Оценка метода мультиплексного выявления антител к возбудителям инфекционных заболеваний

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Первичное обследование групп населения с повышенным риском заражения инфекционными  заболеваниями (ИЗ) предполагает выполнение ряда анализов с использованием моноспецифических диагностических систем и представляет собой длительную, трудоемкую и дорогостоящую процедуру. Ранее нами разработан мультиплексный тест, позволяющий оперативно и недорого проводить комплексное первичное тестирование. Создан набор, позволяющий одновременно выявлять в препаратах крови антитела к 6 возбудителям ИЗ: вирусу иммунодефицита человека, вирусам гепатитов B и C, цитомегаловирусу, Treponema pallidum и Toxoplasma gondii. Набор основан на мультиплексном дот-иммуноанализе на плоских белковых матрицах (иммуночипах) с использованием конъюгатов коллоидного золота и серебряного проявления. Он позволяет выполнять комплексный анализ при комнатной температуре в течение 70 мин и не требует высокой квалификации  оператора. В настоящей статье представлены результаты лабораторных испытаний  экспериментального образца мультиплексного набора в сравнении с наборами для иммуноферментного анализа (ИФА) пяти российских производителей с использованием массива из 240 образцов препаратов крови, включающих 200 клинических проб сывороток (плазмы) крови от больных ИЗ и 40 образцов плазмы доноров. Показано, что мультиплексный тест обладает чувствительностью и специфичностью анализа не менее 95%, а оптические сигналы дот-анализа хорошо коррелируют с показателями оптической плотности, полученными с использованием коммерческих наборов для ИФА, и позволяют проводить полуколичественную оценку содержания специфических антител в образце. При этом мультиплексный дот-анализ более оперативен и экономичен, по сравнению с ИФА и может выполняться во внелабораторных условиях. Набор для мультиплексного дот-иммуноанализа антител может обеспечить комплексный подход к диагностике ИЗ, значительно облегчить проведение первичного тестирования, сделать его более оперативным и доступным для пациентов.

Об авторах

А. Г. Полтавченко

ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор»

Email: poltav@vector.nsc.ru

Полтавченко Александр Георгиевич - доктор биологических наук, заведующий лабораторией иммунохимической диагностики.

630559, Новосибирская обл., п. Кольцово.

Тел./факс: 8 (383) 336-74-09 (служебн.); 8 (913) 735-91-74 (моб.).

SPIN-код: 9153-2935

Россия

О. В. Нечитайло

ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор»

Email: nechitaylo_ov@vector.nsc.ru

Нечитайло Олег Вячеславович - стажер-исследователь лаборатории иммунохимической диагностики.

630559, Новосибирская обл., п. Кольцово.

Россия

П. В. Филатов

ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор»

Email: medic@sibmail.ru
ORCID iD: 0000-0001-7763-3808

Филатов Павел Владимирович - кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории иммунохимической диагностики.

630559, Новосибирская обл., п. Кольцово.

РИНЦ - 781254

SPIN-код: 2055-2826

Researcher ID: O-8653-2014

Scopus Author ID: 54882522300

Россия

А. В. Ерш

ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор»

Автор, ответственный за переписку.
Email: ersh_av@vector.nsc.ru

Ерш Анна Васильевна - кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории иммунохимической диагностики.

630559, Новосибирская обл., п. Кольцово.

Россия

Список литературы

  1. Ляужева Ф.М., Тленкопачев Р.С., Жибурт Е.Б. Выбраковка доноров по маркерам инфекций в Кабардино-Балкарской Республике // Трансфузиология. 2014. № 4. С. 32–36.
  2. Полтавченко А.Г., Ерш А.В., Пьянков С.А., Никонов А.М., Волков Г.Н, Кривенчук Н.А. Многопрофильная серодиагностика инфекционных заболеваний. Инструментальный учет результатов анализа // Биотехнология. 2013. № 4. С. 74–82.
  3. Burgess S.T.G., Kenyon F., O’Looney N., Ross A.J., Kwan M.C., Beattie J.S., Petrik J., Ghazal P., Campbell J.C. A multiplexed protein microarray for the simultaneous serodiagnosis of human immunodeficiency virus/hepatitis C virus infection and typing of whole blood. Anal. Biochem., 2008, vol. 382, pp. 9–15. doi: 10.1016/j.ab.2008.07.017
  4. Corstjens P.L.A.M., Chen Z., Zuiderwijk M., Bau H.H., Abrams W.R., Malamud D., Niedbala R.S., Tanke H.J. Rapid assay format for multiplex detection of humoral immune responses to infectious disease pathogens (HIV, HCV, and TB). Ann. N.Y. Acad. Sci., 2007, vol. 1098, pp. 437–445. doi: 0.1196/annals.1384.016
  5. Ellington A.A., Kullo I.J., Bailey K.R., Klee G.G. Antibody-based protein multiplex platforms: technical and operational challenges. Clin. Chem., 2010, vol. 56, pp. 186–194. doi: 10.1373/clinchem.2009.127514
  6. Hartmann M., Roeraade J., Stoll D., Templin M.F., Joos T.O. Protein microarrays for diagnostic assays. Anal. Bioanal. Chem., 2009, vol. 393, pp. 1407–1416. doi: 10.1007/s00216-008-2379-z
  7. Len O., Garzoni C., Lumbreras C., Molina I., Meije Y., Pahissa A., Grossi P. Recommendations for screening of donor and reci- pient prior to solid organ transplantation and to minimize transmission of donor-derived infections. Clin. Microbiol. Infect., 2014, vol. 20, iss. 7, pp. 10 –18. doi: 10.1111/1469-0691.12557
  8. Lochhead M.J., Todorof K., Delaney M., Ives J.T., Greef C., Moll K., Rowley K., Vogel K., Myatt C., Zhang X.Q., Logan C., Benson C., Reed S., Schooley R.T. Rapid multiplexed immunoassay for simultaneous serodiagnosis of HIV-1 and coinfections. J. Clin. Microbiol., 2011, vol. 49, pp. 3584–3590. doi: 10.1128/JCM.00970-11
  9. Myyrylainen T., Talha S.M., Swaminathan S., Vainionpaa R., Soukka T., Khanna N., Pettersson K. Simultaneous detection of human immunodeficiency virus 1 and hepatitis B virus infections using a dual-label time-resolved f luorometric assay. J. Nanobiotechnol., 2010, vol. 8, pp. 27–32. doi: 10.1186/1477-3155-8-27
  10. Petrik J. Diagnostic applications of microarrays. Transfus. Med., 2006, vol. 16, pp. 233–247. doi: 10.1111/j.1365-148.2006.00673.x
  11. Poltavchenko A.G., Nechitaylo O.V., Filatov P.V., Ersh A.V., Gureyev V.N. Multiplex method for initial complex testing of antibodies to blood transmitted diseases agents. J. Virol. Meth., 2016, vol. 236, pp. 231–236. doi: 10.1016/j.jviromet.2016.08.003
  12. Poltavchenko A.G., Zaitsev B.N., Ersh A.V., Korneev D.V., Taranov O.S., Filatov P.V., Nechitaylo O.V. The selection and optimization of the detection system for self-contained multiplexed dot-immunoassay. J. Immunoassay Immunochem., 2016, vol. 37, pp. 540 –554. doi: 10.1080/15321819.2016.1174134
  13. Talha S.M., Saviranta P., Hattara L., Vuorinen T., Hytönen J., Khanna N., Pettersson K. Array-in-well platform-based multiplex assay for the simultaneous detection of anti-HIV- and treponemal-antibodies, and hepatitis B surface antigen. J. Immunol. Meth., 2016, vol. 429, pp. 21–27. doi: 10.1016/j.jim.2015.12.007
  14. Tighe P.J., Ryder R.R., Todd I., Fairclough L.C. ELISA in the multiplex era: potentials and pitfalls. Proteomics Clin. Appl., 2015, vol. 9, pp. 406–422. doi: 10.1016/j.jim.2015.12.007
  15. Wong J., Sibani S., Lokko N.N., LaBaer J., Anderson K.S. Rapid detection of antibodies in sera using multiplexed self-assembling bead arrays. J. Immunol. Meth., 2009, vol. 350, pp. 171–182. doi: 10.1016/j.jim.2009.08.013

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© Полтавченко А.Г., Нечитайло О.В., Филатов П.В., Ерш А.В., 2019

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС 77 - 64788 от 02.02.2016.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах