Terletsky Alexander Vitalievich - PhD (Biology), Researcher, Laboratory of Molecular Genetics, Institute of Molecular and Cellular Biology SB RAS.
630090, Novosibirsk, Acad. Lavrentieva pr., 8/2.
Phone: +7 (383) 363-90-42 (служебн.); +7 952 905-03-28, +7 913 717-99-42 (моб.). Fax: +7 (383) 363-90-78.
6284-1164
Терлецкий Александр Витальевич - кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории молекулярной генетики.
630090, Новосибирск, пр. акад. Лаврентьева, 8/2.
Тел.: 8 (383) 363-90-42 (служебн.); 8 952 905-03-28, 8 913 717-99-42 (моб.). Факс: 8 (383) 363-90-78.
6284-1164
Akhmerova Larisa Grigorievna - PhD (Biology), Scientific Secretary, Institute of Molecular and Cellular Biology SB RAS.
Novosibirsk.
Ахмерова Лариса Григорьевна - кандидат биологических наук, ученый секретарь.
Новосибирск.
3476-8355
Evtushenko Elena Vasilievna - PhD (Biology), Senior Researcher, Laboratory of Molecular Genetics, Institute of Molecular and Cellular Biology SB RAS.
Novosibirsk.
Евтушенко Елена Васильевна - кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории молекулярной генетики.
Новосибирск.
8623-1846
A retrospective examining of cytology specimens obtained and verified by a fine-needle aspiration biopsy from patients with autoimmune thyroiditis and benign thyroid gland (cyst and goiter) formations allowed to note that in thyroid lobes they coincided in various combinations, thus rising a question about their potential etiological relation. In particular, a hemosporidian (blood parasitic) infection was found while analyzing cytology specimens from patients with autoimmune thyroiditis and benign thyroid gland (cyst and goiter) tumors prestained by Romanowsky-Giemsa dye. An evolution of developing intra-thyrocyte hemosporidia was tracked during a long-term detailed analysis of cytology specimens noted above. A panel of select specimens was stained (re-stained) with Schiff reagent according to the Feulgen method to clarify position of thyrocyte DNA and hemosporidian pathogens. Owing to an absorption approach, Romanovsky-Giemsa method allowed to repeatedly use specimens pre-stained with Schiff reagent according to the Feulgen method, wherein fuchsine was incorporated into DNA molecules after they were hydrolyzed by hydrochloric acid to stain specimens into magenta-lilac color. It allowed to identify a parasitic DNA inside developing hemosporidia most probably at exoerythrocytic stage and some erythrocytes cyst-based medusiform structures. Such technique used to stain specimens from patients with autoimmune thyroiditis allowed to localize the thyrocyte nuclear DNA as well as punctate and diffuse cytoplasmic inclusions of parasitic DNA, including magenta-lilac nuclei of different sizes inside erythrocytes. Thyrocyte nuclear DNA as well as punctate and diffuse hemosporidian DNA were distinguished in nodular goiter. Moreover, hemosporidian DNA was identified in a form of magenta-lilac multi-size nuclei inside erythrocytes. In contrast, unstained hemosporidian protoplasm was revealed as light-colored band around erythrocyte nuclei. The intra-erythrocyte nuclear hemosporidian material of different sizes may evidence about various species and/or pathogen generations. Intra-thyrocyte development of hemosporidian infection in patients with goiter results in marked cytoplasmic hyperplasia and its vacuolization associated with thyrocyte nuclear deformation, vacuolization, decreased size and degradation (with highly probability of mutations and deletions), reaching a pre-neoplastic level.
Исследования архивного цитологического материала, полученного врачами-цитологами за ряд лет в ходе выполнения тонкоигольной аспирационной пункционной биопсии при аутоиммунном тиреоидите и доброкачественных образованиях щитовидной железы человека (киста и зоб), позволили обнаружить одновременное присутствие в разных сочетаниях патоморфологических признаков обоих состояний в препаратах долей щитовидной железы. В этой связи возник вопрос о возможной общей этиологии вышеуказанных процессов. Исследованиями цитологического материала при аутоиммунном тиреоидите и доброкачественных образований щитовидной железы человека (киста и зоб), окрашенных изначально в медицинских лабораториях по Романовскому–Гимзе, выявлена гемоспоридийная (кровепаразитарная) инфекция. В процессе длительного детального изучения мазков с цитологическим материалом удалось проследить эволюцию развития гемоспоридий в тироцитах щитовидной железы. Для уточнения локализации ДНК тироцитов и гемоспоридийной инфекции после изучения всего массива мазков было решено окрасить (перекрасить) выборочный ряд оригинальных архивных мазков реактивом Шиффа по Фельгену. Метод окрашивания мазков по Романовскому–Гимзе является адсорбционным, что позволило повторно использовать эти же мазки для окраски реактивом Шиффа по Фельгену, где краситель фуксин после гидролиза ДНК соляной кислотой встраивается в ДНК и окрашивает ее в малиново-сиреневый цвет. Окрашивание ДНК по Фельгену позволило в «медузоподобных» структурах из содержимого кист, являющихся, по всей вероятности, экзоэритроцитарной стадией развития гемоспоридий, локализовать находящуюся в них и некоторых эритроцитах паразитарную ДНК. При аутоиммунном тиреоидите удалось локализовать ядерную ДНК тироцитов и паразитарную ДНК в виде точечных включений и диффузно распределенной в цитоплазме тироцитов, а также ДНК в эритроцитах крови в виде ядер разных размеров, окрашенных в малиново-сиреневый цвет. При узловом зобе удалось локализовать ядерную ДНК тироцитов, и ДНК гемоспоридий в виде точечных включений и диффузно распределенной в цитоплазме тироцитов. ДНК гемоспоридий в эритроцитах крови проявилась в виде ядер разных размеров, окрашенных в малиново-сиреневый цвет, неокрашенная протоплазма кровепаразитарной инфекции выявлялась виде светлой полосы вокруг ядер в эритроцитах. Ядерный материал гемоспоридий в эритроцитах был разных размеров, что может свидетельствовать о разных видах и/или генерациях возбудителя. Внутриклеточное развитие гемоспоридийной инфекции при зобе в тироцитах приводит к выраженной гиперплазии цитоплазмы и ее вакуолизации, ядра тироцитов при этом деформируются, вакуолизируются, уменьшаются в размерах и деградируют (c высокой вероятностью мутаций и делеций в ДНК), достигая преднеопластического уровня.