Выявление роли метициллинрезистентных Staphylococcus aureus и их молекулярно-генетических особенностей в развитии гнойно-некротических форм синдрома диабетической стопы

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Гнойно-некротические  осложнения у больных с синдромом диабетической стопы являются одной из главных причин ампутаций и инвалидизации и даже гибели пациентов. Целью данной работы явилось изучение роли MRSA и их молекулярно-генетических особенностей, а также антибиотикорезистентности в развитии гнойно-некротических форм синдрома диабетической стопы пациентов г. Красноярска за период 2010–2016 гг. Исследована в динамике микрофлора гнойно-некротических осложнений у 240 пациентов с синдромом диабетической стопы, ее антибиотикочувствительность, а также молекулярно-генетические  особенности метициллинрезистентных Staphylococcus aureus. Для изучения микрофлоры гнойных осложнений использован бактериологический метод. Антибиотикочувствительность определяли диско-диффузионным методом; чувствительность стафилококков к антибиотикам проводили методом скрининга, ПЦР,  методом серийных разведений в плотной среде в соответствии с международными рекомендациями СLSI, EUCAST. Для генотипирования и определения молекулярно-генетических особенностей — ПЦР, М-ПЦР,  секвенирование. Обработку результатов проводили с использованием компьютерной программы WHONET (ВОЗ). Уровень значимости p < 0,05. Микрофлора гнойно-некротических  форм синдрома диабетической стопы представлена грамотрицательными микроорганизмами  — на долю представителей семейства Enterobacteriaceae приходилось  34,4%,  неферментирующих  грамотрицательных  бактерий  — 19,1%;  грамположительными микроорганизмами — в 46,5% случаев, доля S. aureus — 18,4%. Микроорганизмы характеризовались полирезистентностью к антимикробным препаратам: доля БЛРС-продуцентов — 36,4%; доля МБЛ-продуцентов — 30,3%; доля MRSA — 36,4%. Доминирующим клоном MRSA среди пациентов с гнойно-некротическими формами синдрома диабетической стопы, госпитализированных в правобережный и левобережный стационары г. Красноярска являлся ST239/spa3(t037)/agr1/SCCmecIII.1.1.2(IIIA)/coaIV/tst+, характеризуюшийся высоким уровнем вирулентности  и  мультирезистентностью. Вторыми  по  значимости  генетическими  вариантами MRSA являлись ST8/spa1(t008)/agr1/SCCmecIV.3.1.1/CoaIII и ST12/spanew(t156)/agr1/SCCmecUT/coaIorVII, которые характеризовались устойчивостью к 1–2 группам антимикробных препаратов, помимо β-лактамов. Среди пациентов с гнойно-некротическими  формами синдрома диабетической стопы, госпитализированных в стационары г. Красноярска распространены в основном генетические варианты MRSA, соответствующие клонам, выявленным ранее от пациентов с другими нозологиями на данной территории. Установлено, что среди от пациентов с гнойно-некротическими формами синдрома диабетической стопы, госпитализированных как в правобережный, так и левобережный стационары г. Красноярска, выделяются изоляты MRSA, преимущественно относящиеся к одним и тем же генетическим вариантам. Длительная госпитализация пациентов с данной патологией, а также их последующая неоднократная госпитализация в другие стационары г. Красноярска, способствует переносу госпитальных штаммов из одного стационара в другой.

Об авторах

О. Е. Хохлова

ФГБОУ ВО Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого МЗ РФ

Автор, ответственный за переписку.
Email: khokhlovaol@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-2829-5117

Хохлова Ольга Евгеньевна - кандидат биологических наук, доцент микробиологии им. доц. Б.М. Зельмановича.

660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1.

Тел.: 8 (391) 220-13-61; 8 (908) 018-99-84 (моб.).

Россия

Я. Ивао

Международный медицинский образовательно-исследовательский центр (IMERC)

Email: indiansign_64@hotmail.com

Ивао Ясухиса - PhD, научный сотрудник лаборатории молекулярной бактериологии.

Ниигата.

Япония

В. В. Камшилова

КГБУЗ Красноярская межрайонная клиническая больница скорой медицинской помощи им. Н.С. Карповича

Email: kamshylova@mail.ru

Камшилова Вера Владимировна - кандидат биологических наук, врач-бактериолог.

Россия

О. В. Теплякова

ФГБОУ ВО Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого МЗ РФ; КГБУЗ Красноярская межрайонная клиническая больница № 7

Email: teplyakova-olga@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-0005-3316

Теплякова Ольга Валерьевна - кандидат медицинских наук, доцент кафедры общей хирургии им. проф. М.И. Гульмана ФГБОУ ВО КрасГМУ имени проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого МЗ РФ; врач-хирург КГБУЗ Красноярская межрайонная клиническая больница № 7.

660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1.

Россия

А. И. Мотова

КГБУЗ Красноярская межрайонная клиническая больница скорой медицинской помощи им. Н.С. Карповича

Email: tihotay@mail.ru

Мотова Анастасия Ивановна - врач-клинический фармаколог КГБУЗ Красноярская межрайонная клиническая больница скорой медицинской помощи им. Н.С. Карповича.

Россия

А. И. Дробушевская

КГБУЗ Красноярская межрайонная клиническая больница № 7

Email: annushkadoc@mail.ru
Дробушевская АннаИвановна - кандидат медицинских наук, врач-хирург. Россия

О. В. Перьянова

ФГБОУ ВО Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого МЗ РФ; Российско-Японский центр микробиологии, метагеномики и инфекционных заболеваний

Email: perianova@mail.ru

Перьянова Ольга Владимировна - кандидат биологических наук, заведующая кафедрой микробиологии им. доц. Б.М. Зельмановича ФГБОУ ВО КрасГМУимени проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого МЗ РФ; руководитель Российско-Японского центра микробиологии, метагеномики и инфекционных заболеваний.

660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1.

Россия

Ю. С. Винник

ФГБОУ ВО Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого МЗ РФ

Email: yuvinnik@yandex.ru

Винник Юрий Семенович - доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой общей хирургии им. проф. М.И. Гульмана, председатель диссертационного совета.

660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1.

Россия

Н. К. Поткина

ФГБОУ ВО Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого МЗ РФ; Российско-Японский центр микробиологии, метагеномики и инфекционных заболеваний

Email: potkinanad@mail.ru

Поткина Надежда Константиновна - научный сотрудник, ФГБОУ ВО КрасГМУ имени проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого МЗ РФ; научный сотрудник Российско-Японского центра микробиологии, метагеномики и инфекционных заболеваний.

660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1.

Россия

Д. Э. Здзитовецкий

ФГБОУ ВО Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого МЗ РФ; КГБУЗ Красноярская межрайонная клиническая больница № 7

Email: zdz64@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-2498-3844

Здзитовецкий Дмитрий Эдуардович - доктор медицинских наук, доцент, заведующий кафедрой и клиникой хирургических болезней им. проф. Ю.М. Лубенского ФГБОУ ВО КрасГМУ имени проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого МЗ РФ; врач-хирург КГБУЗ Красноярская межрайонная клиническая больница № 7.

660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1.

Россия

Т. Ямамото

Российско-Японский центр микробиологии, метагеномики и инфекционных заболеваний; Международный медицинский образовательно-исследовательский центр (IMERC)

Email: tatsuoy@imerc.jp

Ямамото Татсуо - PhD, профессор, куратор Российско-Японского центра микробиологии, метагеномики и инфекционных заболеваний; директор Международного медицинского образовательно-исследовательского центра (IMERC).

Ниигата.

Япония

Список литературы

  1. Бахарев И.В., Редькин Ю.А. Синдром диабетической стопы: диагностика, лечение, профилактика. Качество жизни // Медицина. 2003. № 1. С. 35–38.
  2. Гостев В.В., Калиногорская О.С., Попенко Л.Н., Черненькая Т.В., Науменко З.С., Ворошилова Т.М., Захарова Ю.А., Хох лова О.Е., Круглов А.Н., Ершова М.Г., Молчанова И.В., Сидоренко С.В. Антибиотикорезистентность метициллинрезистентных Staphylococcus aureus, циркулирующих в Российской Федерации // Антибиотики и химиотерапия. 2015. Т. 60, № 1–2. C. 3–10.
  3. Доброквашин С.В., Якупов Р.Р., Валеев А.З. Лечение больных с гнойно-некротическими осложнениями синдрома диабетической стопы // Акушерство. Гинекология. Эндокринология. 2011. Т. 54, № 6. С. 97–99.
  4. Митиш В.А., Пасхалова Ю.С., Ерошкин И.А., Галстян Г.Р., Блатун Л.А. Гнойно-некротические поражения при нейроишемической форме синдрома диабетической стопы // Хирургия. 2014. № 1. С. 48–53.
  5. Попова Т.Е., Шнайдер Н.А., Петрова М.М., Говорина Ю.Б., Николаева Т.Я. Диагностика нарушений микроциркуляции у пациентов с преимущественно сенсорным вариантом хронической воспалительной демиелинизирующей полиневропатии: пилотное исследование // Сибирское медицинское обозрение. 2015. № 1. С. 32–37.
  6. Привольнев В.В., Решедько Г.К., Савкин В.А., Кречикова О.И. Структура возбудителей и их антибиотикорезистентность при инфекциях нижних конечностей у больных сахарным диабетом // Клиническая микробиология и антимикробная химитерапия. 2009. Т. 11, № 1. С. 86–89.
  7. Рундо А.И. Современные аспекты этиологии и патогенеза синдрома диабетической стопы // Новости хирургии. 2015. Т. 23, № 1. С. 97–104.
  8. Токмакова А.Ю. Современная концепция диагностики и лечения хронических ран у больных с синдромом диабетической стопы // Сахарный диабет. 2009. № 1. С. 14-17.
  9. Фенотипическое определение Enterobacter – продуцентов β-лактамаз расширенного спектра: обзор и руководство по проведению испытаний. Европейское общество к линической микробиологии и инфекционных болезней // К линическая микробиология и инфекционные заболевания. 2008. Т. 14 (Прил. 1). С. 90–103.
  10. Bal A.M., Coombs G.W., Holden M.T., Lindsay J.A., Nimmo G.R., Tattevin P., Skov R.L. Genomic insights into the emergence and spread of international clones of healthcare-, community- and livestock-associated meticillin-resistant Staphylococcus aureus: Blurring of the traditional definitions. J. Glob. Antimicrob. Resist., 2016, vol. 95–101, pp. 8–34. doi: 10.1016/j.jgar.2016.04.004
  11. Сavanagh P., Lipsky B.A., Bradbury A.W., Botek G. Treatment for diabetic foot ulcers. Lancet, 2005, vol. 366, pp. 1725–1735. doi: 10.1016/S0140-6736(05)67699-4
  12. Drieux L., Brossier F., Sougakoff W., Jarlier V. Phenotypic detection of extended-spectrum β-lactamase production in Enterobacteriaceae: review and bench guide. Clin. Microbiol. Infect., 2008, vol. 14 (suppl. 1), pp. 90 –103. doi: 10.1111/j.1469-0691.2007.01846.x
  13. Echaniz-Aviles G., Velazquez-Meza M.E., Vazquez-Larios Mdel R., Soto-Noguerón A., Hernández-Dueñas A.M. Diabetic foot infection caused by community-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus (USA300). J. Diabetes, 2015, vol. 7 (6), pp. 891–892. doi: 10.1111/1753-0407.12324
  14. Gostev V., Kruglov A., Kalinogorskaya O., Dmitrenko O., Khokhlova O., Yamamoto T., Lobzin Y., Ryabchenko I., Sidorenko S. Molecular epidemiology and antibiotic resistance of methicillin-resistant Staphylococcus aureus circulating in the Russian Federation. Infect. Genet. Evol., 2017, vol. 53, pp. 189–194. doi: 10.1016/j.meegid.2017.06.006
  15. Hiramatsu K., Ito T., Tsubakishita S., Sasaki T., Takeuchi F., Morimoto Y., Katayama Y., Matsuo M., Kuwahara-Arai K., Hishinuma T., Baba T. Genomic basis for methicillin resistance in Staphylococcus aureus. Infect. Chemother., 2013, vol. 45, pp. 117–136. doi: 10.3947/ic.2013.45.2.117
  16. International working group on the classification of staphylococcal cassette chromosome elements (IWG-SCC). Classification of staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec): guidelines for reporting novel SCCmec elements. Agents Chemother., 2009, vol. 53, pp. 4961–4967. doi: 10.1128/AAC.00579-09
  17. Jeffcoate W.J., Harding K.G. Diabetic foot ulcers. Lancet, 2003, vol. 361, no. 9368, pp. 1545–1551. doi: 10.1016/S0140-6736(03)13169-8
  18. Kado C.I., Liu S.T. Rapid procedure for detection and isolation of large and small plasmids. J. Bacteriol., 1981, vol. 145, pp. 1365–1373.
  19. Khokhlova O.E., Hung W.C, Wan T.W. Iwao Y., Takano T., Higuchi W., Yachenko S.V., Teplyakova O.V., Kamshilova V.V., Kotlovsky Y.V., Nishiyama A., Reva I.V., Sidorenko S.V., Peryanova O.V., Reva G.V., Teng L.J., Salmina A.B., Yamamoto T. Healthcare- and community-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and fatal pneumonia with pediatric deaths in Krasnoyarsk, Siberian Russia: unique MRSA’s multiple virulence factors, genome, and stepwise evolution. PLoS One, 2015, vol. 1, pp. 1–30. doi: 10.1371/journal.pone.0128017
  20. Kondo Y., Ito T., Ma X.X., Watanabe S., Kreiswirth B.N., Etienne J., Hiramatsu K. Combination of multiplex PCRs for staphylococcal cassette chromosome mec type assignment: rapid identification system for mec, ccr, and major differences in junkyard regions. Antimicrob. Agents Chemother., 2007, vol. 51, pp. 264–274. doi: 10.1128/AAC.00165-06
  21. Lindsay J.A. Genomic variation and evolution of Staphylococcus aureus. Int. J. Med. Microbiol., 2010, vol. 300, pp. 98–103. doi: 10.1016/j.ijmm.2009.08.013
  22. Morbach S., Müller E., Reike H., Risse A., Rümenapf G., Spraul M. Diabetic foot syndrome. Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes, 2014, vol. 122, no. 7, pp. 416–424. doi: 10.1055/s-0034-1366455
  23. Nelson A., Wright-Hughes A., Backhouse M.R., Lipsky B.A., Nixon J., Bhogal M.S., Reynolds C., Brown S. CODIFI (Concordance in Diabetic Foot Ulcer Infection): a crosssectional study of wound swab versus tissue sampling in infected diabetic foot ulcers in England. BMJ Open, 2018, vol. 8 (1): e019437, pp. 1–12. doi: 10.1136/bmjopen-2017-019437
  24. Post V., Wahl P., Uckay I., Ochsner P., Zimmerli W., Corvec S., Loiez C., Richards R.G., Moriarty T.F. Phenotypic and genotypic characterisation of Staphylococcus aureus causing musculoskeletal infections. Int. J. Med. Microbiol., 2014, vol. 304 (5–6), pp. 565–576. doi: 10.1016/j.ijmm.2014.03.003
  25. Prevost G., Jaulhac B., Piemont Y. DNA fingerprinting by pulsed-field gel electrophoresis is more effective than ribotyping in distinguishing among methicillin-resistant Staphylococcus aureus isolates. J. Clin. Microbiol, 1992, vol. 30, pp. 967–973.
  26. Reveles K.R., Duhon B.M., Moore R.J., Hand E.O., Howell C.K. Epidemiology of methicillin-resistant Staphylococcus aureus diabetic foot infections in a large academic hospital: implications for antimicrobial stewardship. PLoS One, 2016, vol. 24, no. 11 (8): e0161658. doi: 10.1371/journal.pone.0161658
  27. Sorensen A.I., Toft N., Boklund A., Espinosa-Gongora C., Græsbøll K., Larsen J., Halasa T. A mechanistic model for spread of livestock-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus (LA-MRSA) within a pig herd. PLoS One, 2017, vol. 12, no. 11: e0188429, pp. 1–18. doi: 10.1371/journal.pone.0188429
  28. Takano T., Hung W.C., Shibuya M., Higuchi W., Iwao Y., Nishiyama A., Reva I., Khokhlova O.E., Yabe S., Ozaki K., Takano M., Yamamoto T. A new local variant (ST764) of the globally disseminated ST5 lineage of hospital-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) carrying the virulence determinants of community-associated MRSA. Antimicrob. Agents Chemother., 2013, vol. 57, pp. 1589–1595. doi: 10.1128/AAC.01147-12
  29. Tenover F.C., Arbeit R., Archer G., Biddle J., Byrne S., Goering R., Hancock G., Hébert G.A., Hill B., Hollis R. Comparison of traditional and molecular methods of typing isolates of Staphylococcus aureus. J. Clin. Microbiol., 1994, vol. 32, pp. 407–415.
  30. Van der Zwaluw K., de Haan A., Pluister G.N., Bootsma H.J., de Neeling A.J., Schouls L.M. The carbapenem inactivation method (CIM), a simple and low-cost alternative for the Carba NP test to assess phenotypic carbapenemase activity in gram-negative rods. PLoS One, 2015, vol. 10, no. 3: e0123690, pp. 1–13. doi: 10.1371/journal.pone.0123690

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Хохлова О.Е., Ивао Я., Камшилова В.В., Теплякова О.В., Мотова А.И., Дробушевская А.И., Перьянова О.В., Винник Ю.С., Поткина Н.К., Здзитовецкий Д.Э., Ямамото Т., 2019

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС 77 - 64788 от 02.02.2016.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах