СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ МЕТОДОВ ИДЕНТИФИКАЦИИ НЕТУБЕРКУЛЕЗНЫХ МИКОБАКТЕРИЙ, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ КЛИНИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА
- Авторы: Лямин А.В.1, Исматуллин Д.Д.1, Жестков А.В.1, Ковалев А.М.2, Барышникова Л.А.2, Неняйкин С.С.1
-
Учреждения:
- Самарский государственный медицинский университет МЗ РФ
- Самарский областной клинический противотуберкулезный диспансер им. Н.В. Постникова
- Выпуск: Том 7, № 3 (2017)
- Страницы: 285-291
- Раздел: ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
- Дата подачи: 30.09.2017
- Дата принятия к публикации: 30.09.2017
- Дата публикации: 30.09.2017
- URL: https://iimmun.ru/iimm/article/view/561
- DOI: https://doi.org/10.15789/2220-7619-2017-3-285-291
- ID: 561
Цитировать
Полный текст
Аннотация
В последнее время наблюдается значительный рост заболеваемости микобактериозами, который обуслеовлен увеличением доли иммуносупрессированных пациентов, наличием у них различных коморбидных состояний, а также совершенствованием методов диагностики. Выбор наиболее точного метода идентификации является крайне важным в определении тактики лечения пациентов.
Цель исследования — провести сравнительный анализ современных методов идентификации НТМБ, выделенных из клинического материала в 2015 г. в Самарской области. В работе проводилась идентификация 78 штаммов микроорганизмов. Лабораторная диагностика проводилась с использованием метода ДНК-гибридизации и методом MALDIToF масс-спектрометрии.
Результаты. При идентификации микроорганизмов с использованием MALDIToF масс-спектрометрии было выделено 16 штаммов (20,5%) M. kansasii; по 11 штаммов (14,1%) M. avium и M. fortuitum; 9 штаммов (11,5%) M. gordonae; по 3 штамма (3,8%) M. peregrinum, M. szulgai, M. chimera intracellulare group, по 2 штамма (2,6%) M. abscessus, M. septicum, M. paragordonae, M. senegalence, по 1 штамму (1,3%) M. chelonae, M. frederiksbergense, M. monacense, M. lentiflavum. При использовании метода масс-спектрометрии было идентифицировано 15 видов НТМБ, методом ДНК-гибридизации — 9 видов. Полное совпадение результатов идентификации было отмечено всего у 45 (57,7%) штаммов, несовпадающие результаты выявлены у 16 штаммов (20,5%). Наиболее часто при использовании метода ДНК-гибридизации несовпадение было выявлено у медленнорастущих культур (9 штаммов) с преобладанием микроорганизмов, идентифицированных как M. gordonae. Среди представителей быстрорастущих НТМБ было выявлено 7 расхождений в идентификации, более часто среди представителей групп M. fortuitum и M. peregrinum. Особое внимание стоит обратить на идентификацию штамма M. kansasii молекулярно-генетическим методом, который масс-спектрометрией был определен как M. bovis. Обе культуры M. tuberculosis complex, которые были идентифицированы при помощи MALDI-ToF спектрометрии, ДНК-гибридизацией не были определены до вида. 17 (21,8%) штаммов микроорганизмов, которые не были идентифицированы при использовании метода ДНК-гибридизации, идентифицированы с помощью спектрометрии, включая медленнорастущие микроорганизмы, не относящиеся к микобактериям 7 штаммов (9,0%): Gordonia rubriperticta, Nocardia forcinica, Tsukumurella spp., Rhodotorula mucilaginosa. Точная видовая идентификация НТМБ является основополагающей для определения тактики лечения пациентов с микобактериозами. Возможности идентификации нетуберкулезных микобактерий с использованием метода ДНК-гибридизации являются недостаточными на сегодняшний день. Внедрение новых методов, таких как MALDI-ToF спектрометрия, позволяет идентифицировать большее количество видов нетуберкулезных микобактерий, а также другие виды медленнорастущих микроорганизмов, имеющих сходства с микобактериями по культуральным и морфологическим свойствам, что значительно повышает диагностические возможности лабораторий.
Об авторах
А. В. Лямин
Самарский государственный медицинский университет МЗ РФ
Автор, ответственный за переписку.
Email: avlyamin@rambler.ru
Лямин Артем Викторович кандидат медицинских наук, доцент кафедры общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии.
443079, Самара, ул. Гагарина, 18. Тел.: 8 (846) 260-33-61
РоссияД. Д. Исматуллин
Самарский государственный медицинский университет МЗ РФ
Email: fake@neicon.ru
Студент 6 курса медико-профилактического факультета
А. В. Жестков
Самарский государственный медицинский университет МЗ РФ
Email: fake@neicon.ru
Доктор медицинских наук, профессор, зав. кафедрой общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии
А. М. Ковалев
Самарский областной клинический противотуберкулезный диспансер им. Н.В. Постникова
Email: fake@neicon.ru
Кандидат биологических наук, биолог бактериологической лаборатории
Л. А. Барышникова
Самарский областной клинический противотуберкулезный диспансер им. Н.В. Постникова
Email: fake@neicon.ru
Доктор медицинских наук, заместитель главного врача по медицинской части
С. С. Неняйкин
Самарский государственный медицинский университет МЗ РФ
Email: fake@neicon.ru
Заведующий отделением инфекционной безопасности и гигиены Клиник
Список литературы
- Бердников, Р.Б., Гринберг Л.М., Евсеев А.Ю. Летальный случай генерализованного микобактериоза у больного с терминальной стадией ВИЧ-инфекции // Туберкулез и болезни легких. 2016. Т. 94, № 4. С. 57–62. [Berdnikov R.B., Grinberg L.M., Evseev A.Yu. The lethal case of generalized mycobacteriosis in the patient at the terminal stage of HIV-infection. Tuberkulez i bolezni legkikh = Tuberculosis and Lung Disease, 2016, no. 4, pp. 47–62. doi: 10.21292/2075-1230-2016-94-4-57-64 (In Russ.)]
- Майская, М.Ю., Оттен Т.Ф., Ариэль Б.М. Формы легочного и генерализованного микобактериоза при ВИЧ-инфекции в морфологическом освещении // Туберкулез и социально-значимые заболевания. 2014. № 1–2. С. 21–25. [Maiskaya M.Yu., Otten T.F., Ariel B.M. Pulmonary and generalized forms of mycobacteriosis in HIV infection in the morphological aspect. Tuberkulez i sotsial’no-znachimye zabolevaniya = Tuberculosis and Socially Significant Diseases, 2014, no. 1–2, pp. 21–25 (In Russ.)]
- Михайловский, А.М., Чуркин С.А., Пашкова Н.А., Лепеха Л.Н. Первый случай посмертной диагностики генерализованного нетуберкулезного микобактериоза у больной на поздней стадии ВИЧ-инфекции в Оренбургской области // Вестник современной клинической медицины. 2016. Т. 9, № 5. С. 88–93. [Mihajlovskij A.M., Churkin S.A., Pashkova N.A., Lepeha L.N. The first case of post-mortem diagnosis of generalized non-tuberculosis mycobacteriosis in a patient with advanced HIV infection in the Orenburg region. Vestnik sovremennoi klinicheskoi meditsiny = Herald of Modern Clinical Medicine, 2016, no. 5, pp. 88–93. doi: 10.20969/VSKM.2016.9(5).88-93 (In Russ.)]
- Оттен Т.Ф., Фоменкова Н.В., Майская М.Ю. Генерализованный микобактериоз у пациента с ВИЧ-инфекцией на стадии СПИДа // Туберкулез и болезни легких. 2015. № 8. С. 57–62. [Otten T.F., Fomenkova N.V., Majskaja M.Ju. Generalised mycobacteriosis in a patient with HIV infection with AIDS. Tuberkulez i bolezni legkikh = Tuberculosis and Lung Disease, 2015, no. 8, pp. 57–62 (In Russ.)]
- Чучалин А.Г. Респираторная медицина. Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2007. Т. 1. 800 c. [Chuchalin A.G. Respiratornaya meditsina [Respiratory medicine]. Moscow: GEOTAR-Media, 2007, vol. 1, 800 p.
- Daley C.L., Griffith D.E. Pulmonary non-tuberculous mycobacterial infections. Int. J. Tuberc. Lung. Dis., 2010, vol. 14, no. 6, pp. 665–671. doi: 10.4046/trd.2014.77.1.1
- Jorgensen J.H., Carroll K.C., Funke G., Landry M.L., Richter S.S., Warnock D.W. Manual of Clinical Microbiology, 11th ed., vol. 1, pp. 536–570. doi: 10.1128/9781555817381
- Hall L., Doerr K.A., Wohlfiel S.L., Roberts G.D. Evaluation of the MicroSeq system for identification of mycobacteria by 16S ribosomal DNA sequencing and its integration into a routine clinical mycobacteriology laboratory. J. Clin. Microbiol., 2003. no. 41, pp. 1447–1453.
- Lee A.S., Jelfs P., Sintchenko V., Gilbert G.L. Identification of non-tuberculous mycobacteria: utility of the GenoType Mycobacterium CM/AS assay compared with HPLC and 16S rRNA gene sequencing. J. Med Microbiol., 2009, no. 58, pp. 900 – 904. doi: 10.1099/jmm.0.007484-0
- Springer B., Stockman L., Tescher K., Roberts G.D., Böttger E.C. Two-laboratory collaborative study on identification of mycobacteria: molecular versus phenotypic method. J. Clin. Microbiol., 1996, no. 34, pp. 296–303.
- Tortoli E. Impact of genotypic studies on mycobacterial taxonomy: the new mycobacteria of the 1990’s. J. Clin. Microbiol. Rev., 2003, no. 2, pp. 319–354. doi: 10.1128/CMR.16.2.319-354.2003
Дополнительные файлы
