Реакция микронейтрализации в сравнении с реакцией торможения гемагглютинации при оценке иммуногенности гриппозных вакцин и диагностике гриппа

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Целью исследования являлось сравнение результатов реакции торможения гемагглютинации (РТГА) и реакции микронейтрализации при детекции антител к вирусам гриппа А(H1N1), A(H1N1)pdm09 и А(H3N2) в сыворотках людей, а также оптимизация условий постановки реакции микронейтрализации. Предложенный вариант реакции микронейтрализации основан на выявлении снижения репродукции вируса гриппа в инфицированных клетках MDCK в присутствии вирусспецифичных сывороточных антител. Репродукцию вирусов в клетках оценивали иммуноферментным методом в 96-луночных культуральных планшетах с помощью типоспецифичных моноклональных антител, направленных к NP-белку вирусов гриппа А. Параллельно в реакции микронейтрализации и РТГА были проанализированы парные сыворотки 205 волонтеров, привитых инактивированными сезонными гриппозными вакцинами, а также 117 взрослых пациентов, переболевших лабораторно подтвержденным гриппом. Доказана целесообразность обработки сывороток человека рецептор-разрушающим энзимом (RDE) при постановке не только РТГА, но и реакции микронейтрализации. Показана бόльшая чувствительность реакции микронейтрализации по сравнению с РТГА. По данным микронейтрализации показатели частоты сероконверсий и кратности прироста антител к вирусам гриппа А у вакцинированных и переболевших людей превышали в 1,4–2,5 раза результаты, полученные в РТГА. Более высокая чувствительность реакции микронейтрализации имела большое значение при расшифровке заболевания, вызванного новым патогеном. Эффективность серодиагностики гриппа A(H1N1)pdm09 у ПЦРположительных пациентов была в 1,5 раза выше по результатам реакция микронейтрализации по сравнению с РТГА. Согласно традиционным представлениям, основанным на результатах ранних работ, титр гриппспецифичных антител 1/40, выявленный в РТГА, считается защитным. При этом общепринятого протективного уровня вирусспецифичных антител для реакции нейтрализации до сих пор не установлено. Уровни антител в сыворотках, выявленные при использовании предложенного варианта реакции микронейтрализации, были значительно выше, чем по результатам РТГА. В поствакцинальных сыворотках привитых волонтеров среднегрупповые титры вируснейтрализующих антител, соответствующие 1/40 в РТГА, составили 1/195, 1/203 и 1/426–1/430 для вирусов гриппа A(Н1N1), A(Н1N1)pdm09 и A(Н3N2) соответственно. В сыворотках переболевших гриппом пациентов эти же показатели составили 1/285, 1/215 и 1/488. В соответствии с этим для реакции микронейтрализации порогами для «условно протективного» уровня антител у взрослых вакцинированных волонтеров или заболевших пациентов предложено считать в титры 1/160 для вирусов A(Н1N1) и A(Н1N1)pdm09, а также 1/320 для вируса A(Н3N2), что согласуется с данными других исследователей.

Об авторах

В. З. Кривицкая

ФГБУ НИИ гриппа им. А.А. Смородинцева МЗ РФ

Автор, ответственный за переписку.
Email: vera.kriv@influenza.spb.ru

Кривицкая Вера Зорьевна, д.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории изучения факторов риска при гриппе и ОРВИ

197376, Санкт-Петербург, ул. Проф. Попова, 15/17.

Тел./факс: 8 (812) 499-15-29 (служебн.); 8 921 886-37-95 (моб.).

Россия

Е. В. Кузнецова

ФГБУ НИИ гриппа им. А.А. Смородинцева МЗ РФ

Email: fake@neicon.ru

к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории изучения факторов риска при гриппе и ОРВИ

Санкт-Петербург Россия

В. Г. Майорова

ФГБУ НИИ гриппа им. А.А. Смородинцева МЗ РФ

Email: fake@neicon.ru

старший научный сотрудник лаборатории изучения факторов риска при гриппе и ОРВИ

Санкт-Петербург Россия

Р. А. Кадырова

ФГБУ НИИ гриппа им. А.А. Смородинцева МЗ РФ

Email: fake@neicon.ru

младший научный сотрудник лаборатории клеточных культур

Санкт-Петербург Россия

Н. И. Львов

ФГБВОУ ВПО Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова МО РФ

Email: fake@neicon.ru

д.м.н., доцент, профессор кафедры инфекционных болезней

Санкт-Петербург Россия

А. А. Го

ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера

Email: fake@neicon.ru

к.м.н., врач-инфекционист клинико-диагностического отделения

Санкт-Петербург Россия

А. А. Соминина

ФГБУ НИИ гриппа им. А.А. Смородинцева МЗ РФ

Email: fake@neicon.ru

д.м.н., профессор, зав. лабораторией изучения факторов риска при гриппе и ОРВИ

Санкт-Петербург Россия

Список литературы

  1. Изучение популяционного иммунитета к гриппу у населения Российской Федерации: Методические указания МУ 3.1.3490-17 (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 27 октября 2017 г.)
  2. Методы определения показателей качества иммунобиологических препаратов для профилактики и диагностики гриппа: Методические указания МУ 3.3.2.1758-03 (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 28 сентября 2003 г.)
  3. Alvarez M.M., López-Pacheco F., Aguilar-Yañez J.M., Portillo-Lara R., Mendoza-Ochoa G.I., García-Echauri S., Freiden P., Schultz-Cherry S., Zertuche-Guerra M.I.,Bulnes-Abundis D., Salgado-Gallegos J., Elizondo-Montemayor L., Hern á ndezTorre M. Specific recognition of influenza A/H1N1/2009 antibodies in human serum: a simple virus-free ELISA method. PLoS One, 2010, vol. 5, no. 4: e10176. doi: 10.1371/journal.pone.0010176
  4. Benoit A., Beran J., Devaster J.M., Esen M., Launay O., Leroux-Roels G., McElhaney J.E., Oostvogels L., van Essen G.A., Gaglani M., Jackson L.A., Vesikari T., Legrand C., Tibaldi F., Innis B.L., Dewé W. Hemagglutination inhibition antibody titers as a correlate of protection against seasonal A/H3N2 influenza disease. Open Forum Infect. Dis., 2015, vol. 2, no. 2: ofv067. doi: 10.1093/ofid/ofv067
  5. Black S., Nicolay U., Vesikari T., Knuf M., Del Giudice G., Della Cioppa G., Tsai T., Clemens R., Rappuoli R. Hemagglutination inhibition antibody titers as a correlate of protection for inactivated influenza vaccines in children. Pediatr. Infect. Dis. J., 2011, vol. 30, pp. 1081–1085. doi: 10.1097/INF.0b013e3182367662
  6. Centers for Disease Control and Prevention (CDC). Serum cross-reactive antibody response to a novel influenza A (H1N1) virus after vaccination with seasonal influenza vaccine. Morb. Mortal. Wkly. Rep., 2009, vol. 58, no. 19, pp. 521–524.
  7. Ehrlich H.J., Müller M., Oh H.M., Tambyah P.A., Joukhadar C., Montomoli E., Fisher D., Berezuk G., Fritsch S., Löw-Baselli A., Vartian N., Bobrovsky R., Pavlova B.G., Pöllabauer E.M., Kistner O., Barrett P.N. Baxter H5N1 Pandemic Influenza Vaccine Clinical Study Team. A clinical trial of a whole-virus H5N1 vaccine derived from cell culture. N. Engl. J. Med., 2008, vol. 358, no. 24, pp. 2573–2584. doi: 10.1056/NEJMoa073121
  8. EMA, Guideline on influenza vaccines. Non-clinical and clinical module. Draft. 2016.
  9. Grund S., Adams O., Wählisch S., Schweiger B. Comparison of hemagglutination inhibition assay, an ELISA-based micro-neutralization assay and colorimetric microneutralization assay to detect antibody responses to vaccination against influenza A H1N1 2009 virus. J. Virol. Methods, 2011, vol. 171, no. 2, pp. 369–373. doi: 10.1016/j.jviromet.2010.11.024
  10. Hobson D., Curry R.L., Beare A.S., Ward-Gardner A. The role of serum haemagglutinatination binhibiting antibody in protection against challenge infection with influenza A2 and B viruses. J. Hyg., 1972, vol. 70, pp. 767–777.
  11. Lin Y., Gu Y., McCauley J.W. Optimization of a quantitative micro-neutralization assay. J. Vis. Exp., 2016, vol. 118: e54897. doi: 10.3791/54897
  12. Matrosovich M., Gao P., Kawaoka Y. Molecular mechanisms of serum resistance of human influenza H3N2 virus and their involvement in virus adaptation in a new host. J. Virol., 1998, vol. 72, no. 8, pp. 6373–6380.
  13. Memoli M.J., Shaw P.A., Han A., Czajkowski L., Reed S., Athota R., Bristol T., Fargis S., Risos K., Powers J.H., Davey R.T., Taubenberger J.K. Evaluation of antihemagglutinin and antineuraminidase antibodies as correlates of protection in an influenza A/H1N1 virus healthy human challenge model. mBio, 2016, vol. 7, no. 2: e00417-16. doi: 10.1128/mBio.00417-16
  14. Nakane P.K., Kawaoi A. Peroxidase-labeled antibody. A new method of conjugation. J. Histochem. Cytochem., 1974, vol. 22, no. 12, pp. 1084–1091. doi: 10.1177/22.12.1084
  15. Potter C.W., Oxford J.S. Determinants of immunity to influenza infection in man. Br. Med. Bull., 1979, vol. 35, pp. 69–75.
  16. Rowe T., Abernathy R.A., Hu-Primmer J., Thompson W.W., Lu X., Lim W., Fukuda K., Cox N.J., Katz J.M. Detection of antibody to avian influenza A (H5N1) virus in human serum by using a combination of serologic assays. J. Clin. Microbiol., 1999, vol. 37, pp. 937–943.
  17. Rudenko L., Kiseleva I., Naykhin A.N., Erofeeva M., Stukova M., Donina S., Petukhova G., Pisareva M., Krivitskaya V., Grudinin M., Buzitskaya Zh., Isakova-Sivak I., Kuznetsova S., Larionova N., Desheva J., Dubrovina I., Nikiforova A., Victor J., Neuzil K., Flores J., Tsvetnitsky V., Kiselev O. Assessment of human immune responses to H7 avian influenza virus of pandemic potential: results from a placebo-controlled, randomized double-blind phase I study of live attenuated H7N3 influenza vaccine. PLoS One, 2014, vol. 9, no. 2: е87962. doi: 10.1371/journal.pone.0087962
  18. Serological diagnosis of influenza by microneutralization assay. WHO Manual. 2010.
  19. Stephenson I., Das R.G., Wood J.M., Katz J.M. Comparison of neutralising antibody assays for detection of antibody to influenza A/H3N2 viruses: an international collaborative study. Vaccine, 2007, vol. 25, no. 20, pp. 4056–4063. PMID: 17412461. doi: 10.1016/j.vaccine.2007.02.039
  20. Stephenson I., Wood J.M., Nicholson K.G., Zambon M.C. Sialic acid receptor specificity on erythrocytes affects detection of antibody to avian influenza haemagglutinin. J. Med. Virol., 2003, vol. 70, pp. 391–398. doi: 10.1002/jmv.10408
  21. Trombetta C.M., Montomoli E. Influenza immunology evaluation and correlates of protection: a focus on vaccines. Expert. Rev. Vaccines, 2016, vol. 15, no. 8, pp. 967–976. doi: 10.1586/14760584.2016.1164046
  22. Tsang T.K., Cauchemez S., Perera R.A., Freeman G., Fang V.J., Ip D.K., Leung G.M., Malik Peiris J.S, Cowling B.J. Association between antibody titers and protection against influenza virus infection within households. J. Infect. Dis., 2014, vol. 210, no. 5, pp. 684–692. doi: 10.1093/infdis/jiu186
  23. Verschoor C.P., Singh P., Russell M.L., Bowdish D.M., Brewer A., Cyr L., Ward B.J., Loeb M. Correction: Microneutralization assay titres correlate with protection against seasonal influenza H1N1 and H3N2 in children. PLoS One, 2015, vol. 10, no. 6: e0131531. doi: 10.1371/journal.pone.0131531
  24. Zhu H., Ding X., Chen X., Yao P., Xu F., Xie R., Yang Z., Liang W., Zhang Y., Li Y., Shen J., He P., Guo Z., Su B., Sun S., Zhu Z. Neutralizing antibody but not hemagglutination antibody provides accurate evaluation for protective immune response to H5N1 avian influenza virus in vaccinated rabbits. Vaccine, 2011, vol. 29, no. 33, pp. 5421–5423. doi: 10.1016/j.vaccine.2011.05.067

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Кривицкая В.З., Кузнецова Е.В., Майорова В.Г., Кадырова Р.А., Львов Н.И., Го А.А., Соминина А.А., 2020

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС 77 - 64788 от 02.02.2016.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах