Ремоделлинг фенотипа субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов CD64^-CD32⁺CD16⁺CD11B⁺Hr CD64⁺CD32⁺CD16⁺CD11B⁺Hr в созданной de novo экспериментальной модели вирусно-бактериальной инфекции в системе in vitro

Поиск новых таргетных терапевтических стратегий, базирующихся на изучении иммунопатогене-тических механизмов возникновения коинфекций, является актуальным и может в дальнейшем способствовать не только оптимизации выбора иммунотропных лекарственных средств, но и достижению позитивной клинико-иммунологической ремиссии нетипично протекающих инфекционных процессов. Ранее нашими исследованиями было установлено, что возвратные вирусно-бактериальные респираторные инфекции ассоциированы дисфункциями нейтрофильных гранулоцитов (НГ) с разной степенью выраженности нарушений их эффекторных свойств. Зачастую дисфункции НГ сопряжены с различными фенотипическими профилями, характеризующимися разными уровнями и плотностью функционально значимых триггерных рецепторов. Целью исследования было уточнение вариантов трансформации фенотипа субпопуляций CD64^—CD32⁺CD16⁺CD11b⁺Hr, CD64⁺CD32⁺CD16⁺CD11b⁺Hr в созданной экспериментальной модели вирусно-бактериальной коинфекции in vitro. Исследовано 52 образца периферической крови 13 здоровых взрослых добровольцев в возрасте от 21 до 32 лет. Для воспроизведения условий вирусной, бактериальной и вирусно-бактериальной инфекции образцы инкубировали с формил-метионил-лейцил-фенилаланин (fMLP), двухцепочечной РНК (дцРНК) и совместно, затем определяли фенотипические характеристики субпопуляций CD64-CD32⁺CD16⁺CD11b⁺Hr, CD64⁺CD32⁺CD16⁺CD11b⁺Hr с использованием конъюгатов МКАТ CD16-ECD, CD64-FITC, CD32-PE, CD11b-PC5 (Beckman Coulter International S.A., Франция). Анализ полученных данных продемонстрировал, что НГ здоровых взрослых лиц представлены мажорной субпопуляцией CD64^-CD16⁺CD32⁺CD11b⁺ НГ и минорной субпопуляцией CD64⁺CD16⁺CD32⁺CD11b⁺ НГ с разной плотностью мембранных молекул. Минорная субпопуляция CD64⁺CD16⁺CD32⁺CD11b⁺ НГ значительно увеличилась под влиянием дцРНК, fMLP и дцРНК + fMLP по сравнению с интактными образцами. Сравнительный анализ моновлияния иммунотропных субстанций позволил выявить их разные эффекты в отношении действия на поверхностные рецепторные молекулы CD16, CD32 и однонаправленные, но разной интенсивности на CD11b, как в мажорной, так и в минорной субпопуляциях. Преинкубация с дцРНК с последующим добавлением fMLP в группе исследования позволила выявить эффекты совместного стимулирующего влияния субстанций на уровни поверхностных рецепторов обеих субпопуляции НГ. Нами была создана экспериментальная модель вирусно-бактериальной коинфекции в системе in vitro с использованием fMLP и дцРНК и установлены варианты трансформации фенотипа субпопуляций CD64^-CD32⁺CD16⁺CD11b⁺Hr и CD64⁺CD32⁺CD16⁺CD11b⁺Hr Данная модель может быть использована для оценки вариантов трансформации фенотипа других субпопуляций НГ, изучения функциональной активности НГ, особенностей формирования NET, влияния на НГ различных иммунотропных субстанций.