Local cytokines and vaginal microbiota profiles in various pregnancy outcomes

Full Text

Введение

Вагинальный микробиом является важным фактором вынашивания беременности. В настоящее время в репродуктивном возрасте выделено 5 основных типов микробных сообществ влагалища (Community State Type — CST) по виду доминирующего микроорганизма, в четырех из которых преобладают определенные виды Lactobacillus spp. (L. crispatus, L. gasseri, L. iners, L. jensenii) и в одном, подразделяющимся на подтипы, — нелактобациллярная микрофлора [11]. На протяжении репродуктивного периода может происходить смена типа микробного сообщества у одной и той же женщины под воздействием гормональных факторов, например, в течение менструального цикла или с наступлением беременности, при изменении гигиенических привычек и сексуальной активности. Во время беременности, в отличие от других периодов репродуктивной жизни женщины, вагинальное микробное сообщество отличается более высокой стабильностью и низким микробным разнообразием [1, 7]. Отмечена связь предшествующих родов или потерь беременности в анамнезе с типом вагинальной микробиоты в последующей беременности [6, 17]. В каждом микробном сообществе имеются бактерии, продуктами метаболизма которых являются молочная кислота и различные бактериоцины, препятствующие колонизации патогенами вагинального эпителия [18]. Дисбиотические состояния вагинальной микробиоты оказывают негативное влияние на течение беременности, способствуя возникновению таких осложнений, как хориоамнионит, преждевременное излитие околоплодных вод, а также досрочное завершение беременности — преждевременные роды (ПР) — и, по данным некоторых авторов, выкидыши [9, 19].

В последние годы внимание исследователей привлекает роль локального иммунного воспаления нижних отделов репродуктивного тракта как одного из ключевых факторов, влияющих на успешное течение беременности. Во время гестации иммунная система женщины претерпевает определенные изменения, которые позволяют приспособиться к появлению и развитию полуаллогенного плода. В крови, вагинальной среде, цервикальной слизи происходит изменение профилей цитокинов, белков-медиаторов межклеточного взаимодействия, которые вырабатываются широким спектром клеток и влияют на гуморальный и клеточный иммунитет, регулируя важнейшие физиологические процессы в организме, в том числе репродуктивные.

Микроорганизмы вагинального биотопа оказывают влияние на систему местного иммунитета, изменяют уровни про- и противовоспалительных цитокинов. Так, D-изомер молочной кислоты, который является метаболитом L. crispatus, L. gasseri и L. jensenii определяет экспрессию генов локального иммунитета [10]. Отмечена ассоциативная связь доминирования L. iners с повышением уровня экспрессии мРНК генов IL-8, TLR4, IL-10, CD69, CD45 и снижению уровня экспрессии мРНК IL-18 по сравнению с вагинальной микробиотой, в которой доминирует L. crispatus у здоровых небеременных женщин [2]. Изменения в составе микробиоты влагалища могут нарушать баланс цитокинов и приводить к осложнениям беременности [21]. Понимание процессов изменения профиля цитокинов во время беременности возможно будет являться важным фактором прогнозирования неблагоприятных исходов.

Цель данного исследования: определить профили локальных цитокинов и состав вагинальной микробиоты у пациенток с различными исходами беременности.

Материалы и методы

Всего было обследовано 203 женщины, вставшие на учет в женскую консультацию СПб ГБУЗ «Городская поликлиника №122» при сроке беременности до 10 недель в возрасте от 18 до 42 лет. Микробиологическое исследование в каждом триместре проведено всем беременным. Последовательно в каждом триместре все виды запланированных молекулярно-генетических тестов для оценки локального воспаления с учетом валидности исследуемых образцов удалось выполнить у 52 обследуемых.

Таким образом, в данное проспективное когортное исследование были включены 52 пациентки. В зависимости от исхода беременности было выделено три группы: I группа — срочные роды (СР) (n = 42); II группа — ПР (n = 7) и III группа — самопроизвольный выкидыш (n = 3). Микробиологические исследования проведены в ФГБНУ «НИИ АГиР им. Д.О. Отта». У всех пациенток выполнено общеклиническое обследование, рН-метрия, микроскопия вагинального отделяемого, а также с помощью молекулярно-генетического теста проведен анализ вагинальной микробиоты и цитокинового профиля при постановке на учет и в последующих II и III триместрах беременности. У 42 женщин беременность завершилась СР. У 7 пациенток беременность завершилась ПР в сроки 33–36 недель. У 3 женщин произошел выкидыш при сроках 9–10 недель, у них было взято 3 образца только при постановке на учет. Количественный и качественный анализ вагинальной микробиоты проводился с помощью молекулярно-биологических методов с использованием теста «Флороценоз Комплекс» (ООО «Интерлабсервис», Россия) и теста «Типирование лактобактерий» (ООО «НПО “ДНК Технология”», Россия). Клинический материал получали с заднебокового свода влагалища двумя стерильными ватными зондами. Один зонд помещали в пробирку с транспортной средой для стабилизации РНК (СТОР-ЭКС), вторым зондом материал наносили на два предметных стекла для окраски по Граму и метиленовым синим для микроскопического исследования.

Для оценки уровня локального воспаления влагалища использовали тест «ИммуноКвантекс» (ООО «НПО “ДНК Технология”»). Методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) в реальном времени изучали относительный уровень экспрессии мРНК генов врожденного иммунитета, кодирующих синтез IL-1β, IL-10, IL-18, TNFα, TLR4, GATA3, CD68. Валидность теста определяли по уровню референс-генома B2M. Интегральный показатель — индекс воспаления (ИВ) и отношение перечисленных параметров — рассчитывался автоматически с помощью программного обеспечения ДТ прайм: наличие локальной воспалительной реакции считали при ИВ > 60%, «нельзя исключить воспаление» — при ИВ 50–60%, отсутствие воспаления — при ИВ < 50%.

Статистические методы. Полученные данные обрабатывались с использованием программы SPSS v.27. Проверка на нормальность распределения определялась методом Шапиро–Уилка. Распределение в группах исходов беременности отличалось от нормального, поэтому использовался критерий Краскера–Уоллиса для независимых выборок, скорректированных поправкой Бонферрони. Статистическая значимость определялась при р < 0,05.

Результаты

Возраст обследуемых беременных при постановке на учет был сопоставим в трех группах и составил 32,4±5,5 лет в I группе, 33,9±6,0 лет во II группе и 33,3±9,2 лет в III группе. Первобеременных в I группе было 28,6% (12/42), во II группе — 14,3% (1/7), в III группе — 1 пациентка. Преждевременные роды в анамнезе в I группе встречались в 2,4% (1/42), во II группе — у 42,9% (3/7) и отсутствовали в III группе. Вмешательство в полость матки (от 1 до 4) наблюдалось у 38,1% (16/42) пациенток I группы, у 42,9% (3/7) пациенток II группы и у 1 пациентки в III группе. Воспалительные заболевания органов малого таза в анамнезе (эндометрит, сальпингоофорит) отмечались у 9,5% (4/42) пациенток I группы, у 14,3% (1/7) пациенток II группы и у 1 пациентки III группы. У 1 беременной из II группы беременность наступила в результате экстракорпорального оплодотворения (ЭКО), у всех остальных — спонтанная беременность.

Во II группе беременность у 6 женщин завершилась поздними преждевременными родами (в 35–36 недель) и у 1 — ранними преждевременными родами (33 недели), согласно классификации ВОЗ. В III группе беременность прервалась в 9–10 недель.

При постановке на учет по беременности в основном женщины не предъявляли жалоб. Лишь у 2 женщин были жалобы на выделения из половых путей, зуд в области вульвы беспокоил 4 пациенток. В I триместре беременности у 75% (39/52) беременных был физиологический микробиоценоз влагалища, у 25% (16/52) установлены следующие дисбиотические заболевания влагалища: бактериальный вагиноз (БВ) — у 9,6% (5/52) женщин, кандидозный вульвовагинит — у 9,6% (5/52), вагинит — у 3,9% (2/52). Возбудители инфекций, передаваемых половым путем (ИППП), выявлены не были.

Во всех образцах вагинальной микробиоты в I триместре присутствовали лактобациллы. В большинстве образцов виды Lactobacillus spp. доминировали. Нелактобациллярный тип был представлен анаэробными микроорганизмами (G. vaginalis и Fannyhessea vaginae (A. vaginae)) и выявлен у 7,1% (3/42) и у 28,6% (2/7) беременных в I и II группах соответственно. На рис. 1 представлены типы вагинального сообщества по доминирующим видам микроорганизмов в исследуемых группах при постановке на учет по беременности. Доминирующим считали вид микроорганизма, присутствующий в составе вагинального биотопа, количество которого относительно общей бактериальной массы составляло 50% и более.

 

Рисунок 1. Распределение типов вагинального микробного сообщества по доминирующему виду микроорганизмов в исследуемых группах при постановке на учет

Figure 1. The distribution of different types of vaginal microbial communities based on the dominant species of microorganisms in the 1st trimester

 

Как видно из данных, приведенных на рис. 1, в I триместре беременности L. crispatus в качестве доминирующего вида встречался только в I группе и составил 35,7% (15/42). Вторым по частоте встречаемости был вид L. jensenii — 21,4% (9/42). Далее с одинаковой частотой следовали виды L. iners и L. gasseri — 16,7% (7/42). У одной пациентки доминировал вид L. acidophilus — 2,4% (1/42). Во II группе доминирующим видом лактобацилл у 3 беременных был вид L. iners (42,9%), у 2 человек — L. jensenii (28,6%) и у 2 тип микробного сообщества был определен как нелактобациллярный (28,6%). В III группе (В) в 2 образцах вагинальной микробиоты доминировали L. iners и в 1 случае — L. jensenii.

Что касается концентрации лактобацилл, то не удалось выявить статистически значимых различий при сравнении разных групп беременных. Кроме того, комплексная оценка вагинального микробиоценоза с помощью молекулярно-генетических методов не выявила значимых различий в концентрации Lactobacillus spp. и условно-патогенных микроорганизмов вагинального микробиоценоза у пациентов разных групп. Исключение составила U. urealyticum, концентрация которой во II группе оказалась статистически значимо выше (p = 0,017), по сравнению с I группой. У пациенток III группы U. urealyticum не выявлялась.

Во II триместре беременности в I группе кандидозный вагинит установлен у 11,9% женщин, аэробный вагинит — у 2,4%, бактериальный вагиноз — у 4,8%, во II группе лишь у 1 женщины (14,3%) был диагностирован бактериальный вагиноз. Что касается сравнительной оценки концентрации лактобацилл и условно-патогенной микрофлоры во II триместре, статистически значимых различий выявлено не было. Распределение выявления доминирующих вагинальных лактобацилл в исследуемых группах во II триместре беременности представлено на рис. 2.

 

Рисунок 2. Распределение типов вагинального микробного сообщества по доминирующему микроорганизму в исследуемых группах во II триместре

Figure 2. The distribution of different types of vaginal microbial communities based on the dominant species of microorganisms in the 2nd trimester

 

Как видно из данных, представленных на рис. 2, во II триместре вид L. crispatus в качестве доминирующего микроорганизма встречался, также как и в I триместре, только в I группе и составил 38,1%. L. gasseri доминировал у 19,1% (8/42) в группе 1 и у 14,3% (1/7) в группе 2. Тип вагинальной микробиоты с доминированием L. iners был самым распространенным во II группе. Частота доминирования L. iners составила 42,9%, что в 4 раза выше, чем в I группе (9,5%). Частота доминирования L. jensenii и L. gasseri была сопоставима в обеих группах.

Далее мы провели сравнение профиля экспрессии мРНК генов врожденного иммунитета с целью оценки локального воспаления слизистой влагалища у пациенток I и II групп в I и II триместрах. Результаты сравнения представлены в табл. 1 и 2.

 

Таблица 1. Показатели локальных иммунных маркеров в I триместре в I и II группах

Table 1. Results of local immune markers in the first trimester for groups 1 and 2

Показатель Parameter	I группа | Group 1 N = 42	II группа | Group 2 N = 7	Значение р P-value
	Медиана (Q1–Q3) | Me (Q1–Q3)
Индекс воспаления Inflammation Index	92,20 (33,50–99,60)	95,70 (94,25 — 98,55)	0,492
IL-1β	5,70 (4,90–6,30)	4,30 (3,70–4,95)	0,006
IL-10	2,00 (1,30–2,60)	2,50 (2,25 — 2,65)	0,225
IL-18	4,70 (4,00–5,30)	3,80 (3,60–4,20)	0,028
TNFα	3,60 (3,10- 4,20)	3,4 (3,35 — 3,70)	0,474
TLR4	3,20 (2,50–3,50)	3,8 (3,30–4,00)	0,103
GATA3	3,70 (3,10–4,30)	3,20 (3,10–3,45)	0,103
CD68	4,40 (4,00–5,10)	4,60 (4,45–4,95)	0,841
TLR4/GATA3	0,27 (0,06–1,00)	3,70 (0,90–4,00)	0,02
TNFα/IL-18	0,08 (0,03–0,25)	0,33 (0,12–0,43)	0,097
IL-10/IL-18	1,00 (0,09–6,80)	29,20 (4,80–78,10)	0,056
IL-1β/CD68	13,90 (5,30–39,40)	0,54 (0,33–2,05)	< 0,001

 

Таблица 2. Сравнение показателей иммунных маркеров во II триместре беременности в I и II группе

Table 2. Results of immune markers in the second trimester of pregnancy in groups 1 and 2

Показатель Parameter	I группа | Group 1 N = 42	II группа | Group 2 N = 7	Значение р P-value
	Медиана (Q1–Q3) | Me (Q1–Q3)
Индекс воспаления Inflammation Index	5,75 (0,10–33,20)	93,55 (85,30–99,20)	< 0,001
IL-1β	4,90 (4,00–5,40)	3,65 (3,20–4,10)	0,002
IL-10	1,20 (0,00–2,00)	2,30 (1,30–2,60)	0,117
IL-18	4,95 (4,30–5,40)	3,50 (2,10–3,90)	< 0,001
TNFα	3,10 (2,90–3,60)	3,20 (2,00–3,90)	0,418
TLR4	2,50 (1,60–3,00)	3,45 (2,00–3,90)	0,125
GATA3	3,90 (3,50–4,30)	3,20 (1,40–3,40)	0,002
CD68	4,55 (4,10–5,10)	4,40 (3,30–4,40)	0,09
TLR4/GATA3	0,04 (0,01–0,12)	2,60 (1,90–5,30)	< 0,001
TNFα/IL-18	0,02 (0,01–0,06)	0,36 (0,20–0,81)	< 0,001
IL-10/IL-18	0,20 (0,00–0,37)	45,25 (11,00–125,00)	< 0,001
IL-1β/CD68	1,45 (0,62–4,30)	0,32 (0,23–0,47)	0,007

 

В I триместре уровень провоспалительных цитокинов IL-1β и IL-18, а также профиля IL-1β/ CD68 был статистически значимо выше в I группе. Показатели профиля TLR4/GATA3 были значительно повышены во II группе.

ИВ в I триместре чаще соответствовал наличию воспаления как в I, так и во II группах. Также стоит отметить, что в III группе у всех пациенток ИВ был максимальный (100%). Сравнение показателей ИВ в I триместре представлено на рис. 3.

 

Рисунок 3. Сравнение показателей индекса воспаления в I триместре

Figure 3. Comparison of the inflammation index in the study group in the 1st trimester

 

Во II триместре, в отличие от I триместра, в I группе отмечено изменение соотношения профилей цитокинов, характерное для отсутствия воспалительной реакции в вагинальном биотопе. Во II группе определено статистически значимое повышение уровня провоспалительных цитокинов, что указывает на наличие реакции воспаления во влагалище. При этом следует отметить, что микроскопическое исследование отделяемого влагалища не выявило признаков воспалительной реакции. Сравнение показателей иммунных маркеров во II триместре беременности у пациенток I и II групп представлено в табл. 2.

Значительные различия были получены при оценке ИВ в I и II группах во II триместре. Как показано на рис. 4, наличие воспалительной реакции было выявлено у всех пациенток II группы.

 

Рисунок 4. Сравнение показателей индекса воспаления в I и II группах во II триместре

Figure 4. Comparison of the inflammation index between groups 1 and 2 in the 2nd trimester

 

Чтобы оценить эффективность определения ИВ в отделяемом влагалища у беременных во II триместре для прогнозирования ПР, мы провели ROC-анализ. Площадь под ROC-кривой, соответствующей взаимосвязи прогноза ПР и ИВ во II триместре, составила 0,933±0,038 с ДИ: 0,858–1,00. Полученная модель была статистически значимой (p = 0,001). Пороговое значение ИВ во II триместре в точке cut-off составило 84,5%. При ИВ большем или равном этому значению прогнозируется высокий риск ПР. Чувствительность данного теста составила 83,3%, специфичность — 87,5%. На рис. 5 представлена ROC-кривая прогностического значения ИВ во II триместре беременности.

 

Рисунок 5. ROC-кривая прогностического значения индекса воспаления во II триместре беременности

Figure 5. ROC-curve of the prognostic value of the inflammation index in the 2nd trimester

 

Таким образом, доминирование L. crispatus в вагинальном биотопе в I и II триместрах беременности и низкий уровень экспрессии провоспалительных цитокинов во II триместре может говорить о высокой вероятности благополучного исхода беременности. Тогда как повышенная концентрация L. iners и высокий ИВ во II триместре, могут свидетельствовать о повышенном риске ПР. Определение ИВ в отделяемом влагалища у беременных во II триместре эффективно для прогнозирования ПР.

Обсуждение

Трудность диагностики инфекций нижних отделов половых путей во время беременности заключается в том, что большинство пациенток не предъявляют жалоб, течение инфекций, вызванных условно-патогенной микрофлорой, носит субклинический характер. Это приводит к запоздалой диагностике и распространению инфекции на верхние отделы генитального тракта, инфицированию плодных оболочек, преждевременному излитию околоплодных вод и досрочному завершению беременности. В нашем исследовании оценка жалоб беременных на вагинальный дискомфорт также характеризовалась низкой информативностью, а лабораторно установленный бактериальный вагиноз (БВ) и вовсе протекал бессимптомно. БВ — полимикробное невоспалительное дисбиотическое заболевание влагалища, при котором условно-патогенная микрофлора, прежде всего факультативные анаэробы (G. vaginalis, Fannyhessea vaginae), преобладает над бактериями рода Lactobacillus spp., обуславливая клинические симптомы. Частота встречаемости БВ во время беременности по данным различных авторов составляет от 6 до 40% [3] и может иметь неблагоприятное влияние на исход беременности. В нашем исследовании большинство беременных имели физиологический микробиоценоз влагалища. В I триместре БВ на основе клинических и лабораторных данных был выявлен менее чем у 10% всех беременных, принимавших участие в исследовании, и ввиду небольшого количества случаев взаимосвязь с осложнениями беременности определить не представилось возможным.

U. urealyticum часто обнаруживают в половых путях беременных и изолированно, и в сочетании с БВ, и связывают с различными осложнениями беременности, в том числе и с ПР. В проведенном нами исследовании отмечалось статистически значимое отличие повышенной концентрации данного представителя генитальных микоплазм во II группе беременных. Однако обозначить причинно-следственную связь присутствия во влагалище U. urealyticum и развития преждевременных родов не представляется возможным, так как случай, когда концентрация данного условно-патогенного микроорганизма имела пороговое значение 10⁴ ГЭ/мл, был единичным. Проведенный Jonduo М. и соавт. в 2023 г. метаанализ исследований влияния генитальных микоплазм, в том числе U. urealyticum, в нижних отделах половых путей на развитие осложнений беременности также не позволил обозначить связь ПР и наличия микроорганизма — как изолированно, так и в сочетании с БВ [15].

Согласно современным представлениям, экспрессия цитокинов в составе вагинального биотопа зависит не только от воздействия микробных патогенов, но и от генетической вариабельности генов, которые их кодируют [5]. Увеличение микробного разнообразия при дисбиотических состояниях влагалища также оказывает иммуномодулирующее воздействие. Кроме того, доминирование определенных видов лактобацилл в вагинальной микробиоте влияет на уровень экспрессии различных иммунных факторов [22]. По данным большинства исследований, наиболее благоприятным является тип вагинального микробного сообщества с преобладанием L. crispatus. В исследуемых нами группах тип микробиоты с доминированием L. crispatus отмечен только в группе срочных родов, а преобладание типа микробиоты с доминированием L. iners в 4 раза чаще встречался в группе беременных, родивших преждевременно. Несмотря на неоднозначность мнения ученых о роли L. iners в поддержании репродуктивного здоровья [13] и благополучного завершения беременности, мы отметили фактор доминирования L. iners в вагинальной микробиоте беременных как негативный.

Анализ про- и противовоспалительных цитокинов вагинального биотопа в I триместре показал наличие воспаления во всех 3 исследуемых нами группах. Воспалительная реакция является вариантом физиологической нормы для I триместра беременности. Беременность — это уникальное иммунное состояние, которое регулируется в течение трех отдельных иммунологических фаз: первый триместр беременности — это преимущественно провоспалительная фаза, за которой следует индукция противовоспалительного состояния до финальной фазы, когда происходит возобновление воспаления, завершающееся сокращением матки, изгнанием плода и отторжением плаценты. Таким образом, цитокиновые различия отражают чувствительность к инфекционным заболеваниям, которая выше в первой половине беременности и постепенно снижается во второй половине [14]. Представители группы IL-1, к которым относятся IL-1β и сходный с ним IL-18, являются мощными провоспалительными цитокинами, которые воздействуют на широкий спектр иммунных клеток и, в зависимости от окружения различными иммунными факторами, проявляют плеойтропность действия. По мнению большинства исследователей, IL-1β играет важную роль в процессе имплантации плодного яйца [20], способствует ангиогенезу, а также участвует в обеспечении иммунной толерантности при формировании плаценты [4, 12]. В нашем исследовании в I триместре в вагинальном биотопе наблюдался более высокий уровень экспрессии мРНК генов IL-1β и IL-18 в группе пациенток, родивших в срок, по сравнению с группой ПР. Также отмечено различие и в уровне экспрессии мРНК гена GATA3 — фактора, который играет важную роль в процессе инвазии трофобласта [8]. Вероятно, что в I триместре беременности относительно более низкий уровень экспрессии провоспалительных цитокинов, определяемый в отделяемом влагалища, может характеризовать уменьшение способности репродуктивной системы реагировать как на инфекционный фактор, так и на появление плода в матке и, возможно, указывает на важную роль данных иммунных маркеров в прогнозировании вынашивания беременности.

Показательным являлось соотношение про- и противовоспалительных цитокинов в нашем исследовании во II триместре. ИВ в I группе свидетельствовал об отсутствии реакции воспаления, тогда как во II группе отмечалось ее наличие. Подобные данные были представлены и другими исследователями [14, 16], что может говорить о диагностической значимости комплексного исследования иммунных маркеров и состава вагинального микробиома для прогнозирования досрочного завершения беременности и открывает перспективы персонализированной профилактики данного осложнения.

Заключение

Возможность учитывать не только микробиологические, но и иммунные показатели вагинального биотопа во время беременности, позволяет нам с высокой вероятностью прогнозировать риски неблагополучного завершения беременности. Преобладание типа вагинального микробного сообщества с доминированием L. iners и провоспалительный профиль цитокинов во II триместре являются факторами риска досрочного завершения беременности. Тогда как доминирование L. crispatus в вагинальном биотопе и низкий индекс воспаления во II триместре свидетельствуют о благоприятном течении беременности. Комплексная оценка микробиологических и иммунных параметров состояния нижних отделов репродуктивного тракта могут иметь важное практическое значение для профилактики неблагоприятных исходов беременности.

About the authors

Natalia R. Beliaeva

The Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott

Author for correspondence.
Email: natascha778@yandex.ru

Junior Researcher, Experimental Microbiology Group

Russian Federation, St. Petersburg

O. V. Budilovskaya

The Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott

Email: natascha778@yandex.ru

PhD (Medicine), Senior Researcher, Experimental Microbiology Group

Russian Federation, St. Petersburg

T. A. Khusnutdinova

The Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott

Email: natascha778@yandex.ru

PhD (Medicine), Senior Researcher, Experimental Microbiology Group

Russian Federation, St. Petersburg

K. V. Shalepo

The Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott

Email: natascha778@yandex.ru

PhD (Biology), Senior Researcher, Experimental Microbiology Group

Russian Federation, St. Petersburg

A. A. Krysanova

The Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott

Email: natascha778@yandex.ru

PhD (Medicine), Senior Researcher, Experimental Microbiology Group

Russian Federation, St. Petersburg

N. I. Tapilskaya

The Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott

Email: natascha778@yandex.ru

DSc (Medicine), Professor, Leading Researcher, Reproduction Department

Russian Federation, St. Petersburg

A. M. Savicheva

The Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott

Email: natascha778@yandex.ru

DSc (Medicine), Professor, Honored Scientist of the Russian Federation, Head of the Department of Medical Microbiology

Russian Federation, St. Petersburg

O. N. Bespalova

The Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott

Email: natascha778@yandex.ru

DSc (Medicine), Deputy Director for Scientific Work

Russian Federation, St. Petersburg

References

Supplementary files