ИССЛЕДОВАНИЕ ФЕНОТИПА ЛЕЙКОЦИТОВ КРОВИ У БОЛЬНЫХ ОНИХОМИКОЗАМИ С ПОМОЩЬЮ МЕТОДА HEMATOFLOW

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Целью исследования явилась оценка информативности метода Hematoflow при определении патогенетической значимости нарушения состояния клеточных реакций врожденного и адаптивного иммунитета, а также решения вопроса о назначении иммунотропного лечения больным онихомикозами. Обследовано 42 больных с онихомикозами стоп и кистей/стоп в возрасте 20–45 лет до назначения им системной антифунгальной терапии. Диагноз онихомикоза был подтвержден микроскопическим исследованием фрагментов поврежденной ногтевой пластинки. Рост культуры гриба на специальных средах отмечался у 64% обследованных. В качестве контроля обследовано 24 практически здоровых людей аналогичного возрастного диапазона. Исследование фенотипа лейкоцитов крови осуществляли по двухплатформенной технологии на гематологическом анализаторе и проточном цитометре с использованием набора антител Cytodiff: CD36-FITC, CD2-PE, CD294(CRTH2)-PE, CD19-ECD, CD16-PC5 и CD45-PC7. Оценка фенотипического состава лейкоцитов с помощью метода Hematoflow позволила установить у больных онихомикозами нарушения состояния клеточного врожденного и адаптивного иммунитета. Обнаружены незначительные изменения в популяционном составе гранулярных лейкоцитов в периферической крови больных, выражающиеся в увеличении содержания юных и сегментоядерных гранулоцитов. На фоне моноцитопении у больных онихомикозами повышается содержание «классических» моноцитов и снижается уровень «неклассических» моноцитов. Изменения в субпопуляционном составе моноцитов крови выявляются у больных с продолжительностью инфекции до 3-х лет и сохраняются в течение всего заболевания. Наиболее выраженные изменения у больных онихомикозами обнаружены со стороны показателей адаптивного иммунитета. Лимфопения у данных больных реализуется за счет снижения количества незрелых и зрелых В-клеток, но при повышении содержания Т-лимфоцитов. Причем если содержание незрелых В-клеток снижается уже у больных с продолжительностью инфекции до 3-х лет, то изменение количества зрелых Ти В-лимфоцитов выявляется при продолжительности заболевания 3–10 и более 10 лет. Данные изменения в содержании Ти В-лимфоцитов отражают иммунопатогенетические процессы и определяют значимость Ти В-клеточного иммунитета при онихомикозах. В целом, метод Hematoflow является информативным в оценке нарушения состояния клеточного врожденного и адаптивного иммунитета. Он позволяет оценивать степень тяжести иммунопатологического процесса, механизм и уровень повреждения иммунной системы, можно рекомендовать его применение для персонифицированного подхода к назначению иммунотропного лечения. 

Об авторах

А. А. Савченко

ФГБНУ НИИ медицинских проблем Севера, г. Красноярск, Россия

Автор, ответственный за переписку.
Email: fake@neicon.ru

д.м.н., профессор, руководитель лаборатории молекулярно-клеточной физиологии и патологии ФГБНУ НИИ медицинских проблем Севера, г. Красноярск, Россия; 

Россия

А. Г. Борисов

ФГБНУ НИИ медицинских проблем Севера, г. Красноярск, Россия

Email: fake@neicon.ru

к.м.н., ведущий научный сотрудник лаборатории молекулярно-клеточной физиологии и патологии ФГБНУ НИИ медицинских проблем Севера, г. Красноярск, Россия;

Россия

Е. Н. Анисимова

ГБОУ ВПО Красноярский государственный медицинский университет им. профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого МЗ РФ, г. Красноярск, Россия

Email: fake@neicon.ru

к.м.н., зав. кафедрой ГБОУ ВПО Красноярский государственный медицинский университет им. профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого МЗ РФ, г. Красноярск, Россия

Россия

В. Д. Беленюк

ФГБНУ НИИ медицинских проблем Севера, г. Красноярск, Россия

Email: fake@neicon.ru

аспирант ФГБНУ НИИ медицинских проблем Севера, г. Красноярск, Россия

Россия

И. В. Кудрявцев

ФГБНУ Институт экспериментальной медицины, Санкт-Петербург, Россия
ФГАОУ ВПО Дальневосточный федеральный университет, г. Владивосток, Россия

Email: fake@neicon.ru

к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории общей иммунологии ФГБУ НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН, Санкт-Петербург; старший научный сотрудник кафедры фундаментальной медицины ФГАОУ ВПО Дальневосточный федеральный университет, г. Владивосток, Россия;

Россия

И. В. Решетников

ГБОУ ВПО Южно-Уральский государственный медицинский университет МЗ РФ, г. Челябинск, Россия

Email: fake@neicon.ru

биолог иммунологической лаборатории ГБОУ ВПО Южно-Уральский государственный медицинский университет МЗ РФ, г. Челябинск, Россия;

Россия

С. В. Квятковская

ГБОУ ВПО Южно-Уральский государственный медицинский университет МЗ РФ, г. Челябинск, Россия

Email: fake@neicon.ru

к.м.н., зав. лабораторией ГБОУ ВПО ЮжноУральский государственный медицинский университет МЗ РФ, г. Челябинск, Россия

Россия

В. Э. Цейликман

ГБОУ ВПО Южно-Уральский государственный медицинский университет МЗ РФ, г. Челябинск, Россия

Email: fake@neicon.ru

д.б.н., профессор, зав. кафедрой ГБОУ ВПО Южно-Уральский государственный медицинский университет МЗ РФ, г. Челябинск, Россия

Россия

А. Н. Зорин

КГБУЗ Красноярский краевой кожно-венерологический диспансер No 1, г. Красноярск, Россия

Email: fake@neicon.ru

клинический миколог КГБУЗ Красноярский краевой кожно-венерологический диспансер No 1, г. Красноярск, Россия

Россия

Список литературы

  1. Борисов А.Г. Клиническая характеристика нарушения функции иммунной системы // Медицинская иммунология. 2013. Т. 15, № 1. С. 45–50. [Borisov A.G. Clinical characteristics of the dysfunction of the immune system. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology (Russia), 2013, vol. 15, no. 1, pp. 45–50. doi: 10.15789/1563-0625-2013-1-45-50 (In Russ.)]
  2. Борисов А.Г., Савченко А.А., Смирнова С.В. К вопросу о классификации нарушений функционального состояния иммунной системы // Сибирский медицинский журнал. 2008. Т. 23, № 3. С.13–18. [Borisov A.G., Savchenko A.A., Smirnova S.V. On the classification of violations of the functional state of the immune system. Sibirskii meditsinskii zhurnal = Siberian Medical Journal, vol. 23, no. 3, pp. 13–18. (In Russ.)]
  3. Васенова В.Ю., Пичугин А.В., Бутов Ю.С, Атауллаханов Р.И. Влияние комплексной терапии онихомикоза на клинико-иммунологические параметры. Cообщение 3 // Российский журнал кожных и венерических болезней. 2008. № 2. С. 48–51. [Vasenova V.Ju., Pichugin A.V., Butov Ju.S., Ataullahanov R.I. Influence of complex therapy for onychomycosis clinical and immunological parameters. Message 3. Rossiiskii zhurnal kozhnykh i venericheskikh boleznei = Russian Journal of Skin and Venereal Diseases, 2008, no. 2, pp. 48–51. (In Russ.)]
  4. Васенова В.Ю., Атауллаханов Р.И., Пичугин А.В., Бутов Ю.С. Особенности иммунного статуса больных онихомикозом. Сообщение 1 // Российский журнал кожных и венерических болезней. 2007. № 4. С. 63–66. [Vasenova V.Ju., Ataullahanov R.I., Pichugin A.V., Butov Ju.S. Features of the immune status of patients with onychomycosis. Message 1. Rossiiskii zhurnal kozhnykh i venericheskikh boleznei = Russian Journal of Skin and Venereal Diseases, 2007, no. 4, pp. 63–66. (In Russ.)]
  5. Головкин А.С., Матвеева В.Г., Кудрявцев И.В., Григорьев Е.В., Великанова Е.А., Байракова Ю.В. Субпопуляции моноцитов крови при неосложненном течении периоперационного периода коронарного шунтирования // Медицинская иммунология. 2012. Т. 14, № 4–5. С. 305–312. [Golovkin A.S., Matveeva V.G., Kudryavtsev I.V., Grigor’ev E.V., Velikanova E.A., Bajrakova Ju.V. Blood monocyte subpopulations during uncomplicated coronary artery bypass surgery. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology (Russia), 2012, vol. 14, no. 4–5, pp. 305–312. doi: 10.15789/1563-0625-2012-4-5-305-312 (In Russ.)]
  6. Зурочка А.В., Хайдуков С.В., Кудрявцев И.В., Черешнев В.А. Проточная цитометрия в медицине и биологии. Екатеринбург: Редакционно-издательский отдел Уральского отделения РАН, 2013. 552 с. [Zurochka A.V., Hajdukov S.V., Kudryavtsev I.V., Chereshnev V.A. Protochnaya tsitometriya v meditsine i biologii [Flow cytometry in medicine and biology]. Ekaterinburg: Publishing department of the Ural Branch of the Russian Academy of Sciences, 2013. 552 p.]
  7. Климко Н.Н., Козлова Я.И., Хостелиди С.Н., Шадривова О.В., Борзова Ю.В., Васильева Н.В. Распространенность тяжелых и хронических микотических заболеваний в Российской Федерации по модели Life program // Проблемы медицинской микологии. 2014. Т. 16, № 1. С. 3–8. [Klimko N.N., Kozlova Ja.I., Hostelidi S.N., Shadrivova O.V., Borzova Ju.V., Vasil’eva N.V. The incidence of severe and chronic mycotic diseases in the Russian Federation on the model of Life program. Problemy meditsinskoi mikologii = Problems of Medical Mycology, 2014, vol. 16, no. 1, pp. 3–8. (In Russ.)]
  8. Савченко А.А., Борисов А.Г., Модестов А.А., Мошев А.В., Кудрявцев И.В., Тоначева О.Г., Кощеев В.Н. Фенотипический состав и хемилюминесцентная активность моноцитов у больных почечноклеточным раком // Медицинская иммунология. 2015. Т. 17, № 2. С. 141–150. [Savchenko A.A., Borisov A.G., Modestov A.A., Moshev A.V., Kudryavtsev I.V., Tonacheva O.G., Koshheev V.N. The phenotypic composition and chemiluminescent activity of monocytes in patients with renal cell cancer. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology (Russia), 2015, vol. 17, no. 2, pp. 141–150. doi: 10.15789/1563-0625-2015-2-141-150 (In Russ.)]
  9. Савченко А.А., Модестов А.А., Мошев А.В., Тоначева О.Г., Борисов А.Г. Цитометрический анализ NKи NKT-клеток у больных почечноклеточным раком // Российский иммунологический журнал. 2014. Т. 8 (17), № 4. C. 1012–1018. [Savchenko A.A., Modestov A.A., Moshev A.V., Tonacheva O.G., Borisov A.G. The cytometric analysis NKand NKT-cells in patients with renal cell cancer. Rossiiskii immunologicheskii zhurnal = Russian Journal of Immunology, 2014, vol. 8 (17), no. 4, pp. 1012–1018. (In Russ.)]
  10. Сергеев Ю.В., Касихина Е.И. Онихомикозы: современные подходы к лечению // Вестник дерматологии и венерологии. 2009. № 5. С. 117–119. [Sergeev Ju.V., Kasikhina E.I. Onychomycosis: modern approaches to treatment. Vestnik dermatologii i vene rologii = Journal of Dermatology and Venereology, 2009, no. 5, pp. 117–119. (In Russ.)]
  11. Ameen M., Lear J.T., Madan V., Mohd Mustapa M.F., Richardson M. British Association of Dermatologists’ guidelines for the management of onychomycosis 2014. Br. J. Dermatol., 2014, vol. 171, no. 5, pp. 937–958. doi: 10.1111/bjd.13358
  12. Appleby L.J., Nausch N., Midzi N., Mduluza T., Allen J.E., Mutapi F. Sources of heterogeneity in human monocyte subsets. Immunol. Lett., 2013, vol. 152, no. 1, pp. 32–41. doi: 10.1016/j.imlet.2013.03.004
  13. Baraldi A., Jones S.A., Guesné S., Traynor M.J., McAuley W.J., Brown M.B., Murdan S. Human nail plate modifications induced by onychomycosis: implications for topical therapy. Pharm. Res., 2015, vol. 32, no. 5, pp. 1626–1633. doi: 10.1007/s11095-014-1562-5
  14. Bhatnagar N., Ahmad F., Hong H.S., Eberhard J., Lu I.N., Ballmaier M., Schmidt R.E., Jacobs R., Meyer-Olson D. FcγRIII (CD16)-mediated ADCC by NK cells is regulated by monocytes and FcγRII (CD32). Eur. J. Immunol., 2014, vol. 44, no. 11, pp. 3368–3379. doi: 10.1002/eji.201444515
  15. Brasch J., Köppl G. Persisting onychomycosis caused by Fusarium solani in an immunocompetent patient. Mycoses, 2009, vol. 52, no. 3, pp. 285–286. doi: 10.1111/j.1439-0507.2008.01591.x.
  16. Bruserud O. Bidirectional crosstalk between platelets and monocytes initiated by Toll-like receptor: an important step in the early defense against fungal infections? Platelets, 2013, vol. 24, no. 2, pp. 85–97. doi: 10.3109/09537104.2012.678426
  17. Bunyaratavej S., Pattanaprichakul P., Leeyaphan C., Chayangsu O., Bunyaratavej S., Kulthanan K. Onychomycosis: a study of selfrecognition by patients and quality of life. Indian J. Dermatol. Venereol. Leprol., 2015, vol. 81, no. 3, pp. 270–274. doi: 10.4103/0378-6323.154796
  18. Burbano C., Vasquez G., Rojas M. Modulatory effects of CD14+CD16++ monocytes on CD14++CD16– monocytes: a possible explanation of monocyte alterations in systemic lupus erythematosus. Arthritis Rheumatol., 2014, vol. 66, no. 12, pp. 3371–3381. doi: 10.1002/art.38860
  19. Döbel T., Kunze A., Babatz J., Tränkner K., Ludwig A., Schmitz M., Enk A., Schäkel K. FcγRIII (CD16) equips immature 6-sulfo LacNAc-expressing dendritic cells (slanDCs) with a unique capacity to handle IgG-complexed antigens. Blood, 2013, vol. 121, no. 18, pp. 3609–3618. doi: 10.1182/blood-2012-08-447045
  20. Hristov M., Schmitz S., Nauwelaers F., Weber C. A flow cytometric protocol for enumeration of endothelial progenitor cells and monocyte subsets in human blood. J. Immunol. Methods. 2012, vol. 381, no. 1–2, pp. 9–13. doi: 10.1016/j.jim.2012.04.003
  21. Jo Y., Kim S.H., Koh K., Park J., Shim Y.B., Lim J., Kim Y., Park Y.J., Han K. Reliable, accurate determination of the leukocyte differential of leukopenic samples by using Hematoflow method. Korean J. Lab. Med., 2011, vol. 31, no. 3, pp. 131–137. doi: 10.3343/kjlm.2011.31.3.131
  22. Kahng J., Kim Y., Kim M., Oh E.J., Park Y.J., Han K. Flow cytometric white blood cell differential using CytoDiff is excellent for counting blasts. Ann. Lab. Med., 2015, vol. 35, no. 1, pp. 28–34. doi: 10.3343/alm.2015.35.1.28
  23. Kaya T.I., Eskandari G., Guvenc U., Gunes G., Tursen U., Burak Cimen M.Y., Ikizoglu G. CD4+CD25+ Treg cells in patients with toenail onychomycosis. Arch. Dermatol. Res., 2009, vol. 301, no. 10, pp. 725–729. doi: 10.1007/s00403-009-0941-y
  24. Kim A.H., Lee W., Kim M., Kim Y., Han K. White blood cell differential counts in severely leukopenic samples: a comparative analysis of different solutions available in modern laboratory hematology. Blood Res., 2014, vol. 49, no. 2, pp. 120–126. doi: 10.5045/br.2014.49.2.120
  25. Leelavathi M., Noorlaily M. Onychomycosis nailed. Malays Fam. Physician., 2014, vol. 9, no. 1, pp. 2–7.
  26. Lipner S.R., Scher R.K. Onychomycosis: current and investigational therapies. Cutis, 2014, vol. 94, no. 6, pp. 21–24.
  27. Rosen T., Friedlander S.F., Kircik L., Zirwas M.J., Stein Gold L., Bhatia N., Gupta A.K. Onychomycosis: epidemiology, diagnosis, and treatment in a changing landscape. J. Drugs Dermatol., 2015, vol. 14, no. 3, pp. 223–233.
  28. Skrzeczyńska-Moncznik J., Bzowska M., Loseke S., Grage-Griebenow E., Zembala M., Pryjma J. Peripheral blood CD14high CD16+ monocytes are main producers of IL-10. Scand. J. Immunol., 2008, vol. 67, no. 2, pp. 152–159. doi: 10.1111/j.1365-3083.2007.02051.x
  29. Trzeciak-Ryczek A., Tokarz-Deptuła B., Deptuła W. Antifungal immunity in selected fungal infections. Postepy Hig. Med. Dosw., 2015, vol. 69, pp. 469–474 doi: 10.5604/17322693.1148747
  30. Wüthrich M., Brandhorst T.T., Sullivan T.D., Filutowicz H., Sterkel A., Stewart D., Li M., Lerksuthirat T., LeBert V., Shen Z.T., Ostroff G., Deepe G.S. Jr, Hung C.Y., Cole G., Walter J.A., Jenkins M.K., Klein B. Calnexin induces expansion of antigenspecific CD4(+) T cells that confer immunity to fungal ascomycetes via conserved epitopes. Cell Host Microbe, 2015, vol. 17, no. 4, pp. 452–465. doi: 10.1016/j.chom.2015.02.009
  31. Ziegler-Heitbrock L., Ancuta P., Crowe S., Dalod M., Grau V., Hart D.N., Leenen P.J., Liu Y.J., MacPherson G., Randolph G.J., Scherberich J., Schmitz J., Shortman K., Sozzani S., Strobl H., Zembala M., Austyn J.M., Lutz M.B. Nomenclature of monocytes and dendritic cells in blood. Blood, 2010, vol. 116, no. 16, pp. 74–80. doi: 10.1182/blood-2010-02-258558

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Савченко А.А., Борисов А.Г., Анисимова Е.Н., Беленюк В.Д., Кудрявцев И.В., Решетников И.В., Квятковская С.В., Цейликман В.Э., Зорин А.Н., 2016

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС 77 - 64788 от 02.02.2016.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах