмы StatSoftInc. Версия 10.0 и MedCalc 17.5.3. по правилам вариационной статистики. Для поиска предикторов частой респираторной заболеваемости была использована логистическая пошаговая регрессия (статистический метод классификации с использованием линейного дискриминанта Фишера). Зависимой переменной была частота респираторных инфекций за 1 год (от 0 до 10 случае), а независимыми – все пункты анкеты (социальные, наследственные, медицинские факторы, а также концентрации цитокинов в назофарингеальном смыве, результаты щеточной микробиопсии слизистой оболочки носа). Коэффициенты, полученные для выявленных значимых предикторов и протекторов указывали на степень ассоциации с частой респираторной заболеваемостью, а знак (- или +) перед переменной указывал на положительную или отрицательную связь. Положительная связь показывала, что фактор является предиктором частой респираторной заболеваемости; а отрицательная – на его протективность. Полученная при этом анализе логистическая функция с весовыми коэффициентами для каждого предиктора, отражает взаимодействие и интегральное влияние сочетания факторов в реализации эффекта. Эффективность логистической функции оценивалась по показателю площади под кривой (AUC) из ROC-анализа ставшего, фактически, стандартом для оценки качества бинарной классификации. Поиск логистических функций выполнен как для частой респираторной заболеваемости до начала эксперимента, так и через 1 год после его завершения. Для сравнения отдельных показателей в трех точках исследования (до начала, на 14 и 30 день эксперимента) использовали U-критерий Манна — Уитни (имелось асимметричное распределение). Количественные данные были представлены в виде медианы (Ме), 25-го и 75-го процентилей (Р25 и Р75). Вероятность ошибки первого рода была принята за 5%, а второго уровня - за 20%, соответственно уровень статистической значимости выявлялся при p<0,05, что соответствует стандартным требованиям.

Результаты и обсуждения

Проведенная пошаговая логистическая регрессия для зависимого фактора, частота ОРВИ за один года, и независимых переменных катамнеза, иммунных и цитологических показателей, отражающих регуляцию мукозального иммунитета и неспецифической резистентности носа, показала ряд положительных и отрицательных ассоциаций, которые совместно определяют частую респираторную заболеваемость (таблица 1). Необходимо отметить, что полученные в классификаторе β-коэффициенты отражают относительное влияние предиктора на зависимую переменную, а B-коэффициенты показывают прогностическую значимость предиктора и могут быть использованы в уравнении, описывающим логистическую функцию. Кроме того, можно оценивать и влияние отдельных предикторов (со знаком + или в таблице просто без знака перед коэффициентом) и протекторов (со знаком -) на частоту респираторной заболеваемости у лиц раннего репродуктивного периода.

Как видно из таблицы 1, значимыми предикторами повторяющихся респираторных инфекций являлись возраст обследованных, наличие у них в катанамнезе обструктивных бронхитов, ларингитов, атопических дерматитов, курения и перенесенной новой короновирусной инфекции Covid 19. Из лабораторных показателей предикторами оказались выраженность лейкоцитарных реакций по данным назоцитограммы (щеточная микробиопсия слизистой оболочки носа), удельный вес плоского нефункционального эпителия по назоцитограмме, а также концентрации TNF и IL-4 в назофарингеальном смыве. Эти результаты вполне логичны и указывают на тот факт, что частая респираторная заболеваемость формируется на фоне аллергического эндотипа или аллергической аномалии конституции (термин используется в отечественной медицине), при которой имеют место стенозирующие ларингиты, обструктивные бронхиты, атопические дерматиты и повышение интерлейкина 4. С другой стороны эти молодые люди имеют сниженную неспецифическую резистентность слизистой оболочки носа, отраженную в высоком удельном весе у них нефункционального плоского эпителия (рисунок 2, Б). Кроме того, выраженность лейкоцитарных реакций по данным щеточной микробиопсии слизистой оболочки носа указывает на гиперреактивность мукозального клеточного иммунитета, в том числе за счет клеточного типа аллергических реакций, о чем указывает и повышенный синтез преимущественно клетками слизистой оболочки носа TNF.

 

Таблица 1

Результаты логистической регрессии с зависимым фактором частота ОРВИ за 1 год и независимыми переменными катамнеза и исследования показателей слизистой оболочки носа на момент начала наблюдения (представлены только значимые ассоциации)

Независимые переменные	β	Std. Err β	B	Std.Err B	p-level
ОТРЕЗОК			0,376	0,056	0,005
Возраст	0,154	0,002	0,210	0,003	0,010
Обструктивный бронхит, ларингит в анамнезе	0,680	0,002	3,818	0,009	0,002
Атопический дерматит в анамнезе	1,029	0,003	8,004	0,023	0,002
Удельный вес лимфоцитов в НЦГ	-0,172	0,003	-1,336	0,020	0,009
Удельный вес нейтрофилов в НЦГ	-0,660	0,004	-0,024	0,000	0,004
Концентрация IL-10 в НФС	- 0,814	0,005	- 0,969	0,005	0,004
Концентрация TNF в НФС	0,245	0,004	0,452	0,008	0,011
Удельный вес цилиндрического эпителия в НЦГ	-0,917	0,003	-0,050	0,000	0,002
Выраженность лейкоцитарных реакций в НЦГ	0,209	0,004	0,478	0,009	0,012
Концентрация IL-1 в НФС	-0,631	0,003	-0,480	0,002	0,003
Концентрация IL-4 в НФС	0,801	0,003	0,407	0,002	0,002
Выраженность эксудативных реакций в НЦГ	-0,677	0,003	-1,545	0,008	0,003
Перенесенный covid-19	0,449	0,002	1,343	0,007	0,003
Удельный вес плоского эпителия в НЦГ	0,614	0,004	0,074	0,000	0,004
Выраженность цилиндрического эпителия в НЦГ	-0,313	0,003	-0,670	0,006	0,005
Курение	0,282	0,005	0,466	0,008	0,011
Пол (женский 2 балла, мужской 1 балл)	-0,128	0,004	-0,399	0,013	0,021

Примечание: НЦГ – назоцитограмма; НФС – назофарингеальный смыв; В-коэффициенты, выделенные красным, отражают предикторные свойства переменной; В-коэффициенты черного цвета отражают протекторные свойства переменной.

 

Протекторными свойствами обладали мужской пол и большое количество цитологических и иммунологические показателей слизистой оболочки носа. Прежде всего это выраженное представительство в слизистой оболочке носа цилиндрического функционального эпителия (рисунок 1, А), а также эксудативных реакций, удельного веса лимфоцитов и нейтрофильных лейкоцитов. Это результаты также вполне объяснимы. Так,  исследованию подверглись обучающиеся университета, которые постоянно находятся  больших коллективах и имеют высокую антигенную нагрузку на слизистую оболочку носа и всего респираторного тракта. В тоже время, благодаря активному функционированию мерцательного эпителия эксудативных и клеточных реакций они имеют протекцию от повторения респираторных инфекций.

Особое значение в протекции респираторных инфекций имеют цитокины, преимущественно синтезируемыми лимфоидными и эпителиальными клетками слизистой оболочки носа и ротоглотки. Как видно из таблицы 1, это были IL-10 и IL-1. Согласно классификации функциональности цитокинов IL-10 относится в противовоспалительным интерлейкинам, а IL-1 – к провоспалительным. β-коэффициент, отражающий относительное влияние предиктора на зависимую переменную, был по модальному значению значимо выше у IL-10, чем у IL-1.  Тем самым, противовоспалительные протекторные характеристики доминировали над провоспалительными и, возможно, их регулировали.

Рисунок 2. Щеточная микробиопсия слизистой оболочки носа. Высокие клеточные реакции на слизистой оболочки носа, доминируют клетки плоского эпителия (Б). Единичный функциональный цилиндрический мерцательный эпителий (А).

Линейный регрессионный анализ позволяет оценивать сочетанное влияние всех выявленных предикторов и протекторов на зависимую переменную, в частности частоту респираторных инфекций. Это совокупное влияние описывает логистическим уравнением, где B-коэффициенты каждого значимого предиктора и протекторы используются в формуле.

В данном случае уравнение расчета комплексного влияния факторов катамнеза, цитологических и иммунологических показателей слизистой оболочки носа на формирования частой респираторной заболеваемости у лиц раннего репродуктивного возраста представлено следующей формулой:

Y = (EXP(Z)/(1 + EXP(Z))) × 100 %,

где Z = (0,38+0,21*X1+3,82*X2+8,01*X3-1,34*X4-0,02*X5+0,97*X6+0,42*X7-0,05*X8+0,48*X9-0,48*X10+0,41*X11-1,55*X12+1,34*X13+0,07*X14-0,67*X15+0,47*X16-0,41*X17),

где Y – комплексное влияние на формирования частой респираторной заболеваемости у людей раннего репродуктивного возраста (в %);

X₁ – возраст человека (в годах);

X₂ – обструктивный бронхит и ларингит в анамнезе (0-нет, 1 - есть);

X₃ – атопический дерматит в анамнезе (0-нет, 1 - есть);

X₄ – удельный вес лимфоцитов по НЦГ (%);

X₅ – удельный вес нейтрофилов по НЦГ (%);

X₆ – концентрация IL-10 по НФС (пг/мл);

X₇ – концентрация TNF-a по НФС (пг/мл);

X₈ – удельный вес цилиндрического эпителия по НЦГ (%);

X₉ – выраженность лейкоцитарных реакций по НЦГ (0, 1, 2, 3 - балла);

X₁₀ – концентрация IL-1 по НФС (пг/мл);

X₁₁ – концентрация IL-4 по НФС (пг/мл);

X₁₂ – выраженность эксудативных реакций по НЦГ (0, 1, 2, 3 - балла);

X₁₃ – КОВИД инфекция в анамнезе (0-нет, 1 - есть);

X₁₄ – удельный вес плоского эпителия по НЦГ (%);

X₁₅ – выраженность цилиндрического эпителия по НЦГ (0, 1, 2, 3 - балла);

X₁₆ – курение (0-нет, 1 - есть);

X₁₇ – пол (1 - мужской, 2 - женский).

 

Как видно из уравнения, вклад предикторов и протекторов в формирование частой респираторной заболеваемости в раннем репродуктивном периоде можно оценить с использованием сбора анамнеза, а также дополнительных исследований цитокинов в НФС и назоцитограммы.

Логарифмическим характером уравнения, говорить о том, что если коэффициент стремиться к 50% то риск сохранения частой респираторной заболеваемости равновероятен; если коэффициент стремиться к нулю то риск дальнейшего прогрессирования частых ринитов и фарингитов маловероятен; и, наоборот, при коэффициентах близких к 100% риск развития этой патологии у лиц раннего репродуктивного периода становится высоким. Оценка эффективности уравнения была выполнена в ROC-анализе (рисунок 3), который показал высокую специфичность и чувствительность.

 

Рисунок 3. ROC-анализ определения эффективности логистической функции для оценки комплексного влияние предикторов и протекторов на частоту респираторных инфекций у лиц раннего репродуктивного возраста по показателю AUC.

 

Тем самым, многофакторный анализ катамнеза, цитоморфологических и иммунных показателей слизистой оболочки носа выявил ряд предиктором и протекторов частой и длительной респираторной заболеваемости у молодых людей раннего репродуктивного периода. Предикторами явились катамнестические маркеры аллергической аномалии конституции (атопический дерматит, обструктивный бронхит и стенозирующий ларингит), факторы поведения (курение), а также иммунные показатели аллергии (IL-4) и дефицита мукоцилиарного клиренса (высокий удельный вес плоского нефункционального эпителия).

На следующем этапе исследования было проведено изучение роли одорантов натоферина (синтетический аналог женского феромона копулина) и андроферина (синтетический аналог мужского феромона адростендиона) в отношении неспецифической резистентности слизистой оболочки носа и снижения частоты респираторных инфекций.

Эти соединения имеют стерановый каркас и являются летучими метаболитами стероидных гормонов. Они могут взаимодействовать с большой группой рецепторов к стеранам, в том числе на слизистой оболочке и, через это, оказывать плейотпроное влияние на общее состояние здоровье и локальную резистентность. Соответствующие одоранты (женские юношам и мужские девушкам) наносились шариковым дезодарантом в виде одной полоски на кожу носогубной складки в течении 30 дней. За это время ни одного из обследованных не было проявлений локального дерматита и изменения пигментации кожи.  

Сравнение цитологических и иммунологических показателей со слизистой оболочки носа до начала, на 14 и на 30 день эксперимента показало значимые изменения, представленные в таблице 2.

Как видно из таблицы 2, через 30 дней эксперимента у обследованных значимо увеличился удельный вес цилиндрического функционального мерцательного эпителия, и значимо уменьшался от начала эксперимента к 14 и далее 30 дням удельный вес плоского нефункционального эпителия. Эти данные показывают увеличение клеток эпителия, участвующих в эффективном мукоцилиарном клиренсе и, тем самым, отражают увеличение неспецифической резистентности слизистой оболочки носа у лиц, применяющих одоранты на основе синтетических аналогом феромонов.

Другие значимые изменения по данным назоцитограммы касались удельного веса нейтрофилов в лейкоцитарной формуле, их количество увеличилось к 30 дню эксперимента. Первый этап исследования показал, что удельный вес нейтрофилов в назоцитограмме является протектором частой респираторной заболеваемости у молодых высоко организованных людей (большие коллективы). Тем самым, увеличение этих иммунных клеток после месячного воздействия одорантов на основе синтетических аналогов феромонов является проявлением усиления врожденного клеточного иммунитета слизистой оболочки носа.

 

Таблица 2

Сравнение показателей, отражающих резистентность слизистой оболочки носа до начала наблюдения, в течении его и после его окончания  (представлены только показатели, для которых получено хотя бы одно значимое различие с началом наблюдения)

Показатели	1. Начало эксперимента			2. 14 день эксперимента			3. Окончание эксперимента (30 день)			P1,2	P1,3
	Me	P25	P75	Me	P25	P75	Me	P25	P75
Удельный вес цилиндрического эпителия по НЦГ (%)	86,07	58,38	113,77	83,44	47,82	119,08	94,82	75,74	113,89	0,31	0,04
Удельный вес плоского эпителия по НЦГ (%)	6,52	-5,94	18,97	1,74	-1,73	5,21	1,48	-0,73	3,69	0,04	0,03
Удельный вес нейтрофилов по НЦГ (%)	21,82	-19,79	63,42	29,59	-16,88	76,07	44,37	-6,18	94,92	0,09	0,001
Концентрация IL-6 по НФС (пг/мл)	2,53	-0,89	5,95	3,17	-9,01	15,36	1,07	-1,30	4,63	0,57	0,04
Концентрация IL-10 по НФС (пг/мл)	3,199	1,943	4,456	3,592	0,620	6,564	4,029	-0,582	8,388	0,482	0,047

Примечание: НЦГ – назоцитограмма; НФС – назофарингеальный смыв; красным цветом выделены значимые различия.

 

Особо необходимо отметить изменения концентрации интерлейкинов назофарингеального смыва за один месяц эксперимента. Так, уровень IL-6 в назофарингеальном смыве через 30 дней после начала нанесения одоранта значимо снизился, а концентрация IL-10, напротив, увеличилась. Выше указывалось, что по своим доминирующим функциональным свойствам IL-6 относится к провоспалительным цитокинам, а IL-10 — к противовоспалительным. Соответственно месячное воздействие синтетических аналогов феромонов (стеранов) на слизистую оболочку носа снижает ее провоспалительный потенциал и, напротив, повышает — противовоспалительный.

В таблице 3 представлены результаты непараметрического сравнения с помощью критерия хи-квадрат результатов оценки частой респираторной заболеваемости за один год до эксперимента и через 1 год после него.

Критерием частой респираторной заболеваемости была общепринятая цифра 4 раза за один год, так если испытуемый болеет менее 4 раз в год, то он не относится к группе частоболеющих людей, а если респираторные заболевания проявляются у него четыре и более раз за один год, то он является частоболеющим человеком. Анализ по этому показателю показал, что через 1 год в исследуемой группе не было ни одного часто и длительно болеющего молодого человека (юношей и девушек).

 

 

 

 

 

 

 

 

Таблица 3

Сравнение показателей экспрессии микрофлоры и процента часто болеющих людей до начала наблюдения и после него (частая респираторная заболеваемость оценивалась через 1 год после окончания эксперимента и признана более 4 раз в год)

Параметр	До эксперимента		После эксперимента		P
	абс	%	абс	%
Часто болеющие лица (0 – болеет ОРВИ не часто, 1 – болеет ОРВИ часто)	4	14,81	0	0	0,038
Наличие кокковой флоры по НЦГ (0  - не обнаружена, 1 - обнаружена)	4	14,81	0	0	0,038
Выраженность кокковой флоры по НЦГ (0 - отсутствует, 1 – присутствует незначительно, 2 – присутствует значительно, 3 – выраженное присутствие, сплошь)	10	12,35	0	0	0,047

Примечание: НЦГ – назоцитограмма; красным цветом выделены значимые различия.

 

Другими критериями, по которому проводилась оценка с помощью критерия хи-квадрат, были наличие кокковой микрофлоры в назоцитограмме и ее выраженность (в баллах). Как видно из таблицы 3, после окончания эксперимента ни у одного изр испытуемых кокковая микрофлоры в назоцитограммах не обнаруживалась. Это указывает на значимый асептический эффект одорантов на основе синтетических аналогов феромонов человека.

Тем самым, можно говорить о том, что месячный курс нанесения на кожу носогубной складки одорантов на основе синтетических аналогов мужских и женских феромонов (стеранов) оказывает положительный эффект как на неспецифическую резистентность слизистой оболочки носа  (увеличения удельного веса мерцательного функционального эпителия и уменьшения процента плоского эпителия), так и на иммунные показатели в ее функционировании (увеличения уровня нейтрофильных лейкоцитов в назоцитограмме, концентрации в назофарингеальном смыве противовоспалительного IL-10 и, напротив, снижения концентрации провоспалительного IL-6). Кроме того, через месяц применения данных одорантов происходит полная деконтаминация слизистых оболочек носа от условно-патогенных микроорганизмов коккового фенотипа. И наконец, через год после эксперимента небольшая группа частоболеющих молодых людей полностью исчезает. Это указывает на значимый клинический эффект применяемых одорантов. Также в эксперименте не было ни одного обследованного с проявлениями дерматита и изменениями пигментации на участках аппликации одоранта.

На заключительном этапе исследования была проведена оценка с помощью пошаговой логистической регрессии вклада факторов катамнеза, а также цитологических и иммунных показателей (в трех точках эксперимента), в динамику респираторных заболеваний до начала эксперимента и через один год после его завершения (таблица 4).

 

Таблица 4

Результаты логистической регрессии с зависимым фактором частота динамика ОРВИ до наблюдения и через 1 год после него и всеми независимыми переменными катамнеза и исследования показателей слизистой оболочки носа (представлены только значимые ассоциации)

Независимые переменные	Бета	Std. Err Беты	B	Std. Err B	p-level
ОТРЕЗОК			4,049	0,175	0,000
Удельный вес цилиндрического эпителий по НЦГ на 14 день наблюдения	0,211	0,016	0,017	0,001	0,000
Атопический дерматит в анамнезе	0,591	0,016	4,608	0,129	0,000
Удельный вес эозинофилов по НЦГ на момент окончания наблюдения	-0,356	0,017	-1,387	0,066	0,000
Удельный вес цилиндрического эпителия по НЦГ на момент начала наблюдения	-0,457	0,013	-0,025	0,001	0,000
Избирательность в пище	-0,373	0,015	-0,681	0,028	0,000
Использование парфюмерии	-0,391	0,023	-1,233	0,074	0,000
Концентрация IL-1 в НФС на момент окончания наблюдения	-0,450	0,025	-0,432	0,024	0,000
Удельный вес плоского эпителия по НЦГ на момент начала наблюдения	-0,374	0,015	-0,045	0,002	0,000
Концентрация тестерона после окончания наблюдения	0,338	0,023	0,700	0,047	0,000
Концентрация IL-6 по НФС на момент начала наблюдения	-0,081	0,019	-0,037	0,009	0,002
Обструктивный бронхит и ларингит в анамнезе	0,250	0,026	1,409	0,144	0,000
Удельный вес нейтрофилов по НЦГ на 14 день наблюдения	0,124	0,025	0,004	0,001	0,001
Выраженность цилиндрического эпителия по НЦГ на 14 день наблюдения	0,209	0,021	0,371	0,036	0,000
Концентрация TNF-a в НФС на момент окончания наблюдения	0,125	0,020	0,067	0,011	0,000

Примечание: НЦГ – назоцитограмма; НФС – назофарингеальный смыв; В-коэффициенты, выделенные красным, отражают предикторные свойства переменной; В-коэффициенты черного цвета отражают протекторные свойства переменной.

 

Данные, представленные в таблице 4, необходимо трактовать следующим образом. Положительный знак (в таблице без знака) указывает на значимый вклад в уменьшении числа ОРВИ за один год (ассоциирован с большой разницей между первичной частотой ОРВИ и при повторной оценке), а отрицательный знак (в таблице «-») отражает протекторные свойства фактора в отношении уменьшения количества ОРВИ через 1 год после эксперимента. Так же надо отметить, что все эти предикторы и протекторы снижения числа ОРВИ необходимо интерпретировать с позиции месячного воздействия на слизистую оболочку носа одорантов на основе синтетических аналогов феромонов человека.

Как видно из таблицы 4, такие ранее проявленные факторы катамнеза, как атопических дерматит, обструктивный бронхит и стенозирующий ларингит в анамнезе, были предикторами снижения частоты респираторных инфекций у молодых людей, получавших аппликации синтетических аналогов феромонов человека. И хотя эти факторы были предикторами частой респираторной заболеваемости, они же проявились и в чувствительности к ее снижению под воздействием исследуемых аппликационных одорантов.

Значимое положительное влияние на снижение частоты респираторных инфекций после месячного курса натоферином и андроферином оказывало повышение к 14 дню аппликаций удельного веса мерцательного функционального цилиндрического эпителия, его выраженность, а также к этому сроку — нейтрофильных лейкоцитов.

Необходимо отметить повышение к окончанию эксперимента TNF в назофарингеальном смыве как предиктора снижения частоты респираторных заболеваний через 1 год. Эти результаты требует дальнейшего изучения, но вполне вероятно, что именно этот цитокин, совместно с нейтрофильными лейкоцитами, усиливает противобактериальную и антивирусную защиты.

Другим важным результатом является положительная ассоциация высоких концентраций тестостерона к моменту окончания эксперимента со значимым снижением частоты респираторных инфекций у молодых лиц через 1 год после аппликации атоферина и андроферина. Об ассоциациях между повышением тестостерона и снижением респираторных заболеваний неоднократно сообщалось различными исследовательскими группами [6, 12 13]. Возможно, что активация противовирусной защиты в настоящем исследовании также была связана с повышением тестостерона.

Протекторами в снижении частой респираторной заболеваемости (то есть показатели, которые тормозили значимое уменьшения частоты респираторной заболеваемости через один год после эксперимента) были такие факторы катамнеза как использование парфюмерии и избирательность в пище. Эти результаты могут отражать как негативное влияние парфюмерии на слизистую оболочку носа и дефицит витаминов и микроэлементов при ограничении пищевого рациона.

Дефицит функционального мерцательного цилиндрического эпителия при начале эксперимента является протектором в уменьшении частоты респираторных заболеваний. Это еще раз указывает на значимость этого показателя назоцитограммы. Тот факт, что исследуемые стераны влияют именно на это показатель, определяет их значимость в профилактики ОРВИ и повышении неспецифической резистентности слизистой оболочки носа.

Одними из протекторов ограничения респираторной заболеваемости у лиц молодого возраста являются высокие удельный вес эозинофильных лейкоцитов по данным назоцитограммы и концентрация IL-1 в назофарингеальном смыве на момент окончания эксперимента. Эти данные еще раз подтверждают, что отдельные типы конституционально закрепленных аллергических реакций (клеточный тип) могут поддерживать повторение респираторных заболеваний.

По схожей патогенетической схеме реализуется протекторный эффект высоких концентраций IL-6, как провоспалительного цитокина [14, 15], в назофарингеальном смыве в начале эксперимента на снижение частоты респираторной заболеваемости у лиц раннего репродуктивного периода.

Тем самым, умеренная респираторная заболеваемость поддерживается особенностями иммунной конституции молодых людей, это склонность к аллергическим реакциям, прежде всего по клеточному типу, высокий первичный провоспалительный потенциал на слизистой оболочке носа, а также поведенческими факторами (использование косметики, избирательность в пище).

Заключение

Таким образом, многофакторный анализ катамнеза, цитоморфологических и иммунных показателей слизистой оболочки носа выявил ряд предиктором и протекторов частой и длительной респираторной заболеваемости у молодых людей раннего репродуктивного периода. Предикторами этого состояния явились катамнестические маркеры аллергической аномалии конституции (атопический дерматит, обструктивный бронхит и стенозирующий ларингит), факторы поведения (курение), а также иммунные показатели аллергии (IL-4) и дефицита мукоцилиарного клиренса (высокий удельный вес плоского нефункционального эпителия).

Месячный курс нанесения на кожу носогубной складки одорантов на основе синтетических аналогов мужских и женских феромонов (стеранов) оказывает положительный эффект как на неспецифическую резистентность слизистой оболочки носа  (увеличения удельного веса мерцательного функционального эпителия и уменьшения процента плоского эпителия), так и на иммунные показатели ее функционирования  (увеличения уровня нейтрофильных лейкоцитов в назоцитограмме, концентрации в назофарингеальном смыве противовоспалительного IL-10 и, напротив, снижения концентрации провоспалительного IL-6). Кроме того, через месяц применения данных одорантов происходит полная деконтаминация слизистых оболочек носа от условно-патогенных микроорганизмов коккового фенотипа. И наконец, через год после эксперимента группа частоболеющих молодых людей полностью исчезает. Это указывает на значимый клинический эффект применяемых одорантов.

Умеренная респираторная заболеваемость после месячного курса одорантами на основе синтетических аналогов мужских и женских феромонов поддерживается особенностями иммунной конституции молодых людей, это склонность к аллергическим реакциям, прежде всего по клеточному типу, высокий первичный провоспалительный потенциал на слизистой оболочке носа, а также поведенческими факторами (использование косметики, избирательность в пище).

About the authors

Alena Vladimirovna Bedareva

Kemerovo State University

Email: Leona511@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-6068-5473
SPIN-code: 3191-4662
Scopus Author ID: 37076769100
ResearcherId: J-9959-2015

PhD, Associate Professor, Department of Genetics and Fundamental Medicine, KemSU

Russian Federation, 650000, Kemerovo region - Kuzbass, Kemerovo, st. Krasnaya,6

Elena Shabaldina

Kemerovo State Medical University of the Ministry of Health of the Russian Federation

Email: weit2007@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-0450-2767
SPIN-code: 5870-4408
Scopus Author ID: 44061916900

Doctor of Medical Sciences, Associate Professor, Head of the Department of Otorhinolaryngology of the Federal State Budgetary Institution of Higher Education of the Ministry of Health of Russia

Russian Federation, 650056, Kemerovo, Voroshilov street 22a.

Evgenia Astaf'eva

Medicine of the Federal State Budgetary Educational Institution Kemgma of the Ministry of Health of Russia

Email: astafeva.evgenia@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-5841-6311
SPIN-code: 9814-4382
ResearcherId: AEQ-6964-2022

Assistant of the Department of Morphology and Forensic Medicine of the Federal State Budgetary Educational Institution Kemgma of the Ministry of Health of Russia.

Russian Federation, 650056, Kemerovo region – Kuzbass, Kemerovo city, Voroshilova str., 22 A.

Anna Chuyanova

Kemerovo State University

Email: mog-anna@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-3010-1895
SPIN-code: 8551-4984
Scopus Author ID: 56841552600
ResearcherId: H-7678-2017

PhD, Associate Professor of the Department of Genetics and Fundamental Medicine

Russian Federation, 650000, Kemerovo region - Kuzbass, Kemerovo, st. Krasnaya,6

Andrey Shabaldin

Kemerovo State University

Author for correspondence.
Email: weit2007@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-8785-7896
SPIN-code: 5281-0065
Scopus Author ID: 57212696654

Doctor of Medical Sciences, Associate Professor, Professor of the Department of Genetics and Fundamental Medicine

Russian Federation, 650000, Kemerovo region - Kuzbass, Kemerovo, st. Krasnaya,6

References

Supplementary files

There are no supplementary files to display.