Russian Journal of Infection and ImmunityRussian Journal of Infection and ImmunityИнфекция и иммунитет2220-76192313-7398SPb RAACI74310.15789/2220-7619-2018-2-230-234SHORT COMMUNICATIONSКРАТКИЕ СООБЩЕНИЯSTUDY OF ELISA TEST-SYSTEMS OF DIFFERENT FORMATS FOR DETECTION OF MEASLES VIRUS SPECIFIC IgM IN DIFFERENT GEOGRAPHIC ZONESРЕЗУЛЬТАТЫ СРАВНИТЕЛЬНОГО ИЗУЧЕНИЯ ИФА ТЕСТ-СИСТЕМ ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ IgM-КОРЬ АНТИТЕЛ В РАЗНЫХ ГЕОГРАФИЧЕСКИХ ЗОНАХBichurinaM. A.БичуринаМ. А.
Russian Federation

PhD, MD (Medicine), Head of the Laboratory of Etiology and  Control of Viral Infections, St. Petersburg Pasteur Institute, St. Petersburg, Russian Federation

д.м.н., зав. лабораторией этиологии и контроля вирусных инфекций ФБУН НИИ  эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург, Россия

ZheleznovaN. V.ЖелезноваН. В.
Russian Federation

PhD (Biology), Leading Researcher, Laboratory of Viral  Hepatitis, St. Petersburg Pasteur Institute, St. Petersburg, Russian Federation

к.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории вирусных гепатитов ФБУН НИИ  эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург, Россия

LavrentievaI. N.ЛаврентьеваИ. Н.
Russian Federation

PhD, MD (Medicine), Head of the Laboratory of experimental  virology, St. Petersburg Pasteur Institute, St. Petersburg, Russian Federation

д.м.н., зав. лабораторией экспериментальной вирусологии ФБУН НИИ  эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург, Россия

AntipovaA. Yu.АнтиповаА. Ю.
Russian Federation

PhD (Biology), Senior Researcher, Laboratory of experimental  virology, St. Petersburg Pasteur Institute, St. Petersburg, Russian Federation

197101, Russian Federation, St. Petersburg, Mira str., 14

Phone: +7 (812) 232-94-11 (office). Fax: +7 (812) 233-20-92

к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории экспериментальной вирусологии  ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург, Россия

197101, Россия, Санкт-Петербург, ул. Мира, 14

Тел.: 8 (812) 232-94-11 (служебн.). Факс: 8 (812) 233-20-92

anti130403@mail.ruKulyashovaL. B.КуляшоваЛ. Б.
Russian Federation

PhD (Medicine), Leading Researcher, Laboratory of  Identification of Pathogens, St. Petersburg Pasteur Institute, St. Petersburg, Russian Federation

к.м.н., ведущий научный сотрудник лаборатории идентификации патогенов ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург, Россия

TotolianAreg A.ТотолянАрег А.
Russian Federation

RAS Full Member, PhD, MD (Medicine), Professor, Head of the  Laboratory of Molecular Immunology, Director, St. Petersburg  Pasteur Institute, St. Petersburg, Russian Federation 

академик РАН, д.м.н., профессор, зав. лабораторией молекулярной иммунологии,  директор ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт- Петербург, Россия

St. Petersburg Pasteur Institute,ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера10092018822302341009201810092018Copyright ©; 2018, Bichurina M.A., Zheleznova N.V., Lavrentieva I.N., Antipova A.Y., Kulyashova L.B., Totolian A.A.Copyright ©; 2018, Бичурина М.А., Железнова Н.В., Лаврентьева И.Н., Антипова А.Ю., Куляшова Л.Б., Тотолян А.А.2018Bichurina M.A., Zheleznova N.V., Lavrentieva I.N., Antipova A.Y., Kulyashova L.B., Totolian A.A.Бичурина М.А., Железнова Н.В., Лаврентьева И.Н., Антипова А.Ю., Куляшова Л.Б., Тотолян А.А.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://iimmun.ru/iimm/article/view/743

Detection of the measles virus (MV) specific IgM antibodies in blood serum of patients is considered to be the main standard for the  laboratory confirmation of measles diagnosis, the test being  acknowledged by WHO. As it was demonstrated earlier the specific  IgM antibodies as the marker of the acute MV infection were  detected in 97.2–100% of blood serum samples from patients using  the ELISA test-systems of the “capture” format (Microimmun Ltd.  and Vector Best). In case when the ELISA test-system of the  “indirect” format (Siemens, Germany) was used only 63.9% of these sera turned to be IgM positive. And on the contrary using the  “indirect” format ELISA test-system Euroimmun, Germany, for  detection of the MV specific IgM the false positive results were  obtained.

The aim of the study was the comparative evaluation of  the different format ELISA test-systems used for the detection of the  MV specific IgM antibodies in blood sera of patients and healthy  adults collected in different geographic zones.

Materials and  methods. In total 108 serum specimens collected in 2015–2017 were studied: from healthy adult Guineans, residents of the Republic of Guinea (RG); patients aged 1–70 with the initial  “infectious mononucleosis”, “infectious cytomegalovirus” and  “rubella” diagnosis and taken from the bank of sera in the  Subnational Measles/Rubella laboratory, StP Measles/Rubella RC in  NWFR. The MV specific IgM antibodies were detected using the commercial ELISA test-systems “VectoMeasles-IgM” (Vector-Best,  Russia) (“capture” format) and “Anti-Measles Virus ELISA IgM (NP)”  (Euroimmun Medizinische Labordiagnostik AG, Germany) («indirect»  format). The specific Epshtein-Barr Virus (EBV) IgM and IgG  antibodies were detected with the commercial ELISA test-systems «DS-ELISA-anti-EBV-VCA-M», «DS-ELISA-anti-EBV-EA-G» and «DS-ELISA-anti-EBV-NA-G» (“Diagnostic Systems”, Russia).

Results and discussion. The MV specific IgM antibodies were not revealed in the total of 108 blood serum samples from the healthy adults and patients, residents of the Russia and of the RG, with the “capture”  format “VectoMeasles-IgM” ELISA test-system. The absence of the  acute MV infection was also confirmed by the high measles immunity  level (i.e. IgG MV antibodies titers) as well as by detection of the IgG antibodies of high avidity. At the same time in 6  of 108 total sera (5.5%) IgM MV antibodies were detected with the «indirect» format ELISA test system Euroimmun, Germany. In these 6 sera the EBV specific antibodies were also evidenced. The results  obtained demonstrate the nonspecific reaction due to the possible  reactivity with anti-EBV antibodies. Besides this the different  percentage of the false positive reactions in sera from healthy  adults, residents of the RG and residents of Russia was determined  — 8.5±4.0% and 3.2±2.2% correspondently. Thus the preliminary  results, and to get the final results for general conclusions increase  of the total amount of the clinical specimens under studying is of extremely importance.

Признанным ВОЗ стандартом лабораторного подтверждения диагноза «корь» является выявление в сыворотке крови больных методом ИФА IgM-корь антител. Ранее было  показано, что IgM-корь определены в 97,2– 100% сывороток больных с помощью тестов  формата «capture» (Microimmun Ltd. и Вектор-Бест), но при использовании тест-систем  формата «indirect» (Siemens, Германия) доля положительных сывороток не превышала  63,9%. И напротив, при использовании одной из тест-систем для выявления IgM-корь  формата «indirect» (Euroimmun, Германия) были получены ложноположительные  результаты.

Цель работы: сравнительная оценка тест-систем разного формата при  исследовании сывороток крови на IgM-антитела от лиц из разных географичес ких зон. 

Материалы и методы. Клинические образцы (n = 108), получены в 2015–2017 гг. от  здоровых взрослых жителей Гвинейской Республики (ГР); от больных 1–70 лет с  первичными диагнозами «инфекционный мононуклеоз», «цитомегаловирусная инфекция» и  «краснуха» из банка сывороток лаборатории СПбРЦ по надзору за корью и краснухой в  СЗФО. Использовали тест-системы производства ЗАО «Вектор-Бест», Россия («capture»  формат) и производства Euroimmun Medizinische Labordiagnostik AG, Германия («indirect»  формат). Наличие антител к вирусу Эпштейна–Барр определяли в ИФА с тест-системами  производства НПО «Диагностические системы», Россия («ДС-ИФА-Анти-ВЭБ-VCA-M», «ДС- ИФА-Анти-ВЭБ-ЕA-G», «ДС-ИФА-Анти-ВЭБ-NA-G»).

Результаты и обсуждение. При  исследовании сывороток крови от здоровых и больных лиц, проживающих на территории СЗФО и в Гвинейской Республике, в ИФА с тест-системой  «ВектоКорь IgM» антитела IgM-корь не были выявлены. Отсутствие острой инфекции также  подтверждено наличием высокого уровня IgG-антител и высоким процентом авидности IgG-  корь антител. При исследовании этих же сывороток в ИФА с тест-системой Euroimmun, Германия, выявлено 6 положительных сывороток (5,5%), в которых  обнаружены также антитела к вирусу Эпштейна–Барр (ВЭБ). Полученные результаты можно  рассматривать как неспецифическую реакцию, обусловленную возможной  перекрестной реакцией с антителами против ВЭБ, что предусмотрено фирмой-производителем. Выявлено преобладание ложноположительных реакций у лиц, постоянно  проживающих в ГР (8,5±4,0%), по отношению к гражданам РФ (3,2±2,2%). Полученные  данные оцениваются как предварительные. Для получения окончательных результатов  следует увеличить объем выборки исследуемых сывороток.

measlesspecific antibodiestest-systemsELISA method“capture” format“indirect” formatcross reactivity.корьспецифические антителатест-системыметод ИФА«capture» формат«indirect» форматперекрестная реактивность1. Мамаева Т.А., Наумова М.А., Железнова Н.В., Липская Г.Ю., Mulders S.M., Featherstone D.A. Оценка коммерческих тест-систем ИФА разного формата для определения уровня специфических IgM и IgG в сыворотках больных корью // Вопросы вирусологии. 2013. Т. 58, № 5. С. 43–48. [Mamaeva T.A., Naumova M.A., Zheleznova N.V., Lipskaya G.Y., Mulders M., Featherstone D.A. Estimation of the commercial elisa test-systems of different formats to detect specific IgM and IgG in the measles patients sera. Voprosy virusologii = Problems of Virology, 2013, vol. 58, no. 5, pp. 43–48. (In Russ.)]2. Попова А.Ю., Бичурина М.А., Лаврентьева И.Н., Железнова Н.В., Антипова А.Ю., Щербакова С.А., Буаро М.Й., Тотолян А.А. Изучение уровня иммунитета к вирусу кори в отдельных группах населения Гвинейской Республики в рамках глобальной программы элиминации кори. Сообщение 2 // Инфекция и иммунитет. 2017. Т. 7, № 1. С. 79–84. [Popova A.Y., Bichurina M.A., Lavrentyeva I.N., Zheleznova N.V., Antipova A.Y., Shcherbakova S.A., Boiro M.Y., Totolian A.A. Measles virus immunity level study in particular population groups of the republic of guinea within the framework of global measles elimination program. Report 2. Infektsiya i immunitet = Russian Journal of Infection and Immunity, 2017, vol. 7, no. 1, pp. 79–84. doi: 10.15789/2220-7619-2017-1-79-84 (In Russ.)]3. Getahun M., Beyene B., Ademe A., Teshome B., Tefera M., Asha A., Afework A., Hailemariyam Y., Assefa E., Gallagher K. Epidemiology of laboratory confirmed measles virus cases in Amhara Regional State of Ethiopia, 2004–2014. BMC Infect. Dis., 2016, vol. 16 (133), 7 p. doi: 10.1186/s12879-016-1457-74. Parent du Chatelet I., Floret D., Antona D., Levy-Bruhl D. Measles resurgence in France in 2008, a preliminary report. Euro Surveill., 2009, vol. 14, iss. 6: 19118. doi: 10.2807/ese.14.06.19118-en5. Suk J.E., Jimenez A.P., Kourouma M., Derrough T., Balde M., Honomou P., Kolie N., Mamadi O., Tamba K., Lamah K., Loua A., Mollet T., Lamah M., Camara A., Prikazsky V. Post-Ebola measles outbreak in Lola, Guinea, January-June 2015. Emerg. Infect. Dis., 2016, vol. 22, no. 6, pp. 1106–1108. doi: 10.3201/eid2206.1516526. World Health Organization. Manual for the laboratory diagnosis of measles and rubella virus infection. 2006, Geneva, Switzerland. URL: http://www.who.int/ihr/elibrary/manual_diagn_lab_mea_rub_en.pdf (18.05.2018)7. World Health Organization. WHO vaccine-preventable diseases: monitoring system. 2016 global summary. URL: http://apps.who.int/immunization_monitoring/globalsummary/countries?countrycriteria%5Bcountry%5D%5B%5D=GIN&commit=OK (18.05.2018)