Russian Journal of Infection and ImmunityRussian Journal of Infection and ImmunityИнфекция и иммунитет2220-76192313-7398SPb RAACI18110.15789/2220-7619-2014-3-229-234ORIGINAL ARTICLESОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИDEVELOPMENT OF FUSION RECOMBINANT PROTEINS BASED ON VP6 AND VP8 OF HUMAN ROTAVIRUS AСОЗДАНИЕ ГИБРИДНЫХ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ НА ОСНОВЕ БЕЛКОВ VP6 И VP8 РОТАВИРУСА ЧЕЛОВЕКА ГРУППЫ АDukhovlinovI. V.ДуховлиновИ. В.
Russian Federation

PhD (Biology), Head of the Laboratory of Genetic Engineering of Vaccines, Research Institute of Highly Pure Biopreparations

к.б.н., начальник лаборатории генетической инженерии вакцин ФГУП ГосНИИ ОЧБ ФМБА России

BogomolovaE. G.БогомоловаЕ. Г.
Russian Federation

Junior Researcher, Laboratory of Genetic Engineering of Vaccines, Research Institute of Highly Pure Biopreparations

младший научный сотрудник ФГУП ГосНИИ ОЧБ ФМБА России

FedorovaE. A.ФедороваЕ. А.
Russian Federation

Researcher, Laboratory of Genetic Engineering of Vaccines, Research Institute of Highly Pure Biopreparations

научный сотрудник ФГУП ГосНИИ ОЧБ ФМБА России

SimbirtsevA. S.СимбирцевА. С.
Russian Federation

PhD, MD (Medicine), Director of the Research Institute of Highly Pure Biopreparations

д.м.н., профессор, директор ФГУП ГосНИИ ОЧБ ФМБА России

simbirtsev@hpb-spb.comResearch Institute of Highly Pure Biopreparations, St. PetersburgФГУП Государственный НИИ особо чистых биопрепаратов ФМБА России, Санкт-Петербург15082014432292341508201415082014Copyright ©; 2014, Dukhovlinov I.V., Bogomolova E.G., Fedorova E.A., Simbirtsev A.S.Copyright ©; 2014, Духовлинов И.В., Богомолова Е.Г., Федорова Е.А., Симбирцев А.С.2014Dukhovlinov I.V., Bogomolova E.G., Fedorova E.A., Simbirtsev A.S.Духовлинов И.В., Богомолова Е.Г., Федорова Е.А., Симбирцев А.С.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://iimmun.ru/iimm/article/view/181

Rotaviruses are the most frequent cause of children enteritis. This infection often leads to severe dehydration of organism. Many infectious diseases are accompanied by fluid loss being the most common cause of death. Nowadays an early vaccination is considered to be the most effective way for prevention of rotavirus infection. However attenuated alive vaccines are used for this purpose which can result in different complications. The candidate vaccine presented in this study was designed on the basis of recombinant fusion proteins — the crucial active agents for development of immune response against rotaviruses. As part of the study the following steps were taken: the design of fusion proteins VP6VP8 and FliCVP6VP8; protocol adjustment for induction of genes encoding these proteins expression, which yields in high level of the protein with minor expenditures; production and purification of recombinant proteins VP6VP8 and FliCVP6VP8 with metal affinity chromatography.

Ротавирусная инфекция является одной из наиболее распространенных причин детских энтеритов. Инфицирование этим вирусом зачастую приводит к выраженной дегидратации организма ребенка. Обезвоживание организма сопровождает многие инфекционные заболевания и является самой распространенной причиной смертности. На сегодняшний день самым эффективным способом профилактики ротавирусной инфекции считается своевременная вакцинация. Однако вакцинация проводится с применением живых аттенуированных вакцин, что может приводить к развитию различных осложнений. Создание кандидатной вакцины в этой работе осуществлялось на основе рекомбинантных гибридных белков, являющихся активными агентами при развитии протективного иммунитета против ротавируса. В ходе исследования созданы гибридные белки VP6VP8 и FliCVP6VP8, подобран оптимальный протокол индукции генов, кодирующих данные белки. Белки VP6VP8 и FliCVP6VP8 наработаны и очищены с использованием металлоаффинной хроматографии.

rotavirus gastroenteritisvaccinerecombinant fusion proteins.ротавирусный гастроэнтеритвакцинарекомбинантные гибридные белки.1. Balaram P., Kien P.K., Ismail A. Toll-like receptors and cytokines in immune responses to persistent mycobacterial a 1. nd Salmonella infections. Int. J. Med. Microbiol., 2009, vol. 299, no. 3, pp. 177–185.2. Bishop R.F., Davidson G.P., Holmes I.H., RuckB.J. Virus particles in epithelial cells of duodenal mucosa from children with acute non-bacterial gastroenteritis. Lancet 2, 1973, pp. 1281–1283.3. Bruijning-Verhagen P., Mangen J.M.-J., Felderhof M., Hartwig G.N., van Houten M., Winkel L., de Waal J.W., Bonten J.M.M. Targeted rotavirus vaccination of high-risk infants; a low cost and highly cost-effective alternative to universal vaccination. BMC Medicine, 2013, vol. 11, p. 112.4. Dennehy H.P. Rotavirus Vaccines: an overview. Clin. Microbiol. Rev., 2008, pp. 198–208.5. Flewett T.H., Bryden A.S., Davies H.A. Virus particles in gastroenteritis. Lancet, 1973, vol. 302, iss. 7844, p. 1497.6. Invitrogen. Ni-NTA purification system. User manual. Catalog nos. K950-01, K951-01, K952-01, K953-01, K954-01, R901-01, R901-10, R 901-15. Version C. 25-0496, 2006, 32 p.7. Laemmli U.K. Cleavage of Structural Proteins during the Assembly of the Head of Bacteriophage T4. Nature, 1970, vol. 227, pp. 680–685.8. Majumder K. Ligation-free gene synthesis by PCR: synthesis and mutagenesis at multiple loci of a chimeric gene encoding OmpA signal peptide and hirudin. Gene, 1992, vol. 110, no. 1, pp. 89–94.9. Patton J.T. Rotavirus diversity and evolution in the post-vaccine world. Discovery Med., 2012, vol. 13, no. 68, pp. 85–97.10. Schnagl R.D., Holmes I.H. Characteristics of the genome of human infantile enteritis virus (Rotavirus). J. Virol., 1976, vol. 19, no. 1, pp. 267–270.11. Studier F.W. Protein production by auto-induction in high density shaking cultures. Protein Expr. Purif., 2005, vol. 41, no. 1, pp. 207–234.