DSc (Medicine), Professor, Head of the Laboratory of Cellular-Molecular Physiology and Pathology
доктор медицинских наук, профессор, зав. лабораторией клеточно-молекулярной физиологии и патологии
DSc (Medicine), Professor, Head of the Department of Infectious Diseases and Epidemiology with a course of Postgraduate Education
доктор медицинских наук, профессор, зав. кафедрой инфекционных болезней и эпидемиологии с курсом постдипломного образования курсом
Physician of Infectious Disease Ward
врач инфекционного отделения
PhD (Biology), Head of the Cell Immunology Laboratory, Department of Immunology, Institute of Experimental Medicine, Assistant Professor, Department of Immunology
кандидат биологических наук, зав. лабораторией клеточной иммунологии отдела иммунологии, доцент кафедры иммунологии
Junior Researcher, Laboratory of Cellular-Molecular Physiology and Pathology
младший научный сотрудник лаборатории клеточно-молекулярной физиологии и патологии
PhD (Medicine), Leading Researcher, Laboratory of Cellular-Molecular Physiology and Pathology
кандидат медицинских наук, ведущий научный сотрудник лаборатории клеточно-молекулярной физиологии и патологии
Elimination of the hepatitis C virus (HCV) due to direct antiviral drug (DAD) action affects alteration in virus phenotype and, accordingly, NK cell functional activity. However, the published data are very contradictory. The aim of the study was to investigae alterations in NK cell subset phenotype after DAD treatment of HCV genotype-dependent chronic viral hepatitis C (CVHC) patients. Materials and methods. 111 CVHC patients and 21 healthy volunteers were examined. The diagnosis was established on epidemiological, clinical and laboratory data. All 111 subjects with CVHC received direct antiviral drugs Sofosbuvir and Velpatasvir for 12 weeks. The study of the NK cell phenotypes wwas analyzed by multicolor flow cytometry. Results. A decreased count of cytokine-producing along with increased frequency of cytotoxic NK cells were found in CVHC patients blood samples with various HCV genotypes prior to DAD treatment. The imbalance of cytotoxic cells with a high level of functional activity was also found in CVHC patients regardless of HCV genotype. The patients with HCV genotypes 1 and 3 showed significantly increased level of immunoregulatory NK cells. In addition, increased count of glycohydrolase (CD38) and ecto-5'-nucleotidase (CD73)-expressing NK cells were found in patients with HCV genotypes 1 and 3. Hence, such alterations in NK cell phenotype in CVHC patients were presented as sustained high viral load which peaking at carriers of HCV genotype 1 that was minimal in patients with HCV genotype 2. The most prominent change in NK cells after DAD treatment was found in CVHC patients with HCV genotype 2 (normalization of CD8-expressing NK cell subset composition and count). Only patients with HCV genotype 2 after treatment had increased frequencies of peripheral blood double-negative CD38–CD73– NK cells. Patients with HCV genotypes 1 and 3 also showed minimally improved in NK cell subset composition after DAD treatment. Conclusion. Evaluation of specific changes in NK cell phenotype during DAD treatment of CVHC patients driven by HCV genotype undoubtedly is of importance and high relevance. The results obtained are novel and complement the insights into CVHC immunopathogenesis. Analysis of NK cell phenotypes and functional activity in patients with CVHC may promote development of new methods for treating HCV infection.
Элиминация вируса гепатита С (ВГС), вызванная действием препаратов прямого противовирусного действия (ПППВД), влияет на изменение фенотипа и, соответственно, функциональную активность NK-клеток. Однако имеющиеся в литературе данные весьма противоречивы. Целью настоящего исследования было изучение особенностей изменения фенотипа NK-клеток (с учетом субпопуляционного состава) после лечения больных хроническим вирусным гепатитом С (ХВГС) ПППВД в зависимости от генотипа ВГС. Материалы и методы. Обследовано 111 больных ХВГС и 21 здоровый человек в качестве контрольной группы. Диагноз ХВГС устанавливали на основании эпидемиологических и клинико-лабораторных данных при выявлении специфических серологических маркеров хронического гепатита С и РНК ВГС, включая генотипирование ВГС. Все 111 человек с ХВГС получали противовирусные препараты прямого действия (Софосбувир и Велпатасвир) в течение 12 недель. Изучение фенотипа NK-клеток крови проводили методом проточной цитометрии с использованием прямой иммунофлуоресценции цельной периферической крови с моноклональными антителами. Результаты. В крови больных ХВГС с различными генотипами ВГС до начала лечения ПППВД выявлено снижение количества цитокин-продуцирующих и увеличение количества цитотоксических NK-клеток. Дисбаланс цитотоксических клеток с высоким уровнем функциональной активности также был выявлен у больных ХВГС вне зависимости от генотипа ВГС. У пациентов с генотипами 1 и 3 ВГС наблюдалось достоверное увеличение NK-клеток с иммунорегуляторной активностью. Кроме того, у больных ВГС генотипов 1 и 3 выявлено увеличение количества NK-клеток, экспрессирующих гликогидролазу (CD38) и экто-5'-нуклеотидазу (CD73). Результатом выявленных нарушений в фенотипе NK-клеток у больных ХВГС было сохранение выраженной вирусной нагрузки, которая была максимальной при инфицированности генотипом 1 ВГС и минимальной у больных с генотипом 2 ВГС. Наиболее выраженные изменения фенотипического состава NK-клеток после лечения ДАД выявлены у больных ХВГС с генотипом 2 ВГС (нормализация субпопуляционного состава и количества NK-клеток, экспрессирующих CD8). Кроме того, только у больных c генотипом 2 ВГС после лечения наблюдалось повышение содержания дубль-негативных (по CD38 и CD73) NK-клеток в крови. У пациентов с генотипами 1 и 3 ВГС также наблюдалось улучшение состава NK-клеток с различными фенотипами после лечения ДАД, но эти изменения были минимальными. Выводы. Оценка особенностей изменения фенотипа NK-клеток при лечении в зависимости от генотипа имеет несомненную значимость и высокую актуальность. Полученные результаты обладают новизной и дополняют информацию об иммунопатогенезе ХВГС. Анализ фенотипов NK-клеток и их функциональной активности у пациентов с ХВГС может помочь в разработке новых методов лечения HCV-инфекции.