Russian Journal of Infection and ImmunityRussian Journal of Infection and ImmunityИнфекция и иммунитет2220-76192313-7398SPb RAACI45310.15789/2220-7619-2016-4-389-394METHODSМЕТОДЫUnknownCOMPARATIVE EVALUATION OF CULTURE MEDIA FOR PATHOGEN ISOLATION OF PURULENT BACTERIAL MENINGITISСРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ГНОЙНЫХ БАКТЕРИАЛЬНЫХ МЕНИНГИТОВPodkopaevYa. V.ПодкопаевЯ. В.
Russian Federation

Junior Researcher, Laboratory of Culture Medium Development

младший научный сотрудник лаборатории разработки питательных сред

podkopaev@obolensk.orgDomotenkoL. V.ДомотенкоЛ. В.
Russian Federation

PhD (Chemistry), Head of the Laboratory of Culture Medium Development

к.х.н., зав. лабораторией разработки питательных сред

podkopaev@obolensk.orgKruglovA. N.КругловА. Н.
Russian Federation

PhD (Biology), Senior Researcher, Head of the Laboratory of Microbiology

к.б.н., старший научный сотрудник, зав. лабораторией микробиологии

podkopaev@obolensk.orgRyabchenkoI. V.РябченкоИ. В.
Russian Federation

Bacteriologist

врач-бактериолог

podkopaev@obolensk.orgDetushevK. V.ДетушевК. В.
Russian Federation

Junior Researcher, Department of Collection Cultures

младший научный сотрудник отдела коллекционных культур

podkopaev@obolensk.orgMorozovaT. P.МорозоваТ. П.
Russian Federation

Researcher, Laboratory of Culture Medium Development

научный сотрудник лаборатории разработки питательных сред

podkopaev@obolensk.orgShepelinA. P.ШепелинА. П.
Russian Federation

PhD, MD (Biology), Deputy Director

д.б.н., зам. директора по научно-производственной работе

podkopaev@obolensk.orgState Research Center for Applied Microbiology and Biotechnology, RospotrebnadzorФБУН Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии Роспотребнадзора, п. Оболенск, Московская область, РоссияNational Agency for Clinical Pharmacology and PharmacyНациональное агентство клинической фармакологии и фармации, Москва, Россия06122016643893940601201706012017Copyright ©; 2016, Podkopaev Y.V., Domotenko L.V., Kruglov A.N., Ryabchenko I.V., Detushev K.V., Morozova T.P., Shepelin A.P.Copyright ©; 2016, Подкопаев Я.В., Домотенко Л.В., Круглов А.Н., Рябченко И.В., Детушев К.В., Морозова Т.П., Шепелин А.П.2016Podkopaev Y.V., Domotenko L.V., Kruglov A.N., Ryabchenko I.V., Detushev K.V., Morozova T.P., Shepelin A.P.Подкопаев Я.В., Домотенко Л.В., Круглов А.Н., Рябченко И.В., Детушев К.В., Морозова Т.П., Шепелин А.П.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://iimmun.ru/iimm/article/view/453

The State Research Center for Applied Microbiology and Biotechnology has designed two nutrient media — chocolate agar and PBM-agar to isolate pathogens of purulent bacterial meningitis (PBM). In our previous research using collected microbial strains the media were shown to be highly susceptible and to provide the growth of Neisseria meningiti-dis, Streptococcus pneumoniae and Haemophilus influenzae strains, when inoculated with microbial suspensions containing single cells. When isolating Haemophilus influenzae, meningococci, and pneumococci the use of selective additives in both media assures selective isolation of required microorganisms, inhibiting contaminants. The objective of this research was to assess the media in bacteriological tests of clinical samples collected from the upper and lower respiratory tract in humans. The bacteriological plating of throat smear specimens (n = 90) from children and adults at the age of 0 to 66 with disorder of the upper respiratory tract on chocolate agar, PBM-agar and on a control medium in the absence of selective additives resulted in the equal amount of microbial cultures isolated. Of 154 isolated cultures 2, 23 and 9 were attributed to Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae and Haemophilus influenzae, respectively. The plating of throat smears (n = 10) from healthy people at the age of 30 to 55 on the analyzable and control media in the presence of additives allowed us to selectively isolate Haemophilus influenzae and Streptococcus pneumoniae cultures without a quantitative loss, with contaminants inhibited. By their growth characteristics chocolate agar and PBM-agar were highly competitive with reference media being used in clinical practice for isolating main causative agents of purulent bacterial meningitis.

В Государственном научном центре прикладной микробиологии и биотехнологии разработаны две питательные среды для выделения возбудителей гнойных бактериальных менингитов: Шоколадный агар и ГБМ-агар. Ранее в ходе лабораторных исследований с использованием музейных штаммов микроорганизмов было показано, что эти питательные среды обладают высокой чувствительностью и обеспечивают рост штаммов Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae и Haemophilus influenzae при посеве микробных суспензий, содержащих единичные клетки. Использование в обеих средах селективных добавок для выделения гемофильной палочки, менингококка или пневмококка позволяет избирательно выделять искомые микроорганизмы, подавляя рост сопутствующей микрофлоры. В настоящем исследовании проводилась оценка эффективности разработанных питательных сред при бактериологическом исследовании клинических образцов из верхних и нижних дыхательных путей. При бактериологическом посеве 90 образцов мазков из зева, взятых от детей и взрослых в возрасте от 0 до 66 лет с заболеваниями верхних дыхательных путей, на Шоколадный агар, ГБМ-агар и контрольную питательную среду без использования селективных добавок выделено одинаковое число культур микроорганизмов. Из 154 выделенных культур микроорганизмов две принадлежали к виду Neisseria meningitidis, 23 — к виду Streptococcus pneumoniae и 9 культур идентифицировано как Haemophilus influenzae. Бактериологический посев 10 образцов мазков из зева, взятых от здоровых людей в возрасте от 30 до 55 лет, на испытуемые и контрольные среды с селективными добавками позволил без количественных потерь избирательно выделить культуры Haemophilus influenzae и Streptococcus pneumoniae и подавить рост сопутствующей микрофлоры. В ходе исследования Шоколадный агар и ГБМ-агар не уступали по ростовым свойствам контрольным средам, используемым в клинической практике для выделения основных возбудителей гнойных бактериальных менингитов.

Chocolate agarHaemophilus agarPBM-agarselective supplementsculture mediumNeisseria meningitidesStreptococcus pneumoniaHaemophilus influenzaeШоколадный агарГБМ-агарселективные добавкипитательные средыNeisseria meningitidisStreptococcus pneumoniaeHaemophilus influenzaeАбрамцева М.В., Тарасов А.П., Немировская Т.И. Менингококковая инфекция. Современные представления о возбудителе, эпидемиологии, патогенезе и диагностике. Сообщение 1 // Биопрепараты. 2014. № 3. С. 4–10. [Abramtseva M.V., Tarasov A.P., Nemirovskaya T.I. Meningococcal infection: modern insight into epidemiology, pathogenesis, diagnosis and causative agent. Biopreparaty = Biopreparation, 2014, no. 3, pp. 4–10. (In Russ.)]Богданович Т.М., Стецюк О.У., Кречикова О.И., Боронина Л.Г., Катосова Л.К., Фаустова М.Е. Выделение, идентификация и определение чувствительности к антибиотикам Haemophilus influenzae // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2000. Т. 2, № 2. С. 93–109. [Bogdanovich T.M., Stecjuk O.U., Krechikova O.I., Boronina L.G., Katosova L.K., Faustova M.E. Isolation, identification and antimicrobial susceptibility testing of Haemophilus influenzae. Klinicheskaya mikrobiologiya i antimikrobnaya khimioterapiya = Clinical Microbiology and Antimicrobial Chemotherapy, 2000, vol. 2, no. 20, pp. 93–109. (In Russ.)]Кречикова О.И., Козлов Р.С., Богданович Т.М., Стецюк О.У., Суворов М.М., Катосова Л.К., Вишнякова Л.А., Фаустова М.Е. Выделение, идентификация и определение чувствительности к антибиотикам Streptococcus pneumoniae // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2000. Т. 2, № 1. С. 88–98. [Krechikova O.I., Kozlov R.S., Bogdanovich T.M., Stetsyuk O.U., Suvorov M.M., Katosova L.K., Vishnyakova L.A., Faustova M.E. Isolation, identification and antimicrobial sus ceptibility testing of Streptococcus pneumoniae. Klinicheskaya mikrobiologiya i antimikrobnaya khimioterapiya = Clinical Microbiology and Antimicrobial Chemotherapy, 2000, vol. 2, no. 1, pp. 88–98. (In Russ.)]Методические указания МУК 4.2.1887-04. Лабораторная диагностика менингококковой инфекции и гнойных бактериальных менингитов. М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2005. [Metodicheskie ukazaniya MUK 4.2.1887-04. Laboratornaya diagnostika meningokokkovoi infektsii i gnoinykh bakterial’nykh meningitov [Methodical instructions MUK 4.2.1887-04. Laboratory diagnosis of meningococcal infection and purulent bacterial meningitis]. Moscow: Federal Center of Hygiene and Epidemiology, 2005]Подкопаев Я.В., Домотенко Л.В., Морозова Т.П., Храмов М.В., Шепелин А.П. Отечественные питательные среды для диагностики гнойных бактериальных менингитов // Клиническая лабораторная диагностика. 2015. № 5. С. 59–64. [Podkopaev Ya.V., Domotenko L.V., Morozova T.P., Khramov M.V., Shepelin A.P. The national nutrient medium for diagnostic of purulent bacterial meningitis. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika = Clinical Laboratory Diagnostics, 2015, no. 5, pp. 59–64. (In Russ.)]Харит С.М., Перова А.Л. Современные подходы к профилактике пневмококковой инфекции // Медицинский совет. 2015. № 16. С. 64–67. [Kharit S.M., Perova A.L. Modern approaches to the prevention of pneumococcal infection. Meditsinskii sovet = Medical Council, 2015, no. 16, pp. 64–67. (In Russ.)]Laboratory methods for the diagnosis of meningitis caused by Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae and Haemophilus influenzae: WHO manual. Geneva: World Health Organization, 2011. 311 p.