PhD (Medicine), Researcher, Department of Molecular Genetics, 197376, St. Petersburg, Akademika Pavlova str., 12;
Assistant Professor, Department of Medical Genetics;
Researcher, Interdepartmental Laboratory of Biomedical Chemistry, Institute of Chemistry
к.м.н., научный сотрудник отдела молекулярной генетики ФГБНУ Институт экспериментальной медицины, 197376, Санкт-Петербург, ул. Акад. Павлова, 12;
ассистент кафедры медицинской генетики;
научный сотрудник межкафедральной лаборатории биомедицинской химии Института химии
Junior Researcher and PhD Student, Department of Molecular Genetics,
St. Petersburg
младший научный сотрудник и аспирант отдела молекулярной генетики,
Санкт-Петербург
PhD Student, Department of Molecular Genetics,
St. Petersburg
аспирант отдела молекулярной генетики,
Санкт-Петербург
PhD (Biology), Senior Researcher, Department of Molecular Genetics,
St. Petersburg
к.б.н., старший научный сотрудник отдела молекулярной генетики,
Санкт-Петербург
Masters Degree Student,
St. Petersburg
студентка 6-го курса магистратуры,
Санкт-Петербург
PhD (Chemistry), Researcher, Interdepartmental Laboratory of Biomedical Chemistry, Institute of Chemistry;
Researcher, Laboratory of Polymer Sorbents and Carriers for Biotechnology, Russian Academy of Sciences,
St. Petersburg
к.х.н., научный сотрудник межкафедральной лаборатории биомедицинской химии Института химии;
научный сотрудник лаборатории полимерных сорбентов и носителей для биотехнологии,
Санкт-Петербург
PhD (Chemistry), Associate Professor, Interdepartmental Laboratory of Biomedical Chemistry, Institute of Chemistry,
St. Petersburg
к.х.н., доцент межкафедральной лаборатории биомедицинской химии Института химии,
Санкт-Петербург
PhD, MD (Chemistry), Professor, Head Researcher, Head of the Interdepartmental Laboratory of Biomedical Chemistry, Institute of Chemistry,
St. Petersburg
д.х.н., профессор, главный научный сотрудник, зав. межкафедральной лаборатории биомедицинской химии Института химии,
Санкт-Петербург
PhD, MD (Medicine), Professor, Head of the Laboratory of Human Molecular Genetics, Department of Molecular Genetics;
Professor of the Department of Medical Genetics,
St. Petersburg
д.м.н., профессор, зав. лабораторией молекулярной генетики человека отдела молекулярной генетики;
профессор кафедры медицинской генетики,
Санкт-Петербург
We investigated immunogenic properties of proteins bound with nanoparticles. A process for producing spherical nanoparticles having size of 20 microns by polymerization of lactic acid and an optimal method of nanoparticle surface activation were described. Activated nanoparticles were used for covalent binding of model fusion protein comprising sequences of human beta-2 microglobulin and green fluorescent protein. It is shown that the nanoparticles were able to bind 3 micrograms of the protein per 1 mg of the polymer. According to the results of confocal microscopy and electrophoresis the protein is firmly adsorbed on the surface of the granules. F1 (CBA x C57BL) mice were subjected to intraperitoneal immunization with fusion protein modified nanoparticles and equivalent mixture of unmodified nanoparticles and unbound fusion protein. Blood was taken at 2 weeks after three-time intraperitoneal immunization. Antibody level to model protein was determined in mouse sera using enzyme-linked immunosorbent assay. Each of experimental and control groups comprised 39 animals. The validity of the results was evaluated using the Mann–Whitney test. It is shown that the average antibody level in the control group was 1.8 times greater than that in the experimental group. The diffe rence was significant (p < 0.004). We discuss the significance of the results in terms of development traps capable to bind virus particles in blood and to provide immune response.
Исследовали иммуногенные свойства белков, связанных с полимерными биодеградабельными наногранулами. Описан способ получения сферических наногранул размером 20 мкм путем полимеризации молочной кислоты, а также оптимальный способ их поверхностной активации. Активированные наногранулы использованы для ковалентного связывания модельного белка слияния, содержащего последовательности β2-микроглобулина человека и зеленого флуоресцентного белка. Показано, что наногранулы способны связывать 3 мкг белка на 1 мг полимера. По данным конфокальной микроскопии и электрофореза, белок прочно сорбируется на поверхности гранул. Мышей линии F1 (CBA x C57BL) внутрибрюшинно иммунизировали наногранулами, модифицированными белком слияния, а также эквивалентной смесью немодифицированных наногранул и свободного белка слияния. Кровь забирали через 2 недели после трехкратной внутрибрюшинной иммунизации. Уровень антител к модельному белку определяли в сыворотке крови мышей при помощи иммуноферментного анализа. Опытная и контрольная группы включали по 39 животных. Достоверность полученных результатов оценивали при помощи критерия Манна–Уитни. Показано, что средний уровень антител в контрольной группе в 1,8 раза превышал таковой в опытной группе. Разница оказалась достоверной (p < 0,004). Обсуждается значимость полученных результатов для создания ловушек, способных связывать вирусные частицы в крови и обеспечивать иммунный ответ.