VEGF gene polymorphism in complicated infective endocarditis

Full Text

Введение

Инфекционный эндокардит (ИЭ) является заболеванием бактериального происхождения, при котором возбудитель размещается на клапанном аппарате сердца и эндокарде, и характеризуется быстрым развитием сердечной недостаточности и частыми системными эмболическими осложнениями. Особенности формирования и течения инфекционного процесса обусловлены как чужеродностью возбудителя, так и состоянием иммунной системы (ИС) индивидуума [14, 18], дисбаланс которой при инфекционном процессе выражается нарушением межклеточных цитокин-опосредованных контактов [6], что оправдывает целесообразность их изучения для углубления знаний основ патогенеза различных состояний. Известно, для генов многих цитокинов характерен полиморфизм и присутствие изоформ как свойство, способное изменять направленность иммунного ответа и приводить к развитию предрасположенности к различным вариантам течения заболевания [5]. Хорошо изученной группой таких генетических вариантов являются однонуклеотидные замены (SNP), которые представляют значительный интерес как возможные предиктивные факторы [25]. Поэтому исследование генов, влияющих на активность цитокинов, является одной из главных задач в изучении патогенеза как инициации, так и течения ИЭ, а также выявления предрасположенности к нему. Тромбоэмболические осложнения (ТЭО) — одна из наиболее частых причин смерти пациентов с ИЭ, их выраженность напрямую связана с клиническим вариантом течения заболевания [11]. В современной модели патофизиологии клеточной адгезии при формировании ИЭ первостепенную роль играют деструктивные и некробиотические изменения эндотелиальных клеток (ЭК), контролирующих гомеостаз и сосудисто-тканевую проницаемость [9].

Наиболее значимым цитокиновым фактором ангиогенеза является фактор роста эндотелия сосудов — A (Vascular endothelial growth factor A — VEGF-A) как ключевая молекула индукции васкуло- и ангиогенеза [19] и важнейший регулятор физиологического и патологического усиления роста сосудов за счет прямого митогенного действия на эндотелий [17]. Потребность дополнительного синтеза VEGF-А активированными клетками ИС при ИЭ необходима для усиления роста сосудов [10] и питания поврежденных тканей как эндокарда, так и других систем при ТЭО [21]. VEGF-А кодируется геном, который расположен на хромосоме 6p21.3, однако роль генов цитокина и его сывороточная концентрация при ИЭ изучены недостаточно.

В этой связи целью настоящего исследования был анализ полиморфных вариантов нуклеотидной последовательности гена фактора роста эндотелия сосудов с учетом связи с его сывороточной концентрацией у пациентов с ИЭ.

Материалы и методы

В исследование было включено 86 пациентов, находившихся в ГБУЗ «НИИ-ККБ № 1» г. Краснодара в связи с установленным диагнозом ИЭ. В соответствии с наличием/отсутствием тромбоэмболических осложнений, все исследуемые были разделены на 2 клинические группы: группа 1 — ИЭ с ТЭО (n = 44) и группа 2 — ИЭ без ТЭО (n = 42), а контрольную группу составили 20 условно здоровых лиц. Исследование проведено с соблюдением принципов добровольности и конфиденциальности (участниками исследования подписано информированное согласие и получена полная информация относительно целей, хода и содержания исследования) и одобрено Независимым Этическим Комитетом ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России от 27.09.2019 г., протокол № 80.

Все группы были сопоставимы по возрасту (пациенты с ИЭ — 52±10 лет, условно-здоровые лица — 53±10 лет), сопутствующей патологии, этиологическому фактору эндокардита и локализации бактерии (клапанная локализация). Критериями исключения являлись: отсутствие письменного согласия на исследование, хронические инфекционно-воспалительные состояния, аутоиммунная патология, сопутствующие острые состояния, аллергические реакции в острой фазе, беременность, возраст < 18 лет или > 70 лет.

Проведено иммунологическое и молекулярно-биологическое обследование образцов биологического материала (венозная кровь). Определение сывороточной концентрации VEGF-A осуществляли в первый день поступления пациентов в стационар методом иммуноферментного анализа с помощью набора реагентов для VEGF-А (Вектор-БЕСТ, Россия) с использованием соответствующего оборудования — Multiscan FC (Thermo Scientific, Финляндия), Shaker-Thermostat ST-3L (ELMI, Латвия), HydroFlex (Tecan, Австрия).

Выделение геномной ДНК из лейкоцитов цельной крови производили с использованием реагента «ДНК-ЭКСПРЕСС-кровь» (ООО НПФ «Литех», Россия). Определение SNPs генов VEGF проводили с помощью наборов реагентов для определения полиморфизма C/A гена VEGF-А (rs2146323), полиморфизма C2578A гена VEGF-А (rs699947), полиморфизма C936T гена VEGF (rs3025039), полиморфизма G634C гена VEGF-А (rs2010963) (Синтол, Россия) и соответствующего оборудования — амплификатора CFX96 Real-Time (США), термостата «Гном» (Россия), центрифуги Eppendorf MiniSpin (Германия), вортекса Microspin FV-2400 (Латвия).

Статистическую обработку результатов осуществляли посредством программного обеспечения IBM SPSS Statistics (версия 26). Нормальность распределения признаков проверяли с помощью критерия Шапиро–Уилка. Описательная статистика представлена медианой и интерквартильным размахом — Me (C₂₅–C₇₅). Независимые клинические группы сравнивали критерием U (Манна–Уитни) — если их две; и критерием H (Краскела–Уоллиса) — более 2-х групп. Использовали поправку Бонферрони для расчета скорректированного значения вероятности p. Генотипы SNP тестировали на отклонение от равновесия Харди–Вайнберга (p > 0,05). Достоверность различий частот генотипов определяли по двустороннему точному критерию Фишера. Проведен логистический регрессионный анализ для определения отношения шансов OR (Odds Ratio) с расчетом 95% доверительного интервала CI (Confidence Interval). Пороговый уровень критической значимости — значение вероятности (p) < 0,05.

Результаты

Как иммунологическое, так и молекулярно-генетическое исследование проводилось в первые дни поступления пациентов в стационар, после установления точного диагноза — «Инфекционный эндокардит» — в соответствии с диагностическими критериями Duke [12]. Охарактеризованное нами распределение частот генотипов VEGF относительно контрольной группы соответствует распределению частоты в европеоидных популяциях. Для более точных данных были рассчитаны собственные ожидаемые частоты в соответствии с законом Харди–Вайнберга. Таким образом распределение наблюдаемых частот как в контрольной, так и в клинических группах находится в равновесии Харди–Вайнберга.

Исследованиями выявлены статистически значимые различия распределения частот VEGF-rs2010963 между пациентами с ИЭ и группой относительно здоровых лиц по генотипам G/G (OR = 0,25; p = 0,012) и G/C (OR = 4,28; p = 0,022), тогда как исследование генотипа C/C (rs2010963) указывает на отсутствие межгрупповых различий (табл. 1).

 

Таблица 1. Распределение частот генотипов VEGF среди пациентов с ИЭ и в контрольной группе

Table 1. Distribution of VEGF genotype frequencies among patients with IE and control group

SNP, VEGF	Пациенты с ИЭ Patients with IE	Группа контроля Control group	OR (95% CI)	p
rs699947	n = 86	n = 20
C/C	n = 24 (28%)	n = 9 (45%)	0,17 < 0,47 < 1,28	0,180
C/A	n = 37 (43%)	n = 6 (30%)	0,62 < 1,76 < 5,02	0,323
A/A	n = 25 (29%)	n = 5 (25%)	0,4 < 1,23 < 3,75	0,790
rs2010963	n = 86	n = 20
G/G	n = 37 (43%)	n = 15 (75%)	0,08 < 0,25 < 0,76	0,012*
G/C	n = 37 (43%)	n = 3 (15%)	1,17 < 4,28 < 15,69	0,022*
C/C	n = 12 (14%)	n = 2 (10%)	0,3 < 1,46 < 7,11	0,999
rs2146323	n = 86	n = 20
C/C	n = 32 (37%)	n = 11 (55%)	0,18 < 0,48 < 1,3	0,205
C/A	n = 28 (33%)	n = 6 (30%)	0,39 < 1,13 < 3,24	0,999
A/A	n = 26 (30%)	n = 3 (15%)	0,66 < 2,46 < 9,11	0,264
rs3025039	n = 85	n = 20
C/C	n = 62 (72,9%)	n = 15 (75%)	0,35 < 1,08 < 3,35	0,999
C/T	n = 20 (23,5%)	n = 4 (20%)	0,37 < 1,23 < 4,11	0,999
T/T	n = 3 (3,5%)	n = 1 (5%)	0,07 < 0,7 < 7,06	0,576

Примечание. p — точный критерий Фишера; * — значимые отличия между группами, p < 0,05; OR — отношение шансов; CI — доверительный интервал.

Note. p — Fisher’s exact criterion; * — significant inter-group differences, p < 0.05; OR — odds ratio; CI — confidence interval.

 

Распределение генотипов по остальным SNP (rs699947, rs2146323 и rs3025039) также не выявило достоверных различий между группами.

Что касается концентраций VEGF (пг/мл) в сыворотке крови среди пациентов с ИЭ и ее распределения по соответствующим генотипам (табл. 2), то статистически значимое различие наблюдалось между концентрациями цитокина по SNP-rs2010963, по критерию Краскела–Уоллиса — межгруппового дисперсионного анализа, p = 0,0001.

 

Таблица 2. Сывороточные уровни концентрации VEGF в соответствии с вариантами генотипа среди пациентов с ИЭ

Table 2. Serum VEGF levels according to genotype variants among patients with IE

SNP, VEGF	Пациенты с инфекционным эндокардитом, пг/мл Patients with infectious endocarditis, pg/mL			p
rs699947 n = 86	C/C (n = 24)	C/A (n = 37)	A/A (n = 25)	0,141
	809,88 (445,66–1041,53)	612,5 (228,76–1062,13)	319,28 (111,01–1012,5)
rs2010963 n = 86	G/G (n = 37)	G/C (n = 37)	C/C (n = 12)	0,0001*
	201,37 (77,58–764,69)	785,37 (484,87–1131,15)	926,04 (574,78–1041,53)
	Поправка Бонферрони Bonferroni correction
	p (GG-CC) = 0,016*	p (GC-GG) = 0,001*	p (CC-GC) = 1
rs2146323 n = 86	C/C (n = 32)	C/A (n = 28)	A/A (n = 26)	0,288
	701,29 (192,61–1001,05)	403,37 (145,35–1041,53)	722,76 (329,87–1105,80)
rs3025039 n = 85	C/C (n = 62)	C/T (n = 20)	T/T (n = 3)	0,161
	762,69 (269,91–1085,83)	293,35 (177,82–904,15)	562,62 (175,46–577,48)

Примечание. р — критерий Краскела–Уоллиса; * — значимые отличия между группами, p < 0,05. Результаты концентрации VEGF представлены в виде Мe (C₂₅–C₇₅).

Note. p — Kruskel–Wallis test; * — significant inter-group differences, p < 0.05. VEGF concentration results presented as Мe (C₂₅–C₇₅).

 

Для выяснения результатов множественного сравнения, а именно, какие генотипы по rs2010963 дают значимую разницу, использовали поправку Бонферрони. Анализ полученных данных указал на весомую разницу в концентрациях цитокина между генотипами GG/GC (p = 0,001) и GG/CC (p = 0,016) по rs2010963. Распределение концентраций между генотипами по остальным трем SNP не показало достоверной разницы ни в одном из случаев.

При анализе распределения частот генотипов различных SNP VEGF между пациентами клинических групп (ИЭ с ТЭО и ИЭ без ТЭО) с группой контроля (табл. 3), выявлено статистически значимое снижение частоты генотипа G/G (rs2010963) в группе ИЭ с ТЭО по сравнению с частотой G/G в контрольной группе (OR = 0,21; p = 0,014). При этом также обнаружено статистически значимое повышение частоты генотипа G/C того же SNP в группе ИЭ с ТЭО по сравнению с частотой G/C в контрольной группе (OR = 4,72; p = 0,024), тогда как достоверных различий среди других SNP не наблюдалось.

 

Таблица 3. Распределение частот генотипов VEGF среди пациентов с ИЭ разных клинических групп и контрольной группой

Table 3. Frequency distribution of VEGF genotypes among IE patients in diverse clinical groups and controls

VEGF, SNP	ИЭ с ТЭО IE with TEC	ИЭ без ТЭО IE without TEC	Контроль Control	ИЭ с ТЭО/ ИЭ без ТЭО IE with TEC/IE without TEC OR (95% CI)	ИЭ с ТЭО/ контроль IE with TEC/Control OR (95% CI)	ИЭ без ТЭО/ контроль IE without TEC/Control OR (95% CI)
rs699947	n = 44	n = 42	n = 20
C/C	13 (29%)	11 (26%)	9 (45%)	0,46 < 1,18 < 3,04 p = 0,812	0,17 < 0,51 < 1,53 p = 0,264	0,14 < 0,43 < 1,33 p = 0,157
C/A	17 (39%)	20 (48%)	6 (30%)	0,29 < 0,69 < 1,63 p = 0,513	0,47 < 1,47 < 4,56 p = 0,582	0,68 < 2,12 < 6,58 p = 0,271
A/A	14 (32%)	11 (26%)	5 (25%)	0,52 < 1,32 < 3,35 p = 0,638	0,42 < 1,4 < 4,62 p = 0,769	0,31 < 1,06 < 3,62 p = 1
rs2010963	n = 44	n = 42	n = 20
G/G	17 (39%)	20 (48%)	15 (75%)	0,29 < 0,69 < 1,63 p = 0,513	0,06 < 0,21 < 0,68 p = 0,014*	0,09 < 0,3 < 0,99 p = 0,056
G/C	20 (45%)	17 (40%)	3 (15%)	0,52 < 1,23 < 2,88 p = 0,668	1,21 < 4,72 < 18,46 p = 0,024*	0,98 < 3,85 < 15,2 p = 0,079
C/C	7 (16%)	5 (12%)	2 (10%)	0,42 < 1,44 < 4,95 p = 0,756	0,33 < 1,75 < 9,3 p = 0,706	0,21 < 1,22 < 6,89 p = 1
rs2146323	n = 44	n = 42	n = 20
C/C	13 (29%)	19 (45%)	11 (55%)	0,21 < 0,51 < 1,23 p = 0,180	0,11 < 0,34 < 1,02 p = 0,093	0,23 < 0,68 < 1,97 p = 0,588
C/A	14 (32%)	14 (33%)	6 (30%)	0,38 < 0,93 < 2,3 p = 0,999	0,35 < 1,09 < 3,43 p = 0,999	0,37 < 1,17 < 3,69 p = 1
A/A	17 (39%)	9 (22%)	3 (15%)	0,89 < 2,31 < 6 p = 0,102	0,91 < 3,57 < 14,03 p = 0,082	0,37 < 1,55 < 6,47 p = 0,735
rs3025039	n = 43	n = 42	n = 20
C/C	31 (72%)	31 (74%)	15 (75%)	0,35 < 0,92 < 2,39 p = 0,999	0,26 < 0,86 < 2,89 p = 1	0,28 < 0,94 < 3,19 p = 1
C/T	10 (23%)	10 (24%)	4 (20%)	0,36 < 0,97 < 2,64 p = 0,999	0,33 < 1,21 < 4,47 p = 1	0,34 < 1,25 < 4,61 p = 1
T/T	2 (5%)	1 (2%)	1 (5%)	0,17 < 2 < 22,93 p = 1	0,08 < 0,93 < 10,86 p = 1	0,03 < 0,46 < 7,81 p = 0,544

Примечание. p — точный критерий Фишера; * — значимые отличия между группами, p < 0,05; OR — отношение шансов; CI — доверительный интервал.

Note. p — Fisher’s exact criterion; * — significant inter-group differences, p < 0.05; OR — odds ratio; CI — confidence interval.

 

Следует отметить, что некоторые явно завышенные значения — для rs3025039 генотип T/T (OR = 2 при сравнении групп ИЭ с ТЭО/ИЭ без ТЭО) или rs2146323 генотип A/A (OR = 3,57 при сравнении групп ИЭ с ТЭО/контроль), обусловлены недостаточным числом лиц в клинических группах и для их уточнения необходимы дополнительные исследования.

При этом есть тенденция к значимости различий, но она не оказалась достаточной в пределах выбранного уровня вероятности (p < 0,05). Это касается SNP — rs2010963 генотипов G/G (OR = 0,3; p = 0,056) и G/C (OR = 3,85; p = 0,079) между группой ИЭ без ТЭО и контролем. Отметим полиморфизм rs2146323, его генотипы C/C (OR = 0,34; p = 0,093) и A/A (OR = 3,57; p = 0,082) между группой ИЭ с ТЭО и группой условно здоровых лиц, где также видна тенденция к значимости различий, но ограничена выбранным уровнем значимости (p < 0,05).

Анализ уровней сывороточных концентраций разных SNP-VEGF (пг/мл) в соответствии с вариантами генотипов среди пациентов с осложненным и неосложненным течением ИЭ продемонстрировал отсутствие взаимосвязи между генотипами и концентрацией VEGF в 1 группе (ИЭ с ТЭО) ни по одному из исследованных SNP-VEGF (табл. 4). Между тем в клинической группе с неосложненным течением ИЭ обнаружены статистически значимые различия по rs2010963 между различными генотипами (p = 0,0003), и коррекция на множественные сравнения указала достоверную разницу этой группы по генотипам: GG/CC (p = 0,01) и GG/GC (p = 0,003)

 

Таблица 4. Сывороточные уровни концентрации VEGF в соответствии с вариантами генотипа среди пациентов с ИЭ разных клинических групп

Table 4. Serum VEGF levels according to genotype variants among IE patients of different clinical groups

SNP, VEGF	Пациенты, ИЭ с ТЭО, пг/мл Patients, IE with TEC, pg/mL			p
rs699947 n = 44	C/C (n = 13)	C/A (n = 17)	A/A (n = 14)	0,310
	1012,17 (692,18–1188,44)	693,63 (356,8–1154,19)	517,51 (189,97–1088,38)
rs2010963 n = 44	G/G (n = 17)	G/C (n = 20)	C/C (n = 7)	0,177
	495,75 (165,63–1094,2)	881,51 (438,57–1161,6)	938,5 (508,89–1042,48)
rs2146323 n = 44	C/C (n = 13)	C/A (n = 14)	A/A (n = 17)	0,854
	938,5 (451,33–1191,29)	733,05 (283,59–1058,32)	577,48 (326,34–1182,93)
rs3025039 n = 43	C/C (n = 31)	C/T (n = 10)	T/T (n = 2)	0,410
	938,5 (508,89–1109,83)	349,74 (197,72–1284,48)	–
Пациенты, ИЭ без ТЭО, пг/мл Patients, IE without TEC, pg/mL
rs699947 n = 42	C/C (n = 11)	C/A (n = 20)	A/A (n = 11)	0,294
	785,37 (186,27–913,59)	536,13 (177,82–957,72)	251,49 (3,5–797,58)
rs2010963 n = 42	G/G (n = 20)	G/C (n = 17)	C/C (n = 5)	0,0003*
	152,42 (44,09–411,33)	785,37 (444,1–991,9)	913,59 (591,87–1387,6)
	Поправка Бонферрони Bonferroni correction
	p(GG-CC)=0,01*	p(GC-GG)=0,003*	p(CC-GC)=1
rs2146323 n = 42	C/C (n = 19)	C/A (n = 14)	A/A (n = 9)	0,129
	612,5 (169,93–819,77)	196,27 (71,95–872,09)	795,23 (419,16–991,9)
rs3025039 n = 42	C/C (n = 31)	C/T (n = 10)	T/T (n = 1)	0,273
	643,57 (138,29–973,93)	237,1 (154,08–714,88)	–

Примечание. р — критерий Краскела–Уоллиса (использовался при сравнении 3-х признаков), критерий Манна–Уитни (использовался при сравнении 2-х признаков); * — значимые отличия между группами, p < 0,05. Результаты концентрации VEGF представлены в виде Мe (C₂₅–C₇₅).

Note. p — Kruskel–Wallis criterion (used to compare 3 signs), Mann–Whitney criterion (used to compare 2 signs); * — significant inter-group differences, p < 0.05. VEGF concentration results presented as Мe (C₂₅–C₇₅).

 

Анализ связи между частотой генотипов rs2010963 и концентрацией сывороточного уровня VEGF в клинических группах показал, что во 2-й группе (ИЭ без ТЭО) частота генотипа G/G с концентрацией VEGF 152,42 (44,09–411,33) пг/мл была в 6 раз ниже концентрации VEGF по генотипу C/C 913,59 (591,87–1387,6) пг/мл, и в 5,1 раз ниже по генотипу G/C, 785,37 (444,1–991,9) пг/мл. Между тем в 1-й группе (ИЭ с ТЭО) значимых различий концентрации по генотипам выявлено не было.

Наряду с этим выявлены тенденции к снижению концентрации VEGF в связи с аллелем Т по rs3025039 генотип C/C 762,69 (269,91–1085,83) пг/мл против C/T 293,35 (177,82–904,15) пг/мл и T/T 562,62 (175,46–577,48) пг/мл, а также при сравнении генотипов SNP rs3025039 в подгруппах ИЭ с/без ТЭО.

Обсуждение

ИЭ, как и многие другие состояния, является воспалительным процессом и сопровождается гипоксией тканей, что является сильнейшим стимулом, вызывающим секрецию VEGF [19]. Поскольку развитие и прогрессирование эндокардита, как и многих заболеваний инфекционной природы, является результатом взаимодействия генетического аппарата с факторами внешнего воздействия, прогностическая значимость единичного полиморфизма крайне мала [23]. И тем не менее существуют исследования, которые указывают на связь SNP генов VEGF, его сывороточного уровня и риска тяжести состояния пациента [8, 20], а увеличение числа генотипов цитокинов и факторов роста в составе сложных генетических комплексов у одного пациента значительно повышает клиническую значимость результата иммуногенетического исследования [3].

Так, среди исследуемых нами полиморфных вариантов гена VEGF, особый интерес вызвал полиморфизм rs2010963, показана связь генотипов с ИЭ, в том числе с осложненным его течением. В современной литературе имеются работы, устанавливающие связь SNP с риском выявления нарушений сердечно-сосудистого аппарата. Так, Vannay A. и соавт. (2006) в своем исследование акцентируют внимание на аллель +405С VEGF, который указывал на значимую распространенность в группе пациентов с ишемической болезнью сердца (ИБС) (p < 0,001) и повышенный риск в отношении данного состояния (OR = 1,72; доверительный интервал — 95%) [22].

Другие работы указывают на связь генотипов с более низкой экспрессией VEGF (rs2010963) и с более высоким риском дефекта межжелудочковой перегородки (ДМЖП), а именно: аллель –634C находится в значительной протективной связи против ДМЖП, что свидетельствует о нарушении регуляции VEGF в патологических процессах данного заболевания [24].

В своем исследование Lambrechts D. и соавт. (2005) при генотипировании 148 лиц с изолированным, несиндромальным TOF (тетрада Фалло) обнаружили повышенный риск развития заболевания при наличие полиморфных вариантов в промоторе VEGF (rs699947 и rs1570360) и лидерной последовательности (rs2010963), которые снижали уровни VEGF [16]. Для ИЭ полиморфизм rs699947 не оказался значим в нашем исследовании.

Анализ результатов оценки сывороточного уровня концентрации VEGF у пациентов с ИЭ позволил обнаружить значимые отличия по вариантам генотипов полиморфизма rs2010963. Стоит отметить, что присутствие минорного аллеля С указывало на более высокие уровни цитокина в крови. Так, медиана генотипа G/G = 201,37 пг/мл; генотипа G/C = 785,37 пг/мл; генотипа C/C = 926,04 пг/мл. Это находит свое подтверждение в исследованиях Awata T. и соавт. (2002), указывающих на связь генотипа C/C rs2010963 с более высоким сывороточным уровнем VEGF и может свидетельствовать об усилении синтеза VEGF. Авторы отмечают более высокие уровни VEGF в сыворотке крови у лиц с генотипом СС полиморфизма rs2010963, чем у субъектов с другими генотипами (p = 0,021) [7].

Исследованием установлено отсутствие связи ИЭ с однонуклеотидными заменами rs699947, rs2146323 и rs3025039. Важно отметить, что немногочисленные данные по полиморфным вариантам гена VEGF и его связи с кардиоваскулярной патологией свидетельствуют об их противоречивости. Так по мнению одних авторов полиморфизм rs699947 связан с риском ишемической болезни сердца [8, 13]. Группу наблюдения составили 175 пациентов с подтвержденной ИБС, в которой наблюдали более высокие частоты генотипа VEGF 2578AA — rs699947 (p = 0,008), что также указывало на тяжесть заболевания [8]. Другое исследование также указывает на связь генотипа VEGF –2578CC с более высокой экспрессией фактора роста эндотелия сосудов. Авторы согласовывают эти результаты с защитным эффектом VEGF при развитии атеросклероза [13]. При этом другие исследования связывают риск ИБС с полиморфизмом VEGF rs3025039, и свидетельствуют об отсутствии связи VEGF rs699947 и ИБС. Авторы отмечают высокую частоту аллеля С и генотипа СС в положении +936 гена VEGF (rs3025039) у больных ИБС, которая оказалась значимо выше, чем у пациентов без данного заболевания (р = 0,02) [2].

Между тем, выявленная нами тенденция к снижению сывороточной концентрации VEGF в связи с аллелем Т по полиморфизму rs3025039 коррелирует с данными других исследователей, свидетельствующими о связи аллеля T (rs3025039) с более низким уровнем белка в сыворотке крови [15].

Уникальность молекулярных исследований состоит в учете особенностей конкретного пациента, а профилактическая составляющая включает получение информации о геноме индивидуума еще до болезни, что может предотвратить развитие патологического состояния [1].

Между тем частая противоречивость данных о патогенетической роли SNP при сердечно-сосудистых патологиях и заболеваниях инфекционной природы может быть обусловлена недостаточной по объему выборкой пациентов, влиянием множества других генов и факторов внешней среды на фенотип, эпигенетику, как и недостаточное представление о паттернах вариации в геноме человека. При этом полиморфные варианты в генах воспалительных факторов ИС могут приводить к неадекватной активации иммуновоспалительной системы при внедрении микроорганизма [4].

Заключение

Таким образом, анализ полученных данных в настоящем исследовании позволил выявить связь между генотипами VEGF и его сывороточными уровнями у пациентов с ИЭ, а именно: генотипы G/G и G/C полиморфизма rs2010963 показали статистически значимое отличие не только в распределении частот у пациентов с ИЭ и контрольной группой (p = 0,012 и p = 0,022 соответственно), а также среди клинических групп (ИЭ с ТЭО, p = 0,014 и p = 0,024), но и выявили связь с более высокой плазменной концентрацией VEGF носителей минорного аллеля C, которая прослеживается как на уровне основной группы пациентов с ИЭ (медианы G/G — 201,37 пг/мл против G/C — 785,37 и C/C — 926,04), так и в клинических группах ИЭ с ТЭО (G/G — 201,37 пг/мл против G/C — 785,37 и C/C — 926,04) и ИЭ без ТЭО (G/G — 152,42 пг/мл против G/C — 785,37 и C/C — 913,59).

Таким образом, с точки зрения актуальности изучения и внедрения в практику дополнительных иммуногенетических критериев лабораторной диагностики ИЭ, представляет интерес анализ и систематизация современных научных сведений о полиморфизме генов цитокинов, ассоциированных с данным заболеванием. Проведенное исследование подтверждает наличие связи ИЭ с полиморфными вариантами гена VEGF rs2010963, а также частоты генотипов — с сывороточным уровнем цитокина. Таким образом, оценка полиморфизма гена VEGF rs2010963 и сывороточный уровень соответствующего цитокина у пациентов с ИЭ обоснована и целесообразна с целью диагностики и профилактики заболевания.

About the authors

E. S. Samoylenko

Kuban State Medical University; Scientific Research Institute — Ochapovsky Regional Clinical Hospital No. 1

Author for correspondence.
Email: kondrenko.ekaterina@yandex.ru

PhD student, Department of Clinical Immunology, Pathologist

Russian Federation, Krasnodar; Krasnodar

N. V. Kolesnikova

Kuban State Medical University

Email: nvk24071954@mail.com

PhD, MD (Biology), Professor, Professor of the Department of Clinical Immunology

Russian Federation, Krasnodar

V. I. Baklay

Specialized Clinical Infectious Diseases Hospital

Email: vladik120989@gmail.com

Bacteriologist

Russian Federation, Krasnodar

E. Yu. Maydannikova

Scientific Research Institute — Ochapovsky Regional Clinical Hospital No. 1

Email: ekaterinamaydannikova@mail.ru

Biologist, Clinical Diagnostic Laboratory Pathologist

Russian Federation, Krasnodar

E. V. Omelchenko

Scientific Research Institute — Ochapovsky Regional Clinical Hospital No. 1

Email: omelcenkoekaterina1@gmail.com

Laboratory Assistant, Clinical Diagnostic Laboratory

Russian Federation, Krasnodar

References

Supplementary files