Russian Journal of Infection and ImmunityRussian Journal of Infection and ImmunityИнфекция и иммунитет2220-76192313-7398SPb RAACI65610.15789/2220-7619-2019-2-399-403METHODSМЕТОДЫUnknownChoosing a proper approach for isolating bacteriophages specific to Flavobacterium genus bacteriaВыбор оптимального метода выделения бактериофагов бактерий рода FlavobacteriumSemaninA. G.СеманинА. Г.
Russian Federation

PhD Student, Department of Microbiology, Virology, Epizootology and Veterinary Sanitation Inspection

Contacts: Anton G. Semanin 433430, Russian Federation, Ulyanovsk region, Cherdaklinskii district, Oktjabrski village, Studencheskaia str., 8, Ulyanovsk State Agrarian University named after P.A. Stolypin

 

Семанин Антон Геннадьевич, аспирант кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы 

Адрес для переписки: Семанин Антон Геннадьевич 433430, Россия, Ульяновская область, Чердаклинский район, пос. Октябрьский, ул. Студенческая, 8, Ульяновский ГАУ им. П.А. Столыпина. Тел.: 8 (84231) 5-12-68, 8 (8422) 49-55-63

anton-vet@mail.ruSadrtdinovaG. R.СадртдиноваГ. Р.
Russian Federation

PhD (Biology), Assistant Professor, Department of Microbiology, Virology, Epizootology and Veterinary Sanitation Inspection

Садртдинова Гузелия Рафиковна, кандидат биологических наук, ассистент кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы

sadrtdinova-guzlik@yandex.ruUlyanovsk State Agrarian University named after P.A. StolypinФГБОУ ВО Ульяновский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина12072019923994032704201826032019Copyright ©; 2019, Semanin A.G., Sadrtdinova G.R.Copyright ©; 2019, Семанин А.Г., Садртдинова Г.Р.2019Semanin A.G., Sadrtdinova G.R.Семанин А.Г., Садртдинова Г.Р.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://iimmun.ru/iimm/article/view/656

The article presents results of research related to the selection of an effective method for isolating bacteriophages active against bacteria of the genus Flavobacterium. The number of bacterial strains used in the work — 3. All strains cultures were obtained from the museum of the department of microbiology, virology, epizootiology and veterinary-sanitary examination of federal state budgetary educational institution of higher education Ulyanovsk «State Agricultural University named after PA Stolypin» and have tinctorial and biochemical properties characteristic for this genus (and species). The studies consisted of 4 series of experiments. The first series of experiments was connected with the approbation of a technique for isolating a bacteriophage without using an influencing factor. As a result, the desired bacteriophages were not isolated. The second series of experiments consisted in testing the isolation method using an inducing factorultraviolet irradiation. The distance to the objects of irradiation is0.3 m. Exposure time: 1 min, 3 min, 5 min, 10 min, 15 min. The third series of experiments was also associated with the use of inducing factor X-ray irradiation. In the course of the work, three operating modes were determined, each of which differed in the duration of the exposure, the periodicity of the exposure, and the dose received. As a result of studies related to the use of inducing factors, the desired bacteriophages were not identified. The last series of experiments was to allocate bacteriophages from the objects of the natural places сommemorative (possible) existence of the «owner» (the studied microorganism) and viruses (bacteriophage desired). Three phage isolates were isolated from environmental objects: FL-j-1, FL-pec-2, FL-aq-3. Bacteriophage FL-j-1 is active against a strain of F. johnsoniae VKM B-1426 bacteriophage FL-pec-2 is active against strain F. pectinovorum VKM B-1171 bacteriophage FL-aq-3 strain active against F. aquatile VKPM B-8534. Further studies may be related to study properties of the isolated phages: study of the specificity in respect of this kind of sensitivity study, the study and higher lytic activity, selection of the most promising strains phages further selection of selected phages, as well as studying the possibility of bacteriophages from use in the method of the reaction increase titer phage for the purpose of indicating the microorganism being studied.

В статье представлены результаты исследования, связанные с подбором эффективного метода выделения бактериофагов активных в отношении бактерий рода Flavobacterium. Число бактериальных штаммов, используемых в работе - 3. Все штаммы культур получены из музея кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Ульяновский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина» и имеют характерные для данного рода (и видов) тинкториальные и биохимические свойства. Исследования состояли из 4 серий опытов. Первая серия опытов была связана с апробацией методики по выделению бактериофага без использования воздействующего фактора. В результате искомых бактериофагов выделено не было. Вторая серия опытов заключалась в апробации метода выделения с использованием индуцирующего фактора – ультрафиолетового облучения. Расстояние до объектов облучения – 0,3 м. Время экспозиции: 1 мин, 3 мин, 5 мин, 10 мин, 15 мин. Третья серия опытов также была связана с использованием индуцирующего фактора- рентгеновского облучения. В ходе работы были определены три рабочих режима, каждый из которых отличался длительностью экспозиции, периодичностью воздействия и полученной дозой облучения. В результате исследований, связанных с использованием индуцирующих факторов, искомых бактериофагов выделено не было. Последняя серия опытов заключалась в выделении бактериофагов из объектов внешней среды - мест естественного (возможного) существования «хозяина» (изучаемого микроорганизма) и вируса (искомого бактериофага). Из объектов внешней среды было выделено 3 изолята фага: FL-j-1, FL-pec-2, FL-aq-3. Бактериофаг FL-j-1 активен в отношении штамма F. johnsoniae VKM B-1426, бактериофаг FL-pec-2 активен в отношении штамма F. pectinovorum VKM B-1171, бактериофаг FL-aq-3 активен в отношении штамма F. aquatile VKPM В-8534.

Дальнейшие исследования могут быть связаны с изучением свойств выделенных бактериофагов: изучением специфичности в отношении данного рода, изучением чувствительности, изучением и повышением литической активности, отбором наиболее перспективных штаммов фагов, дальнейшей селекцией отобранных бактериофагов, а также изучением возможности использования данных бактериофагов в методе реакции нарастания титра фага с целью индикации изучаемого микроорганизма.

bacteriabacteriophagesisolationmethodmorphologylytic activityбактерии, бактериофаги, выделение, метод, морфология, литическая активность.1. Бульканова Е.А., Золотухин С.Н. Выделение бактериофагов рода Klebsiella из сточных вод //Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. 2004. № 12. С. 40–42.2. Васильев Д.А., Золотухин С.Н., Садртдинова Г.Р. Сравнительная эффективность методов выделения бактериофагов Klebsiella oxytoca //Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. 2015. № 4 (32). С. 68–72. doi: 10.18286/1816-4501-2015-4-68-723. Васильев Д.А. Пульчеровская Л.П., Золотухин С.Н., Садртдинова Г.Р. Бактериофаги рода Citrobacter //Вестник Ульянов ской государственной сельскохозяйственной академии. 2017. № 3 (39). С. 40–45. doi: 10.18286/18164501-2017-3-40-444. Катмакова Н.П., Золотухин С.Н., Васильев Д.А. Поиск и селекция псевдотуберкулезных бактериофагов //Ветеринарная медицина. 2009. № 4. С. 19–20.5. Christiansen R.H., Madsen L., Dalsgaard I., Castillo D., Kalatzis P.G., Middelboe M. Effect of bacteriophages on the growth of Flavobacterium psychrophilum and development of phage-resistant strains. Microbial Ecology, 2016, vol. 71, no. 4, pp. 845–859.6. Efreitorova E.O., Pulcherovskaya L.P. Indication of Citrobacter bacterias in the environment using bacteriophages in the phage titer increase reaction. Russian Journal of Agricultural and Socio-Economic Sciences, 2016, no. 10, pp. 193–196. doi: 10.18551/rjoas.2016-10.227. Nakai T., Park S.C. Bacteriophage therapy of infectious diseases in aquaculture. Res. Microbiol., 2002, vol. 153, iss. 1, pp. 13–18.