Sergei N. Shchelkunov - PhD, MD (Biology), Professor, Head Researcher, Department of Genomic Research, SRC VB VECTOR.
630559, Novosibirsk Region, Koltsovo.
Phone: +7 (903) 939-94-80 (mobile); Fax: +7 (383) 336-74-09
Щелкунов Сергей Николаевич - доктор биологических наук, профессор, главный научный сотрудник отдела геномных исследований.
630559, Новосибирская область, п. Кольцово.
Тел.: 8 (903) 939-94-80 (моб.); Факс: 8 (383) 336-74-09
eLibrary SPIN: 9138-7174
PhD (Biology), Leading Researcher, Department of Microorganisms Collection, SRC VB VECTOR.
630559, Novosibirsk Region, Koltsovo.
Кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник отдела «Коллекция микроорганизмов».
630559, Новосибирская область, п. Кольцово.
PhD (Biology), Senior Researcher, Department of Microorganisms Collection, SRC VB VECTOR.
630559, Novosibirsk Region, Koltsovo.
Кандидат биологических наук, старший научный сотрудник отдела «Коллекция микроорганизмов».
630559, Новосибирская область, п. Кольцово.
Junior Researcher, Department of Genomic Research, SRC VB VECTOR.
630559, Novosibirsk Region, Koltsovo.
Младший научный сотрудник отдела геномных исследований.
630559, Новосибирская область, п. Кольцово.
Junior Researcher, Department of Genomic Research, SRC VB VECTOR.
630559, Novosibirsk Region, Koltsovo.
Младший научный сотрудник отдела геномных исследований.
630559, Новосибирская область, п. Кольцово.
Leading Researcher, Department of Microorganisms Collection, SRC VB VECTOR.
630559, Novosibirsk Region, Koltsovo.
Ведущий научный сотрудник отдела «Коллекция микроорганизмов».
630559, Новосибирская область, п. Кольцово.
Vaccinia virus had played a key role in the global smallpox eradication. However, in case of mass vaccination with various Vaccinia virus strains severe side effects were revealed sometimes ending up with lethal outcomes, especially in immunocompromised humans. Hence, in 1980 the World Health Organization recommended to cancel smallpox vaccination after declaring about smallpox eradication. Over the last 40 years, human population virtually lost immunity not only against smallpox, but also against other zoonotic orthopoxvirus infections, such as monkeypox, cowpox, buffalopox, and camelpox. All of them pose a represent increasing threat to human health and heighten a risk of emerging highly contagious viruses due to natural evolution of previous zoonotic orthopoxviruses. In order to prevent development of small outbreaks into spreading epidemics and, thus, to decrease a risk of emergence due to natural evolution of highly pathogenic for humans orthopoxviruses, efforts should be applied to develop safe new generation live vaccines based on Vaccinia virus with target virulence genes inactivation. These strains should be examined in laboratory animal models inoculated via different routes. Currently, Vaccinia virus often becomes attenuated to create live recombinant vaccines due to inserting target DNA sequences into the virus virulence genes resulting in their inactivation. Vaccinia virus strain LIVP used in the Russian Federation as smallpox vaccine as well as derivative attenuated variant LIVP-GFP created by using genetic engineering methods with inactivating its thymidine kinase gene were examined. Such viruses were intracerebrally inoculated into suckling mice at doses of 101 or 102 PFU/animal for neurovirulence assessment. Adult mice were infected intranasally, subcutaneously or intradermally at doses of 107 or 108 PFU/animal and clinical manifestations were analyzed for 14 days. On the 28th day after the onset, blood serum samples were collected from individual mice to measure virus specific antibody level by using ELISA. It was shown that recombinant Vaccinia virus strain LIVP-GFP displayed markedly lowered neurovirulence and pathogenicity for mice as compared to parental LIVP. Finally, intradermal route turned out to demonstrate the most safe and effective profile for immunization with both examined Vaccinia virus strains.
Вирус осповакцины сыграл ключевую роль в глобальной ликвидации натуральной оспы. Однако при массовой иммунизации вакцинами на основе разных штаммов вируса осповакцины выявлялись случаи тяжелых побочных реакций, иногда завершающиеся летальным исходом, особенно у людей с ослабленной иммунной системой. Поэтому после объявления в 1980 году о ликвидации оспы Всемирная организация здравоохранения рекомендовала прекратить противооспенную вакцинацию. За прошедшие 40 лет человеческая популяция практически утратила иммунитет не только к натуральной оспе, но и к зоонозным ортопоксвирус-ным инфекциям, таким как оспа обезьян, оспа коров, оспа буйволов, оспа верблюдов. Поэтому в последние годы на разных континентах стали возникать вспышки ортопоксвирусных инфекций человека, которые имеют опасность перерасти в будущем в распространенные эпидемии. В связи с этим возникла необходимость получения безопасных аттенуированных штаммов вируса осповакцины путем направленной инактивации генов вирулентности этого вируса, а также изучения на лабораторных моделях проявления их свойств патогенности и иммуногенности в зависимости от способа введения вирусов в организм животных. Аттенуация вируса осповакцины в настоящее время часто достигается при создании живых рекомбинантных поливалентных вакцин в результате встройки целевых последовательностей ДНК в гены вирулентности векторного вируса, что приводит к их инактивации. Объектами исследования в данной работе стали штамм LIVP вируса осповакцины, используемый в Российской Федерации для противооспенной вакцинации, и полученный на его основе методами генетической инженерии аттенуированный вариант LIVP-GFP, у которого нарушен вирусный ген тимидинкиназы. Данные вирусы вводили мышам-сосункам линии BALB/c интрацеребрально в дозах 101 или 102 БОЕ/животное для оценки нейровирулентности сравниваемых штаммов вируса осповакцины. Взрослых мышей заражали этими вирусами интраназально, подкожно или внутрикожно в дозах 107 или 108 БОЕ/животное и контролировали в течение 14 суток наличие клинических проявлений вирусной инфекции. Через 28 суток от начала эксперимента получали индивидуальные сыворотки крови мышей и методом ИФА определяли в них уровень вирус-специфичных антител. Показано, что рекомбинантный штамм LIVP-GFP обладает значительно сниженной нейровирулентностью и патогенностью для мышей по сравнению с исходным штаммом LIVP. Наиболее безопасным и эффективным способом иммунизации для обоих изученных штаммов вируса осповакцины оказалось внутрикожное введение.