Russian Journal of Infection and ImmunityRussian Journal of Infection and ImmunityИнфекция и иммунитет2220-76192313-7398SPb RAACI149710.15789/2220-7619-ADS-1497ORIGINAL ARTICLESОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ2018–2019 antiviral drug sensitivity of the influenza virus strains isolated from various regions of KazakhstanЧувствительность к противовирусным препаратам штаммов вируса гриппа, выделенных в различных регионах Казахстана в 2018–2019 гг.https://orcid.org/0000-0002-1139-9868GlebovaT. I.ГлебоваТ. И.
Kazakhstan

Tatyana I. Glebova - PhD (Biology), Leading Researcher, Laboratory of Viral Biochemistry, Research and Production Center for Microbiology and Virology.

050010, Almaty, Bogenbay batyr str., 105.

Phone: +7 (727) 291-84-97. Fax: +7 (727) 291-84-96.

Глебова Татьяна Ивановна – кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории биохимии вирусов.

050010, Алматы, ул. Богенбай батыра, 105.

Тел.: 8 (727) 291-84-97. Факс: 8 (727) 291-84-96.

taty1962@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-4094-137XKlivleyevaN. G.КливлееваН. Г.
Kazakhstan

PhD (Biology), Head of the Laboratory of Viral Biochemistry, Research and Production Center for Microbiology and Virology.

050010, Almaty, Bogenbay batyr str., 105.

Кандидат биологических наук, заведующая лабораторией биохимии вирусов.

050010, Алматы, ул. Богенбай батыра, 105.

i_nailya@list.ruhttps://orcid.org/0000-0002-9809-6674LukmanovaG. V.ЛукмановаГ. В.
Kazakhstan

Leading Researcher, Laboratory of Viral Biochemistry, Research and Production Center for Microbiology and Virology.

050010, Almaty, Bogenbay batyr str., 105.

Ведущий научный сотрудник лаборатории биохимии вирусов.

050010, Алматы, ул. Богенбай батыра, 105.

gal_l@bk.ruhttps://orcid.org/0000-0001-6526-956XSaktaganovN. T.СактагановН. Т.
Kazakhstan

Researcher, Laboratory of Viral Biochemistry, Research and Production Center for Microbiology and Virology.

050010, Almaty, Bogenbay batyr str., 105.

Магистр ветеринарии, научный сотрудник лаборатории биохимии вирусов.

050010, Алматы, ул. Богенбай батыра, 105.

nsaktaganov1984@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8959-126XBaimukhametovaA. M.БаймухаметоваА. М.
Kazakhstan

Assistant, Laboratory of Viral Biochemistry, Research and Production Center for Microbiology and Virology.

050010, Almaty, Bogenbay batyr str., 105.

Бакалавр общественного здравоохранения, младший научный сотрудник, лаборант лаборатории биохимии вирусов.

050010, Алматы, ул. Богенбай батыра, 105.

a_baimukhametova@mail.ruResearch and Production Center for Microbiology and VirologyНаучно-производственный центр микробиологии и вирусологии05012022116115911660306202030052021Copyright ©; 2021, Glebova T.I., Klivleyeva N.G., Lukmanova G.V., Saktaganov N.T., Baimukhametova A.M.Copyright ©; 2021, Глебова Т.И., Кливлеева Н.Г., Лукманова Г.В., Сактаганов Н.Т., Баймухаметова А.М.2021Glebova T.I., Klivleyeva N.G., Lukmanova G.V., Saktaganov N.T., Baimukhametova A.M.Глебова Т.И., Кливлеева Н.Г., Лукманова Г.В., Сактаганов Н.Т., Баймухаметова А.М.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://iimmun.ru/iimm/article/view/1497

Influenza is a serious public health problem. The ability of influenza virus to change upon replication is the most serious issue for practical medicine and virology, which can fundamentally alter virus biological properties, such as infectivity and virulence. The high mutational variability of influenza viruses can contribute to rapidly emerging drug resistance. Therefore, the study of antiviral drug sensitivity among influenza viruses is necessary to justify proper drug use for treatment and prevention of influenza infection. The aim of the study was to examine antiviral drug susceptibility of influenza A/H1N1 and B virus strains isolated from various regions of Kazakhstan in the years 2018–2019. Materials and methods. The susceptibility analysis of 20 strains of influenza A/H1N1 and B viruses was carried out by using chemotherapeutic agents including Remantadine, Tamiflu, Arbidol, and Ingavirin. Viruses were cultured in the allantoic cavity of developing 10-day-old chicken embryos for 48 hours at 36оC. The hemagglutinating activity was determined according to the standard method on 96-well plates using 0.75% chicken red blood cell suspension; the infectivity was calculated by the Reed–Muench method. The susceptibility of virus strains to different concentrations of antiviral drugs was evaluated by the level of virus reproductive suppression of 100 lg EID50/0.2 ml in chicken embryos. Statistical analysis was performed using Microsoft Office Excel 2010 software. Results. A study of susceptibility to chemotherapeutic agents demonstrated heterogeneity of influenza A and B virus population isolated in Kazakhstan during the 2018–2019 period. The susceptibility to tamiflu was found in all Kazakhstan strains of influenza A/H1N1 virus and three type B strains (inhibitory concentration was 0.44–25.38 μg/mL). The reproduction of most viruses was effectively inhibited by Tamiflu at a concentration of 0.68–3.23 μg/mL. The inhibitory concentration for three strains of A/H1N1 virus was 7.23–25.38 μg/mL. Remantadine inhibited reproduction of viruses at higher doses (12.60–25.55 μg /mL). All investigated viruses were resistant to Arbidol and Ingavirin. A single type B influenza virus strain was found to be weakly susceptible to Ingavirin. Conclusion. The heterogeneity of influenza virus population in susceptibility to antiviral drugs suggest a need for constant epidemiological surveillance in order to identify drug-resistant variants.

Грипп представляет серьезную проблему для общественного здравоохранения. Для практической медицины и вирусологии самой серьезной проблемой является способность возбудителя гриппа к модификации в процессе репликации, что может приводить к кардинальному изменению таких свойств вируса, как инфекционность и вирулентность. Высокая мутационная изменчивость вирусов гриппа может способствовать быстрому приобретению устойчивости к лекарственным препаратам. Поэтому изучение чувствительности вирусов гриппа к противовирусным препаратам необходимо для обоснования надлежащего применения лекарственных средств для терапии и профилактики гриппозной инфекции. Цель данного исследования — изучение чувствительности казахстанских штаммов вирусов гриппа А/Н1N1 и В, выделенных в различных регионах Казахстана в 2018–2019 гг., к противовирусным препаратам. Материалы и методы. Анализ чувствительности 20 штаммов вируса гриппа А/Н1N1 и В проводили со следующими химиопрепаратами: Ремантадин, Тамифлю, Арбидол и Ингавирин. Вирусы культивировали в аллантоисной полости развивающихся 10-дневных куриных эмбрионов в течение 48 ч при 36оС. Гемагглютинирующую активность определяли по общепринятой методике на 96-луночных планшетах с использованием 0,75% взвеси куриных эритроцитов, инфекционность вычисляли по методу Reed L. и Muench H. Чувствительность штаммов вируса к различным концентрациям противовирусных препаратов оценивали по степени подавления репродукции 100 lg ЭИД50/0,2 мл вируса на куриных эмбрионах. Статистический анализ выполняли с помощью программного обеспечения Microsoft Office Excel 2010. Результаты. Изучение чувствительности к химиопрепаратам показало гетерогенность популяции казахстанских вирусов гриппа А и В 2018–2019 гг. по этому признаку. Чувствительность к препарату Тамифлю обнаружена у всех казахстанских штаммов вируса гриппа А/Н1N1 и трех штаммов вируса гриппа В (ингибирующая концентрация составляла 0,44–25,38 мкг/мл). Репродукция большинства вирусов эффективно ингибировалась препаратом Тамифлю в концентрации 0,68–3,23 мкг/мл. Для трех штаммов вируса А/Н1N1 ингибирующая концентрация составила 7,23–25,38 мкг/мл. Ремантадин подавлял репродукцию вирусов в более высоких дозах (12,60–25,55 мкг/мл). К Арбидолу и Ингавирину все исследованные вирусы оказались резистентными. Один штамм вируса гриппа типа В оказался слабо чувствительным к Ингавирину. Выводы. Гетерогенность популяции вирусов гриппа по чувствительности к противовирусным препаратам указывает на необходимость постоянного эпидемического надзора для выявления лекарственно-устойчивых вариантов.

influenza virusresistancesensitivityArbidolIngavirinRemantadineTamifluвирус гриппарезистентностьчувствительностьАрбидолИнгавиринРемантадинТамифлюThe work was carried out under the scientific and technical program of the Committee of Science of the Ministry of Science and Education of the Republic of Kazakhstan No. BR10965178 " Development of original domestic drugs with antiviral activity efficient against COVID-19 and influenza".Работа выполнена в рамках научно-технической программы комитета науки Министерства науки и образования Республики Казахстан № BR10965178 «Разработка оригинальных отечественных препаратов с противовирусной активностью, эффективных в отношении COVID-19 и гриппа»1. ВОЗ. Грипп URL: https://www.who.int/ru/news-room/fact-sheets/detail/influenza-(seasonal)2. ВОЗ. Грипп. Стандарты эпиднадзора за управляемыми инфекциями. URL: http://www.who.int/influenza/resources/documents/influenza_surveillance_manual/en3. Гланц С. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. Ю.А. Данилова. М.: Практика, 1998. 459 с.4. Грипп А/H1N1 как типичная эмерджетная инфекция. Под ред. О.И. Киселева, В.П. Малого, В.В. Зарубаева. URL: http://www.infomedik.info/med/a21022601.htm5. Грипп: эпидемиология, клиника, профилактика. Грипп — взгляд вирусолога и лечащего врача. Под ред. О.И. Киселева, Л.М. Цыбаловой, В.И. Покровского. М.: МИА, 2012. 496 с.6. Деева Э.Г., Мельникова Т.И. Антивирусные препараты для профилактики и лечения гриппа // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2009. № 4. С. 37–43.7. Деева Э.Г., Мельникова Т.И., Сологуб Т.В., Киселев О.И. Химиопрепараты для лечения гриппа — современное состояние // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2013. № 5. С. 26–32.8. Еропкин М.Ю., Брюзжикова Т.С., Гудкова Т.М., Коновалова Н.И., Смирнова М.Ю., Соловский М.В. Синтез и биологическая активность водорастворимых полимерных комплексов Арбидола // Химико-фармацевтический журнал. 2009. Т. 43, № 10. С. 37–31.9. Железникова Г.Ф., Иванова В.В., Монахова Н.Е. Варианты иммунопатогенеза острых инфекций у детей. СПб.: Фолиант, 2007. 256 с.10. Зарубаев В.В., Анфимов П.М., Штро А.А., Гаршинина А.В., Мелешкина И.А., Карпинская Л.А., Козелецкая К.Н., Киселев О.И. Разработка новых препаратов против вируса гриппа на основе синтетических и природных соединений // Вопросы вирусологии. 2012. Т. 57, № 6. С. 30–36.11. Киселев О.И., Малеев В.В., Деева Э.Г., Ленева И.А., Селькова Е.П., Осипова Е.А., Обухов А.А., Надоров С.А., Куликова Е.В. Клиническая эффективность препарата Арбидол (умифеновир) в терапии гриппа у взрослых: промежуточные результаты многоцентрового двойного слепого рандомизированного плацебо контролируемого исследования АРБИТР // Терапевтический архив. 2015. № 1. С. 88–96. doi:10.17116/terarkh201587188-9612. Логинова С.Я., Борисевич С.В., Максимов В.А., Бондарев В.П., Небольсин В.Е. Изучение лечебной эффективности нового отечественного препарата Ингавирин® в отношении возбудителя гриппа А (H3N2) // Антибиотики и химиотерапия. 2008. Т. 53, № 7–8. С. 27–30.13. Романовская А.А., Дурыманов А.М., Шаршов К.А., Зайковская А.В., Суслопаров И.М., Шестопалов А.М., Ленева И.А., Дроздов И.Г. Изучение чувствительности вирусов гриппа А(H1N1), вызвавших заболевания в апреле–мае 2009 года, к противовирусным препаратам в культуре клеток MDCK // Антибиотики и химиотерапия. 2009. Т. 54, № 5–6. С. 41–47.14. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Под ред. Р.У. Хабриева. М.: ОАО «Издательство “Медицина”», 2005. 832 с.15. Соболев И.А., Романовская А.А., Курская О.Г., Дурыманов А.Г., Шестопалов А.М., Ильичева Т.Н. Чувствительность вирусов гриппа (сезон 2008–2009 гг.) к противовирусным препаратам // Вестник НГУ. Серия «Биология, клиническая медицина». 2011. Т. 9, № 3. С. 13–19.16. Федякина И.Т., Щелканов М.Ю., Дерябин П.Г., Ленева И.А., Гудова Н.В., Кондратьева Т.В., Львов Д.К. Изучение чувствительности пандемических вирусов гриппа А 2009 H1N1 и высоковирулентных вирусов гриппа птиц А (H5N1) к противогриппозным химиопрепаратам // Антибиотики и химиотерапия. 2011. Т. 56, № 3–4. С. 3–9.17. Шмелева Н.П., Грибкова Н.В., Яцышина С.Б., Миненко А.Н. Чувствительность к ремантадину и озелтамивиру вирусов гриппа А, изолированных на территории Республики Беларусь // Военная медицина. 2008. № 4. С. 95–98.18. Beigel J., Bray M. Current and future antiviral therapy of severe seasonal and avian influenza. Antivir. Res., 2008, no. 78, pp. 91– 102. doi: 10.1016/j.antiviral.2008.01.00319. Choi W., Yang I., Kim S., Lee N., Kwon M., Lee J., Kang C. The Emergence of oseltamivir-resistant seasonal influenza A (H1N1) virus in Korea during the 2008–2009 season. Osong Public Health Res. Perspect., 2011, vol. 2, no 3, pp. 178–185. doi: 10.1016/j.phrp.2011.11.04220. De Clercq E. Antiviral agents active against influenza A viruses. Nat. Rev. Drug Discov., 2006, vol. 5, no. 12, pp. 1015–1025. doi: 10.1038/nrd217521. Gregory V., Bennett M., Orkhan M.H., Al Hajjar S., Varsano N., Mendelson E., Zambon M., Ellis J., Hay A., Lin Y.P. Emergence of influenza A H1N2 reassortant viruses in the human population during 2001. Virology, 2002, vol. 300, no. 1, pp. 1–7. doi: 10.1006/viro.2002.151322. Hay A.J., Wolstenholme A.J., Skehel J.J. The molecular basis of the specific anti-influenza action of amantadine. The EMBO Journal, 1985, vol. 4, no. 11, pp. 3021–3024. doi: 10.1002/j.1460-2075.1985.tb04038.x23. Korotetsky I.S., Zubenko N.V., Shvidko S.V. Genetic changes in influenza A virus genes responsible for formation of drug resistance phenotype. J. Hum. Virol. Retrovirol., 2016, vol. 3, no. 4: 00098. doi: 10.15406/jhvrv.2016.03.0009824. Nakazawa M., Kadowaki S.E., Watanabe I., Kadowaki Y., Takei M., Fukuda H. PA subunit of RNA polymerase as a promising target for anti-influenza virus agents. Antiviral. Res., 2008, no. 78, pp. 194–201. doi: 10.1016/j.antiviral.2007.12.01025. Reed L., Muench H. A simple method of estimation fifty percent and pints. J. Amer. Hyg., 1938, vol. 27, no. 3, pp. 493–497. doi: 10.1093/oxfordjournals.aje.a11840826. WHO Global Influenza Surveillance Network. Manual for the laboratory diagnosis and virological surveillance of influenza. Geneva: WHO Press, 2011. 153 p.27. WHO. Influenza A(H1N1) virus resistance to oseltamivir — 2008/2009 influenza season, northern hemisphere. WHO, 2009. 4 p.28. Xu X. International circulation of human influenza A (H1N2) reassortant viruses during the 2001-2002 influenza season. J. Infect. Dis., 2002, vol. 186, no. 10, pp. 490–493. doi: 10.1086/344738