Assessing prevalence of HBV infection markers in older age groups and molecular genetic characterization of the identified HBV variants

Cover Page


Cite item

Full Text

Abstract

Introduction. Despite successes in hepatitis B virus (HBV) molecular virology, prevention, and treatment, HBV infection remains relevant. The study aimed to analyze serological and molecular genetic markers among older individuals in Novosibirsk, and characterize identified HBV variants.

Materials and methods. The study included 630 conditionally healthy individuals undergoing routine medical examination. Serological markers (HBsAg, AntiHBs, AntiHBc, HBeAg, AntiHBe) were determined by ELISA, and HBV DNA — by real-time PCR. Full-length genomic sequences of identified HBV isolates were obtained using next-generation sequencing (NGS). Results. HBV genetic material was detected in 6 patients, and their full genome sequences were obtained. The genotype and subgenotype of identified HBV variants were determined, and clinically significant mutations were analyzed. Only 29% of patients had protective antiHBs levels (> 10 IU/mL), with 38% also having antiHBc antibodies. Low-titer protective antibodies (10–100 IU/mL) were most common in both АntiНВs+/AntiНВс– and AntiНВs+/AntiНВс+ groups. Low titers were more frequent in the AntiНВs+/AntiНВс– group, while high titers (> 400 IU/mL) were more common in the AntiНВs+/AntiНВс+ group.

Conclusions. It has been shown that among the older age groups, there is a low intensity of humoral immunity to HBV, which may indicate a widespread problem of reducing the level of protective antibodies over time post-vaccination, or insufficient vaccination coverage in this population group. A decrease in HBV antibody titer below the protective level in the elderly significantly increases the a of primary infection or reinfection with HBV in this population group. As a recommendation, the inclusion of AntiHBs serological monitoring in the medical examination program for the elderly can be considered. The data obtained also actualize the problem of booster vaccination in this age group. The total presence of mutations potentially associated with disease progression in the identified HBV variants and the widespread prevalence of mutations that can alter HBsAg antigenicity require attention to these patients.

Full Text

Введение

Инфекция, вызванная вирусом гепатита В (ВГВ-инфекция) до сих пор остается серьезной проблемой здравоохранения [26, 30]. ВГВ занимает третье место среди инфекционных агентов, вызывающих онкологические заболевания, и является причиной 80% смертей от гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК), связанной с вирусом [17]. По данным Всемирной организации здравоохранения, во всем мире более 250 млн человек хронически инфицированы ВГВ, а серологические маркеры перенесенной или текущей ВГВ-инфекции обнаруживаются в мире у 2 млрд человек [10, 33].

Наиболее эффективным способом профилактики гепатита В (ГВ) является вакцинация. Вакцины против ГВ представляют собой дрожжевой рекомбинантный HBsAg (Hepatitis B surface antigen). Рекомбинантные вакцины эффективны и безопасны и применяются во многих странах мира на протяжении многих лет [16]. В Российской Федерации иммунизация населения против ГВ внесена в национальный календарь профилактических прививок в 1997 г. [10].

Для определения статуса ВГВ-инфекции, а также наличия гуморального иммунитета к ней, в лабораторной практике используются широкий спектр серологических маркеров, определение которых в сыворотке крови обследуемых лиц на данный момент проводят в основном методом твердофазного ИФА. Наличие поверхностного антигена ВГВ в крови пациента свидетельствует об активном или хроническом инфицировании ВГВ, наличие антител к HBsAg (АнтиHBs) при отсутствии антител к core-белку ВГВ (АнтиHBc) чаще всего свидетельствует о поствакцинальном иммунитете, но требует исключения других причин, в то время как одновременное обнаружение АнтиHBs и АнтиHBc с высокой вероятностью указывает на постинфекционный иммунитет, однако может быть результатом неспецифической стимуляции В-клеток (контакт с вирусом после вакцинации, не связанный с инфекционным процессом). E-антиген ВГВ (HBeAg) указывает на активную репликацию вируса, а сероконверсия HBeAg в АнтиHBe (антитела к HBeAg) обычно свидетельствует о переходе инфекции в HBeAg-негативную фазу. Этот переход у части пациентов может ассоциироваться с сероконверсией по HBeAg и снижением вирусной нагрузки, что у некоторых пациентов приводит к неактивной фазе носительства («ремиссии»). Однако у другой части пациентов развивается HBeAg-негативный хронический гепатит В, требующий пристального наблюдения и, часто, терапии. Также при лабораторной диагностике ВГВ-инфекции определяется ДНК ВГВ с использованием молекулярно-генетических методов, прежде всего ПЦР. Количественное определение ДНК ВГВ используется в качестве показателя вирусной нагрузки. Генотипирование и анализ нуклеотидной последовательности изолятов ВГВ позволяет определять завозные случаи инфицирования или выявлять клинически значимые мутации ВГВ, что является основой для персонализированной терапии пациента [10, 22, 36, 37, 38].

Изучение напряженности поствакцинального иммунитета в основном проводятся на возрастных группах, родившихся после введения массовой вакцинации против ГВ [16]. Недостаточная изученность состояния популяционного иммунитета к ВГВ и генетического разнообразия вируса среди лиц старшего возраста, рожденных до эры массовой вакцинации, не позволяет разработать эффективные стратегии бустерной иммунизации для данной группы риска. Цель данного исследования состояла в расширении представления о вышеупомянутой проблеме, для чего была проведена оценка распространенности серологических маркеров ВГВ-инфекции и оценка титра защитных антител к ВГВ среди условно-здоровых лиц старшей возрастной группы (на примере Новосибирской области), а также анализ встречаемости генетических маркеров ВГВ-инфекции в этой группе с последующей молекулярно-генетической характериcтикой выявленных вариантов ВГВ.

Материалы и методы

В исследовании приняли участие 630 условно-здоровых лиц (пациенты, у которых ранее не была выявлена ВГВ-инфекция), проживающих в Новосибирской области и проходивших плановый медицинский осмотр в период с 2022 по 2024 г. Исследование проводилось при добровольном информированном согласии обследуемых. Протокол исследования одобрен решением этического комитета ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора (протокол № 5 от 21.07.2022). Демографические данные были получены во время сбора образцов. Количество мужчин с исследуемой выборке составило 389 (61,7%), женщин — 241 (38,3%); средний возраст обследуемых — 57 лет (min = 29, max = 77). Исследуемая выборка была разделена на 5 возрастных групп: до 40 (n = 51), 41–50 (n = 89), 51–60 (n = 202), 61–70 (n = 236), старше 70 (n = 52).

Анализ исследуемых образцов (сыворотка крови) на наличие серологических маркеров ВГВ-инфекции (HBsAg, АнтиHBs, АнтиНВс, HBеAg, АнтиНВе) проводился с использованием коммерческих ИФА-наборов «HBsAg-ИФА-БЕСТ», «HBsAg-подтверждающий-ИФА-БЕСТ», «ВектоHBsAg-антитела», «ВектоHBcAg-антитела», «ВектоHBcAg-IgM», «ВектоHBe-антиген», «ВектоHBe-IgG» (АО «Вектор-Бест», г. Новосибирск). Постановку ИФА-анализа проводили по протоколам, приведенным в инструкциях к каждому набору. Учет результатов реакции (измерение оптической плотности) проводили на планшетном ридере MultiscanGO (Thermo Fisher Scientific, США) при длине волны 450 нм с референс-волной при 630 нм. Согласно литературным данным, титр АнтиHBs в пределах 10–100 мМЕ/мл оценивался как низкий уровень защиты от ВГВ, в пределах 100–400 мМЕ/мл — как средний, а выше 400 мМЕ/мл — как высокий [11].

Выделение ДНК в анализируемых сыворотках осуществлялось преципитационным методом с использованием набора «РИБО-преп» (ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва). Скрининг исследуемых сывороток на наличие генетического материала ВГВ проводился методом ПЦР в режиме реального времени с использованием набора реагентов «АмплиСенс HBV-FL» (аналитическая чувствительность — 50 МЕ/мл, ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва). Положительные образцы отбирали для дальнейшего определения полногеномных последовательностей ВГВ методом высокопроизводительного секвенирования на платформе Illumina MiSeq путем таргетного обогащения праймерами, перекрывающими полный геном ВГВ [13]. Для выполнения секвенирования полноразмерной геномной последовательности выявленных генетических вариантов ВГВ предварительно проводилось обогащение ДНК методом мультиплексной ПЦР с использование панели праймеров, позволяющих амплифицировать перекрывающие фрагменты генома. Мультиплексное обогащение проводили в Х реакционных смесях с использованием набора «БиоМастер HS-Tag ПЦР» (Биолабмикс, Россия) с последующей оценкой эффективности обогащения путем проведения электрофореза в 2% агарозном геле и измерением концентрации двухцепочечной ДНК на приборе «Qubit 2.0» с использованием набора Qubit dsDNA HS Assay Kit (Thermo Fisher Scientific, США).

Процесс подготовки библиотеки для высокопроизводительного секвенирования проводился с использованием набора NEBNext Ultra II FS DNA Library Prep Kit for Illumina (NEB, Великобритания) и включал фрагментацию, репарацию концов и добавление dA-концевого фрагмента, а также лигирование адаптеров с помощью одной смеси ферментов. Секвенирование проводилось на платформе Illumina MiSeq (Illumina, США). Для удаления адаптеров, коротких последовательностей и последовательностей низкого качества («quality score» менее 20 и длина менее 30 нуклеотидов) файлы FASTQ обрабатывались с помощью fastp v0.20.1 (https://github.com/OpenGene/fastp) [20]. Предварительно обработанные прочтения были выравнены с референсным геномом ВГВ (AB109475), полученным из базы данных NCBI GenBank, с помощью BWA MEM v0.7.18 (https://github.com/lh3/bwa) [32]. Обработка и анализ файлов SAM/BAM выполнялись с помощью Samtools v1.11 [24]. Для извлечения консенсусной последовательности из файлов BAM использовалась программа iVar v1.2.2 [28].

Полногеномные последовательности ВГВ, полученные в этом исследовании, были депонированы в международную базу данных GenBank под регистрационными номерами PX116472–PX116477.

Генотипы и субгенотипы выявленных генетических вариантов ВГВ были определены с помощью методов филогенетического анализа. Последовательности геномов ВГВ, полученные в рамках этого исследования вместе с полученными прототипными последовательностями, а также с последовательностями ВГВ, полученными от пациентов на территории РФ в других исследованиях из NCBI GenBank и VGARus, были выровнены с помощью алгоритма ClustalW, после чего были построены филогенетические деревья методом максимального правдоподобия (достоверность поддержки ветвей определялась бутстреп-анализом с 500 итерациями) с помощью программного обеспечения MEGA Х. Определение серотипов проводилось на основе анализа выведенной аминокислотной последовательности HBsAg в положениях 122, 127, 140, 159 и 160 [17]. Полногеномные последовательности были проанализированы на наличие мутаций лекарственной резистентности, мутаций ускользания от иммунитета, мутаций, нарушающих или блокирующих секрецию HBeAg, и мутаций, связанных с ГЦК.

Для статистической обработки использовали стандартные методы описательной статистики с применением пакета программ Statistica 12.6 (StatSoft, США). Средние значения оценивали с учетом 95%ДИ по методу Клоппера–Пирсона. Для оценки достоверности различий численных данных, полученных при парных сравнениях, использовали критерий χ2 с поправкой Йетса. В качестве порога достоверности отличий было определено значение вероятности p < 0,05.

Результаты

В ходе исследования на наличие серологических и молекулярно-генетических маркеров ВГВ-инфекции было проанализировано 630 сывороток крови, полученных от условно-здоровых лиц, проживающих на территории Новосибирской области. Распространенность серологических маркеров ВГВ-инфекции в исследуемой выборке приведена в табл. 1.

 

Таблица 1. Частота выявления серологических маркеров вирусного гепатита В в исследуемой выборке

Table 1. The frequency of detection of serological markers of viral hepatitis B in the study sample

Характеристики

Parameters

Количество образцов

Number of samples

HBsAg, % (95%ДИ)

HBsAg, % (95% CI)

АнтиHBs, % (95%ДИ)

АntiHBs, % (95%CI)

АнтиНВс, % (95%ДИ)

АntiНВс, % (95%CI)

АнтиHBc IgM, % (95%ДИ)

АntiHBc IgM, % (95%CI)

HBeAg, % (95%ДИ)

HBeAg, % (95%CI)

АнтиНВе, % (95%ДИ)

AntiHBe, % (95%CI)

Всего | All

630

1,6 (0,9–2,9)

28,7 (25,3–32,4)

25,4 (22,2–28,9)

0,8 (0,3–1,8)

0 (0–0,6)

22,4 (19,3–25,8)

Пол | Gender

Мужчины | Male

389

2,1 (1,0–4,0)

28,0 (23,8–32,7)

25,7 (21,6–30,3)

1,0 (0,4–2,6)

0 (0–1,0)

23,1 (19,2–27,6)

Женщины | Female

241

0,8 (0,2–3,0)

29,8 (24,4–35,9)

25,3 (19,9–30,7)

0,4 (0,1–2,3)

0 (0–1,6)

21,2 (16,5–26,8)

Возрастная категория | Age group

< 40 лет | < 40 years

51

7,8 (3,1–18,5)

47 (34,1–60,5)

13,7 (6,8–25,7)

0 (0–7,0)

0 (0–7,0)

13,7 (6,8–25,7)

41–50 лет | 41–50 years

89

1,1* (0,2–6,1)

32,6 (23,7–42,9)

20,2* (13,2–29,7)

1,1 (0,2–6,1)

0 (0–4,1)

19,1 (12,3–28,5)

51–60 лет | 51–60 years

202

2,0* (0,1–2,8)

24,3 (18,9–30,6)

23,8* (18,4–30,1)

0,5 (0,1–2,8)

0 (0–1,9)

20,3 (15,3–26,4)

61–70 лет | 61–70 years

236

0,4* (0,1–2,4)

25,8 (20,7–31,8)

28,4 (23,0–34,5)

0,8 (0,2–3,0)

0 (0,0–1,6)

25,0 (19,9–30,9)

> 70 лет | > 70 years

52

0,0* (0,0–6,9)

34,6 (23,2–48,2)

40,4 (28,2–53,9)

1,9 (0,3–10,1)

0 (0,0–6,9)

32,7 (21,5–46,2)

Примечание. * — различия достоверны при попарном сравнении относительно наибольшего показателя, р < 0,05. Статистически значимых различий между группами мужчин и женщин не выявлено.

Note. * — differences are significant in pairwise comparison relative to the highest indicator, p < 0.05. There were no statistically significant differences between the groups of men and women.

 

Детектируемый уровень АнтиHBs более 10 ммЕ/мл был обнаружен у 28,7% пациентов (табл. 1), при этом у 62,4% из них (113/181, 95%ДИ = 55,2–69,2) не выявлено АнтиHBc (группа АнтиHBs+/АнтиНВс–), а у 37,6% (68/181, 95%ДИ = 30,84–44,81) АнтиHBc были обнаружены (группа АнтиHBs+/АнтиНВс+). Наблюдается уменьшение доли лиц с наличием АнтиHBs в изучаемой выборке с возрастом, повышение показателя в группах старше 60 лет обусловлено увеличением доли лиц с серологическим профилем АнтиHBs+/АнтиНВс+ (табл. 1, рис. 1).

 

Рисунок 1. Распределение пациентов с серологическим статусом АнтиHBs+/АнтиHBс– и с серологическим статусом АнтиHBs+/АнтиHBс+ в различных возрастных группах

Figure 1. The distribution of patients with the serological status of АntiHBs+/AntiHBс– and with the serological status of АntiHBs+/AntiHBс+ in different age groups

Примечание. *Процентное отношение пациентов со статусом АнтиНВс+/АнтиНВs+ ко всем пациентам АнтиНВs+.

Note. *Percentage of patients with the status of AntiHBc+/AntiHBs+ to all AntiHBs+ patients.

 

Статистически значимых различий между группами женщин и мужчин в группе АнтиHBs+/АнтиHBс+ (9,5% против 11,3%, χ2 = 0,32, p = 0,57) и группе АнтиHBs+/АнтиHBс- (19,9% против 16,7%, χ2 = 0,83, p = 0,3612) не выявлено, хотя доля женщин с серологическим профилем АнтиHBs+/АнтиHBс- несколько превышает долю мужчин (рис. 2).

 

Рисунок 2. Распределение пациентов по полу в группах АнтиHBs+/АнтиHBс– и АнтиHBs+/АнтиHBс+

Figure 2. Gender distribution of patients in the AntiHBs+/AntiHBс– and the AntiHBs+/AntiHBс groups

 

Как в группе AntiHBs+/AntiHBс–, так и в группе AntiHBs+/AntiHBс+ в наибольшей степени наблюдался низкий титр защитных антител (10–100 мМЕ/мл), при этом он встречался статистически значимо чаще в группе AntiHBs+/AntiHBс– (80,5% против 60,3%, χ2 = 8,81, р = 0,002847), а высокий титр (> 400мМЕ/мл) — в группе AntiHBs+/AntiHBс+ (11,8% против 3,5%, χ2 = 4,64, р = 0,031327) (рис. 3).

 

Рисунок 3. Количественное определение уровня АнтиHBs в группах АнтиHBs+/АнтиHBс– и АнтиHBs+/АнтиHBс+

Figure 3. Quantification of the level of AntiHBs in the AntiHBs+/AntiHBс– and the AntiHBs+/AntiHBс+ groups

 

Низкий уровень АнтиHBs обнаружен у большинства пациентов в каждой возрастной группе (в группе до 40 лет — 78,3% от числа пациентов до 40 лет с детектируемым уровнем АнтиHBs, 41–50 лет — 62,1%, 51–60 лет — 81,6%, 61–70 лет — 68,9%, старше 70 лет — 72,2%). Высокий титр АнтиHBs не был выявлен в группе лиц до 40 лет (рис. 4)

 

Рисунок 4. Количественное определение уровня АнтиHBs в различных возрастных группах

Figure 4. Quantification of the level of AntiHBs in different age groups

 

25,4% образцов (160/630) были повторно положительными на АнтиHBc, при этом в крови 14,7% пациентов (93/630, 95%ДИ = 12,2–17,7) были обнаружены изолированные АнтиНВс. Также исследуемые образцы были дополнительно исследованы на наличие других маркеров активно текущей инфекции (АнтиHBc-IgM и HВeAg). Как следует из данных табл. 1, АнтиHBc-IgM выявлены в 0,8% случаев (5/630), что указывает на острую инфекцию или маркирует активную репликацию ВГВ при хроническом ГВ. При этом HВeAg, который также свидетельствует об активной репликации вируса, не обнаружен ни в одном из образцов, что позволяет предположить наличие HBeAg- негативной инфекции. АнтиНВе были обнаружены у 86,0% пациентов с изолированными АнтиНВс (80/93, 95%ДИ = 77,5–91,6) и у 91,0% пациентов в группе АнтиНВс+/АнтиHBs+ (61/67, 95%ДИ = 81,8–95,8).

В нашем исследовании HBsAg был обнаружен в крови 10 пациентов (1,6%), при этом у 6 из них был обнаружен генетический материал ВГВ, что составляет 0,95% общей выборки (6/630, 95%ДИ = 0,44–2,06). ДНК ВГВ не была обнаружена в крови ни у одного пациента с серологическими профилями АнтиНВс+/АнтиHBs+/HBsAg–, АнтиНВс–/АнтиHBs+/HBsAg–, АнтиНВс–/АнтиHBs–/HBsAg–.

Филогенетический анализ показал, что все полногеномные последовательности выявленных вариантов относятся к генотипу D, субгенотипу D2 (рис. 5), а также формируют кластер с последовательностями из Воронежской области (темно-серый сектор), из Московского, Калужского, Хабаровского и Уральского регионов (серый сектор) и из регионов Дальнего Востока и Кавказа (светло-серый сектор) (рис. 6). Серотипирование выявило среди циркулирующих в исследуемой популяции вариантов ВГВ единственный подтип ayw2.

 

Рисунок 5. Филогенетическое дерево, построенное методом максимального правдоподобия с использованием трехпараметрической модели эволюции Т92, для полноразмерных последовательностей выявленных вариантов ВГВ (отмечены жирным шрифтом) по отношению к прототипным изолятам

Figure 5. A phylogenetic tree constructed using the maximum likelihood method with T92 evolutionary model for full-length sequences of identified HBV variants (highlighted in bold) in relation to prototype isolates

Примечание. Показатели статистической надежности узлов рассчитаны с помощью бутстреп-анализа с использованием 500 случайных псевдореплик.

Note. The reliability index of the nodes was calculated using bootstrap analysis for 500 random pseudoreplicates.

 

Рисунок 6. Филогенетическое дерево, построенное методом максимального правдоподобия с использованием трехпараметрической модели эволюции Т92, для полноразмерных последовательностей выявленных вариантов ВГВ (отмечены жирным шрифтом) по отношению к другим выявленным на территории РФ изолятам

Figure 6. A phylogenetic tree constructed using the maximum likelihood method with T92 evolutionary model for full-length sequences of identified HBV variants (highlighted in bold) in relation to other isolates identified on the territory of the Russian Federation

Примечание. Показатели статистической надежности узлов рассчитаны с помощью бутстреп-анализа с использованием 500 случайных псевдореплик.

Note. The reliability index of the nodes was calculated using bootstrap analysis for 500 random pseudoreplicates.

 

Частота встречаемости потенциально клинически значимых мутаций в полногеномных последовательностях выявленных изолятов ВГВ представлена в табл. 2.

 

Таблица 2. Частота встречаемости клинически значимых мутаций в полногеномных последовательностях выявленных изолятов ВГВ

Table 2. The frequency of occurrence of clinically significant mutations in the full genome sequences of identified HBV isolates

Участок генома

Genome site

Частота обнаружения

Frequency of detection

Обнаруженные мутации

Detected mutations

S ген | S gene

100% (6/6)

A128V (6/6; 100%), Q129R (6/6; 100%), Q101H (1/6; 17%)

PreS1, PreS2

0% (0/6)

Не обнаружено | Not detected

P ген | P gene

0% (0/6

Не обнаружено | Not detected

Core, PreCore

100% (6/6)

PreCore: G1896A (4/6; 67%), Core: A80T (1/6; 17%), E83D (6/6; 100%), E113Q (2/6; 33%).

X ген | X gene

100% (6/6)

V5L (6/6; 100%)

 

Обсуждение

У значительного количества пациентов в выборке (71,2%, 449/630, ДИ = 67,61–74,66) не обнаружен защитный титр АнтиHBs (выше 10 ммЕ/мл). Поскольку пациенты исследуемой выборки были рождены до внедрения вакцинации новорожденных против гепатита В, возможное отсутствие самостоятельного вакцинирования данных слоев населения может объяснять полученные данные. Кроме того, после вакцинации против ГВ или после перенесенной ВГВ-инфекции титры АнтиHBs со временем снижаются вплоть до недетектируемого уровня (иммунологическая память сохраняется у иммунокомпетентных лиц в течение 10–30 лет), что также может объяснять полученные данные. На продолжительность напряженного иммунитета влияет возраст людей на момент начала вакцинации (наиболее высокие показатели напряженности иммунитета констатированы у людей, вакцинированных в возрасте до 30 лет [8, 21, 31]), уровень первичного иммунного ответа (прямая зависимость) [2], возраст пациента (с возрастом способность В-клеток вырабатывать соответствующие антитела против новых или известных антигенов снижается) [27, 34] и индивидуальные особенности иммунной системы организма (генетические факторы) [14].

Если предположить, что в группе AнтиHBs+/AнтиHBс– наличие AнтиHBs является результатом вакцинации, а в группе AнтиHBs+/АнтиHBс+ — естественного заражения, то статистически значимые различия в уровне АнтиHBs могут объясняться меньшей реактогенностью рекомбинатных вакцин по сравнению с живыми аттенуированными вакцинами (поскольку не содержат весь спектр патоген-ассоциированных мембранных структур возбудителя) [3]. Кроме того, в исследовании, изучавшем длительность иммунитета против коклюша, показано ослабление приобретенного в результате инфекции иммунитета через 4–20 лет, в то время как после вакцинации иммунитет ослабевал через 4–12 лет [39]. Однако поскольку у нашего исследования имеется существенное ограничение —отсутствие данных об вакцинации исследуемых пациентов — упомянутые причины выявленного различия носят сугубо предположительный характер. Поэтому выявленный феномен нуждается в дальнейшем изучении.

Считается, что АнтиHBc является единственным маркером ВГВ, сохраняющимся на протяжении длительного времени [15]. Полученные нами результаты распространенности АнтиНВс согласуются как с данными отечественных ученых (22,2% в группе условно-здоровых пациентов[5], 21,6% у пациентов гематологических отделений [12]), так и с данными зарубежных исследователей в сходных исследованиях (например, 31,8% в Индонезии (пациенты, рожденные до введения обязательной вакцинации детей от гепатита В) [25], 22,6% в Индии (группа условно-здоровых пациентов) [18], 25,9% в Грузии (популяционная оценка) [29]). Также наблюдается увеличение встречаемости АнтиHBc с возрастом (табл. 2). Аналогичную тенденцию отмечали в своих работах и другие исследователи [1, 4, 15, 16]. Поскольку преобладающая часть пациентов в нашей выборке старше 50 лет (78%, 490/630 пациентов), полученные нами значения распространенности АнтиНВс несколько превышают значения, описанные для регионов РФ с низкой эндемичностью ВГВ, хотя распространенность HBsAg в исследуемой выборке не превышает 2%.

У ряда пациентов обнаруживаются изолированные АнтиHBc (14,7%, 93/630), и поскольку у данных пациентов не обнаружены защитные АнтиНВs, они относятся к группе повышенного риска реактивации ВГВ. Наиболее часто реактивация происходит при иммунносупрессивных состояниях, а также при приеме ряда лекарственных препаратов. К другим возможным факторам риска реактивации относятся наличие коинфекций (ВГС, ВГD, ВИЧ и др.), мужской пол, пожилой возраст и наличие цирроза [26, 33].

Процент выявления НBsAg (1,6%) и ДНК ВГВ (0,95%) в исследуемой выборке позволяют определить Новосибирскую область как малоэндемичный регион по заболеваемости ГВ, однако данное утверждение нуждается в подтверждении на более широких выборках. Все выявленные варианты ВГВ относятся к генотипу D, субтипу D2. В более ранних исследованиях сообщалось о доминировании генотипа D на территории Новосибирской области, также известно о единичных случаях обнаружения генотипов А и С [6, 19]. По результатам филогенетического анализа была выявлена кластеризация последовательностей ВГВ выявленных в данном исследовании вариантов с последовательностями ВГВ, полученными в других исследованиях от пациентов из различных регионов, что позволяет предположить общие пути распространения (миграция населения) и продолжающуюся эволюцию ВГВ.

Обнаруженные мутации S гена (A128V, Q129R, Q101H) могут снижать синтез вирионов и поверхностных белков, изменять антигенность HBsAg, что может привести к нарушению связывания с антителами, индуцированными вакциной против гепатита В, а также затруднять диагностику ВГВ-инфекции, однако в нашем исследовании затруднений обнаружения HBsAg в этих образцах не было [23, 35]. Мутация PreCore G1896A приводит к появлению стоп-кодона и блокированию синтеза HBeAg на уровне трансляции (HBe — негативный гепатит) [35]. Обнаруженные мутации Core (A80T, E83D, E113Q) и мутация гена Х (V5L) связаны с прогрессированием гепатита В, мутацию Core E113Q также связывают с дополнительной клинической значимостью ускользания от иммунитета [9].

Заключение

На примере населения Новосибирской области показано, что среди старших возрастных групп наблюдается низкая напряженность гуморального иммунитета к ВГВ, что может свидетельствовать о широком распространении проблемы снижения уровня защитных антител с течением времени после вакцинации либо о недостаточном охвате вакцинацией этой группы населения. Однако, по сравнению с молодыми, в старших возрастных группах чаще регистрируется серологический профиль АнтиHBs+/АнтиHBc+, что указывает на более частые встречи с ВГВ лиц, рожденных до внедрения массовой вакцинации. Снижение титра АнтиHBs ниже защитного у пожилых людей значительно повышает риск первичного или повторного инфицирования ВГВ в этой группе населения. В качестве рекомендации можно рассматривать включение серологического мониторинга АнтиHBs в программу диспансеризации для пожилых людей. Полученные данные актуализируют проблему бустерной вакцинации в этой возрастной группе.

Дополнительная информация

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.

Соответствие принципам этики. Все пациенты подписали информированное согласие на участие в исследовании. Протокол исследования одобрен решением этического комитета ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора (протокол № 5 от 21.07.2022).

×

About the authors

Alina S. Zheleznova

State Research Center for Virology and Biotechnology “Vector”

Author for correspondence.
Email: zheleznova_alinka@mail.ru
ORCID iD: 0009-0006-1252-9616

Junior Researcher, Department of Molecular Virology for Flaviviruses and Viral Hepatitis

Russian Federation, Koltsovo, Novosibirsk Region

Kirill A. Svirin

State Research Center for Virology and Biotechnology “Vector”

Email: svirin_ka@vector.nsc.ru
ORCID iD: 0000-0001-9083-1649

Junior Researcher, Department of Molecular Virology for Flaviviruses and Viral Hepatitis

Russian Federation, Koltsovo, Novosibirsk Region

Mikhail Y. Kartashov

State Research Center for Virology and Biotechnology “Vector”

Email: kartashov_myu@vector.nsc.ru
ORCID iD: 0000-0002-7857-6822

PhD (Biology), Senior Researcher, Department of Molecular Virology for Flaviviruses and Viral Hepatitis

Russian Federation, Koltsovo, Novosibirsk Region

References

  1. Абакаров Р.Р., Тихомиров Д.С., Туполева Т.А., Игнатова Е.Н., Куликов С.М., Гармаева Т.Ц., Ткаченко Л.Л., Сейтибрагимов Ф.И., Гильмутдинов Р.Г., Мостовая Н.А., Македонская О.Г., Ромашкина Т.В., Давыдова Л.Е., Герасимова В.В., Гапонова Т.В. Частота выявления антител к ядерному антигену вируса гепатита В у доноров крови и ее компонентов в четырех субъектах Российской Федерации // Гематология и трансфузиология. 2021. Т. 66, № 2. С. 242–252. [Abakarov R.R., Tikhomirov D.S., Tupoleva T.A., Ignatova E.N., Kulikov S.M., Garmaeva T.Ts., Tkachenko L.L., Seitibragimov F.I., Gilmutdinov R.G., Mostovaya N.A., Makedonskaya O.G., Romashkina T.V., Davydova L.E., Gerasimova V.V., Gaponova T.V. The frequency of detection of antibodies to the nuclear antigen of hepatitis B virus in blood donors and its components in four subjects of the Russian Federation. Gematologiya i transfuziologiya = Hematology and Transfusiology, 2021, vol. 66, no. 2, pp. 242–252. (In Russ.)] doi: 10.35754/0234-5730-2021-66-2-242-252
  2. Акимкин В.Г., Семененко Т.А. Эпидемиологическая и иммунологическая эффективность вакцинации медицинских работников против гепатита B // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2017. Т. 16, № 4. С. 52–57. [Akimkin V.G., Semenenko T.A. Epidemiological and immunological effectiveness of vaccination of healthcare workers against hepatitis B. Epidemiologiya i vaktsinoprofilaktika = Epidemiology and Vaccine Prophylaxis, 2017, vol. 16, no. 4, pp. 52–57. (In Russ.)] doi: 10.31631/2073-3046-2017-16-4-52-57
  3. Алпатова Н.А., Авдеева Ж.И., Гайдерова Л.А., Лысикова С.Л., Медуницын Н.В. Иммунный ответ при иммунизации противовирусными вакцинами // БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2020. Т. 20, № 1. С. 21–29. [Alpatova N.A., Avdeeva Zh.I., Gajderova L.A., Lysikova S.L., Medunitsyn N.V. Immune response during immunization with antiviral vaccines. BIOpreparaty. Profilaktika, diagnostika, lechenie = Biological Products. Prevention, Diagnosis, Treatment, 2020, vol. 20, no. 1, pp. 21–29. (In Russ.)] doi: 10.30895/2221-996X-2020-20-1-21-29
  4. Базыкина Е.А., Троценко О.Е., Балахонцева Л.А., Котова В.О. Лабораторно-диагностическая оценка распространенности вирусного гепатита В, включая его HBsAg-негативную форму, в Дальневосточном федеральном округе // Клиническая лабораторная диагностика. 2024. Т. 69, № 1. С. 17–23. [Bazykina E.A., Trotsenko O.E., Balakhontseva L.A., Kotova V.O. Laboratory and diagnostic assessment of the prevalence of viral hepatitis B, including its HBsAg-negative form, in the Far Eastern Federal District. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika = Russian Clinical Laboratory Diagnostics, 2024, vol. 69, no. 1, pp. 17–23. (In Russ.)] doi: 10.51620/0869-2084-2024-69-1-17-23
  5. Базыкина Е.А., Туркутюков В.Б., Троценко О.Е., Котова В.О., Балахонцева Л.А., Бутакова Л.В., Варнавская Л.В., Фоменко В.В., Чечулина М.А., Крапивкин А.И., Зиньковская С.В., Будай Г.И., Янович О.А., Ломакина Е.А., Лукина З.И. Распространенность и молекулярно-генетическая характеристика вируса гепатита В у ВИЧ-позитивных лиц в Дальневосточном регионе // Инфекция и иммунитет. 2019. Т. 9, № 1. С. 183–192. [Bazykina E.A., Turkutyukov V.B., Trotsenko O.E., Kotova V.O., Balakhontseva L.A., Butakova L.V., Varnavskaya L.V., Fomenko V.V., Chechulina M.A., Krapivkin A.I., Zinkovskaya S.V., Buday G.I., Yanovich O.A., Lomakina E.A., Lukina Z.I. Prevalence and molecular-genetic characteristics of hepatitis B virus in HIV-positive individuals in the Far Eastern region. Infektsiya i immunitet = Russian Journal of Infection and Immunity, 2019, vol. 9, no. 1, pp. 183–192. (In Russ.)] doi: 10.15789/2220-7619-2019-1-183-192
  6. Безуглова Л.В., Мануйлов В.А., Осипова Л.П., Мосина Я.Д., Порываева В.А., Агафонова О.А., Могильных А.К., Нетесов С.В., Нетесова И.Г. Результаты испытаний реагентов для иммуноферментного определения субтипа HBsAg и генотипа вируса гепатита B в образцах плазмы крови человека // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 2020. Т. 38, № 4. С. 188–195. [Bezuglova L.V., Manuylov V.A., Osipova L.P., Mosina Ya.D., Poryvaeva V.A., Agafonova O.A., Mogilnykh A.K., Netesov S.V., Netesova I.G. Results of testing reagents for enzyme immunoassay determination of HBsAg subtype and hepatitis B virus genotype in human blood plasma samples. Molekulyarnaya genetika, mikrobiologiya i virusologiya = Molecular Genetics, Microbiology and Virology, 2020, vol. 38, no. 4, pp. 188–195. (In Russ.)] doi: 10.17116/molgen202038041188
  7. Герасимова В.В., Левакова И.А., Бичурина М.А., Максимова Н.Р. Молекулярно-эпидемиологические особенности вирусного гепатита В // Инфекция и иммунитет. 2015. Т. 5, № 4. С. 297–302. [Gerasimova V.V., Levakova I.A., Bichurina M.A., Maksimova N.R. Molecular-epidemiological features of viral hepatitis B. Infektsiya i immunitet = Russian Journal of Infection and Immunity, 2015, vol. 5, no. 4, pp. 297–302. (In Russ.)] doi: 10.15789/2220-7619-2015-4-297-302
  8. Калинина З.П., Дарьина М.Г., Мовчан К.Н., Мамичева О.Ю., Гагаркина И.Б., Аверина Т.Я., Балабаш О.А., Ефимова Л.И., Потемкина И.В. О поствакцинальном иммунитете против вирусного гепатита B у медицинских работников Санкт-Петербурга // Инфекция и иммунитет. 2015. Т. 5, № 1. С. 89–92. [Kalinina Z.P., Darina M.G., Movchan K.N., Mamicheva O.Yu., Gagarkina I.B., Averina T.Ya., Balabash O.A., Efimova L.I., Potemkina I.V. On postvaccination immunity against viral hepatitis B in healthcare workers of St. Petersburg. Infektsiya i immunitet = Russian Journal of Infection and Immunity, 2015, vol. 5, no. 1, pp. 89–92. (In Russ.)] doi: 10.15789/2220-7619-2015-1-89-92
  9. Останкова Ю.В., Бальде T.A.Л., Бумбали С., Серикова Е.Н., Зуева Е.Б., Рейнгардт Д.Э., Щемелев А.Н., Давыденко В.С., Ануфриева Е.В., Эсауленко Е.В., Тотолян Арег А. Вариабельность preCore/Core-региона вируса гепатита В у беременных женщин в Гвинейской Республике // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2024. Т. 101, № 1. С. 61–71. [Ostankova Yu.V., Balde T.A.L., Boumbali S., Serikova E.N., Zueva E.B., Reingardt D.E., Shchemelev A.N., Davydenko V.S., Anufrieva E.V., Esaulenko E.V., Totolian Areg A. Variability of the preCore/Core region of hepatitis B virus in pregnant women in the Republic of Guinea. Zhurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunobiologii = Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology, 2024, vol. 101, no. 1, pp. 61–71. (In Russ.)] doi: 10.36233/0372-9311-382
  10. Полянина А.В., Быстрова Т.Н. Молекулярно-эпидемиологическая характеристика вируса гепатита B в условиях массовой вакцинопрофилактики // Журнал МедиАль. 2019. Т. 2, № 24. С. 10–39. [Polyanina A.V., Bystrova T.N. Molecular-epidemiological characteristics of hepatitis B virus in conditions of mass vaccination. Zhurnal MediAl = Journal MediAl, 2019, vol. 2, no. 24, pp. 10–39. (In Russ.)] doi: 10.21145/2225-0026-2019-2-10-39
  11. Полянина А.В., Быстрова Т.Н., Княгина О.Н. Иммунологическая структура к вирусу гепатита В населения Нижнего Новгорода в условиях массовой вакцинопрофилактики // Медицинский альманах. 2017. Т. 4, № 49. С. 86–90. [Polyanina A.V., Bystrova T.N., Knyagina O.N. Immunological structure of the hepatitis virus in the population of Nizhny Novgorod in the context of mass vaccination. Meditsinskiy al’manakh = Medical Almanac, 2017, vol. 4, no. 49, pp. 86–90. (In Russ.)] doi: 10.21145/2499-9954-2017-4-86-90
  12. Семененко Т.А., Никитина Г.Ю., Птушкин В.В., Ярош Л.В., Кожевникова Г.М., Полонский В.О., Суслов А.П. Распространенность скрытых и мутантных форм гепатита B у пациентов гематологических отделений многопрофильного стационара // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2016. Т. 18, № 1. С. 56–62. [Semenenko T.A., Nikitina G.Yu., Ptushkin V.V., Yarosh L.V., Kozhevnikova G.M., Polonskiy V.O., Suslov A.P. Prevalence of occult and mutant forms of hepatitis B in patients of hematology departments of a multidisciplinary hospital. Klinicheskaya mikrobiologiya i antimikrobnaya khimioterapiya = Clinical Microbiology and Antimicrobial Chemotherapy, 2016, vol. 18, no. 1, pp. 56–62. (In Russ.)]
  13. Серикова Е.Н., Семенов А.В., Останкова Ю.В., Тотолян Арег А. Метод выявления вируса гепатита В в плазме крови при низкой вирусной нагрузке с использованием ПЦР в режиме реального времени // Клиническая лабораторная диагностика. 2021. Т. 66, № 1. С. 59–65. [Serikova E.N., Semenov A.V., Ostankova Yu.V., Totolian Areg A. Method for detection of hepatitis B virus in blood plasma at low viral load using real-time PCR. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika = Russian Clinical Laboratory Diagnostics, 2021, vol. 66, no. 1, pp. 59–65. (In Russ.)] doi: 10.18821/0869-2084-2021-66-1-59-64
  14. Соловьев Д.В., Корабельникова М.И., Кудрявцева Е.Н., Власенко Н.В., Панасюк Я.В., Родионова З.С., Клушкина В.В., Дубоделов Д.В., Глиненко В.М., Семененко Т.А., Кузин С.Н., Акимкин В.Г. Серологический мониторинг как индикатор популяционного иммунитета против гепатита В у населения Российской Федерации // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2024. Т. 23, № 5. С. 24–32. [Solov’ev D.V., Korabel’nikova M.I., Kudryavtseva E.N., Vlasenko N.V., Panasyuk Ya.V., Rodionova Z.S., Klushkina V.V., Dubodelov D.V., Glinenko V.M., Semenenko T.A., Kuzin S.N., Akimkin V.G. Serological monitoring as an indicator of population immunity against hepatitis B in the population of the Russian Federation. Epidemiologiya i vaktsinoprofilaktika = Epidemiology and Vaccine Prophylaxis, 2024, vol. 23, no. 5, pp. 24–32. (In Russ.)] doi: 10.31631/2073-3046-2024-23-5-24-32
  15. Туполева Т.А., Игнатова Е.Н., Гуляева А.А., Овчинникова Е.Н., Тихомиров Д.С., Абакаров Р.Р., Романова Т.Ю., Ярославцева Н.Г., Королева О.М., Гаранжа Т.А., Филатов Ф.П., Гапонова Т.В., Савченко В.Г. Скрининг донорской крови на антитела к ядерному антигену вируса гепатита В как инструмент повышения безопасности трансфузий для больных заболеваниями системы крови // Клиническая лабораторная диагностика. 2016. Т. 61, № 5. С. 311–316. [Tupoleva T.A., Ignatova E.N., Gulyaeva A.A., Ovchinnikova E.N., Tikhomirov D.S., Abakarov R.R., Romanova T.Yu., Yaroslavtseva N.G., Koroleva O.M., Garanzha T.A., Filatov F.P., Gaponova T.V., Savchenko V.G. Screening of donor blood for antibodies to the nuclear antigen of hepatitis B virus as a tool for improving transfusion safety for patients with blood system diseases. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika = Russian Clinical Laboratory Diagnostics, 2016, vol. 61, no. 5, pp. 311–316. (In Russ.)] doi: 10.18821/0869-2084-2016-61-5-311-316
  16. Шапиева Н.Т., Понежева Ж.Б., Макашова В.В., Омарова Х.Г. Современные аспекты хронического гепатита В // Лечащий врач. 2019. № 5. С. 82–87. [Shapieva N.T., Ponezheva Zh.B., Makashova V.V., Omarova Kh.G. Modern aspects of chronic hepatitis B. Lechashchiy vrach = Attending Physician, 2019, no. 5, pp. 82–87. (In Russ.)] URL: https://cyberleninka.ru/article/n/sovremennye-aspekty-hronicheskogo-gepatita-v
  17. Al-Qahtani A.A., Pourkarim M.R., Trovão N.S., Vergote V., Li G., Thijssen M., Abdo A.A., Sanai F.M., Dela Cruz D., Bohol M.F.F., Al-Anazi M.R., Al-Ahdal M.N. Molecular epidemiology, phylogenetic analysis and genotype distribution of hepatitis B virus in Saudi Arabia: Predominance of genotype D1. Infect. Genet. Evol., 2020, vol. 77: 104051. doi: 10.1016/j.meegid.2019.104051
  18. Ashraf H., Alam N.H., Rothermundt C., Brooks A., Bardhan P., Hossain L., Salam M.A., Hassan M.S., Beglinger C., Gyr N. Prevalence and risk factors of hepatitis B and C virus infections in an impoverished urban community in Dhaka, Bangladesh. BMC Infect. Dis., 2010, vol. 10: 208. doi: 10.1186/1471-2334-10-208
  19. Bayandin R., Kochneva G., Sivolobova G., Grazhdantseva A., Netesov S. Genotypic variability and risk factors of hepatitis B virus in Western Siberia. Retrovirology, 2011, vol. 8, suppl. 1: A211. doi: 10.1186/1742-4690-8-S1-A211
  20. Chen S., Zhou Y., Chen Y., Gu J. fastp: An ultra-fast all-in-one FASTQ preprocessor. Bioinformatics, 2018, vol. 34, no. 17, pp. i884–i890. doi: 10.1093/bioinformatics/bty560
  21. Cocchio S., Baldo V., Volpin A., Fonzo M., Floreani A., Furlan P., Mason P., Trevisan A., Scapellato M.L. Persistence of Anti-HBs after up to 30 Years in Health Care Workers Vaccinated against Hepatitis B Virus. Vaccines (Basel), 2021, vol. 9, no. 4: 323. doi: 10.3390/vaccines9040323
  22. Conners E.E., Panagiotakopoulos L., Hofmeister M.G., Spradling P.R., Hagan L.M., Harris A.M., Rogers-Brown J.S., Wester C., Nelson N.P. Screening and Testing for Hepatitis B Virus Infection: CDC Recommendations — United States, 2023. MMWR Recomm. Rep., 2023, vol. 72, no. 1, pp. 1–25. doi: 10.15585/mmwr.rr7201a1
  23. Coppola N., Onorato L., Minichini C., DiCaprio G., Starace M., Sagnelli C., Sagnelli E. Clinical significance of hepatitis B surface antigen mutants. World J. Hepatol., 2015, vol. 7, no. 27, pp. 2729–2739. doi: 10.4254/wjh.v7.i27.2729
  24. Danecek P., Bonfield J.K., Liddle J., Marshall J., Ohan V., Pollard M.O., Whitwham A., Keane T., McCarthy S.A., Davies R.M., Li H. Twelve years of SAMtools and BCFtools. GigaScience, 2021, vol. 10: giab008. doi: 10.1093/gigascience/giab008
  25. Darmawan E., Turyadi, El-Khobar K.E., Nursanty N.K., Thedja M.D., Muljono D.H. Seroepidemiology and occult hepatitis B virus infection in young adults in Banjarmasin, Indonesia. J. Med. Virol., 2015, vol. 87, no. 2, pp. 199–207. doi: 10.1002/jmv.24045
  26. De Pauli S., Grando M., Miotti G., Zeppieri M. Hepatitis B virus reactivation in patients treated with monoclonal antibodies. World J. Virol., 2024, vol. 13, no. 1: 88487. doi: 10.5501/wjv.v13.i1.88487
  27. Großkopf A., Simm A. Alterung des Immunsystems. Z. Gerontol. Geriatr., 2022, vol. 55, no. 7, pp. 553–557. doi: 10.1007/s00391-022-02107-6
  28. Grubaugh N.D., Gangavarapu K., Quick J., Matteson N.L., De Jesus J.G., Main B.J., Tan A.L., Paul L.M., Brackney D.E., Grewal S., Nugawela P., Vanchinathan K., Andersen K.G., Rambaut A., Pybus O.G., Suchard M.A., Worobey M., Holmes E.C. An amplicon-based sequencing framework for accurately measuring intrahost virus diversity using PrimalSeq and iVar. Genome Biol., 2019, vol. 20, no. 1: 8. doi: 10.1186/s13059-018-1618-7
  29. Kasradze A., Shadaker S., Kuchuloria T., Gamkrelidze A., Nasrullah M., Gvinjilia L., Baliashvili D., Chitadze N., Kodani M., Tejada-Strop A., Drobeniuc J., Hagan L., Morgan J., Imnadze P., Averhoff F. The burden and epidemiology of hepatitis B and hepatitis D in Georgia: findings from the national seroprevalence survey. Public Health, 2020, vol. 185, pp. 341–347. doi: 10.1016/j.puhe.2020.06.024
  30. Kramvis A. The clinical implications of hepatitis B virus genotypes and HBeAg in pediatrics. Rev. Med. Virol., 2016, vol. 26, no. 4, pp. 285–303. doi: 10.1002/rmv.1885
  31. Lee K.H., Shim K.S., Lim I.S., Chae S.A., Yun S.W., Lee N.M., Choi Y.B., Yi D.Y. Changes in hepatitis B virus antibody titers over time among children: a single center study from 2012 to 2015 in an urban area of South Korea. BMC Pediatr., 2017, vol. 17, no. 1: 164. doi: 10.1186/s12887-017-0924-7
  32. Li H., Durbin R. Fast and accurate short read alignment with Burrows-Wheeler transform. Bioinformatics, 2009, vol. 25, no. 14, pp. 1754–1760. doi: 10.1093/bioinformatics/btp324
  33. Moretto F., Catherine F.X., Esteve C., Blot M., Piroth L. Isolated Anti-HBc: Significance and Management. J. Clin. Med., 2020, vol. 9, no. 1: 202. doi: 10.3390/jcm9010202
  34. Oh S.J., Lee J.K., Shin O.S. Aging and the Immune System: the Impact of Immunosenescence on Viral Infection, Immunity and Vaccine Immunogenicity. Immune Netw., 2019, vol. 19, no. 6: e37. doi: 10.4110/in.2019.19.e37
  35. Rajput M.K. Mutations and methods of analysis of mutations in Hepatitis B virus. AIMS Microbiol., 2020, vol. 6, no. 4, pp. 401–421. doi: 10.3934/microbiol.2020024
  36. Shah A.S., Civelli V.F., Bali V., Johnson R.H., Heidari A. A Case of S-Variant Hepatitis B Virus: An Immune System Escape Artist. J. Investig. Med. High Impact Case Rep., 2021, vol. 9: 23247096211045450. doi: 10.1177/23247096211045450
  37. Song J.E., Kim D.Y. Diagnosis of hepatitis B. Ann. Transl. Med., 2016, vol. 4, no. 18: 338. doi: 10.21037/atm.2016.09.11
  38. Villar L.M., Cruz H.M., Barbosa J.R., Bezerra C.S., Portilho M.M., Scalioni L.de P. Update on hepatitis B and C virus diagnosis. World J. Virol., 2015, vol. 4, no. 4, pp. 323–342. doi: 10.5501/wjv.v4.i4.323
  39. Wendelboe A.M., Van R.A., Salmaso S., Englund J.A. Duration of immunity against pertussis after natural infection or vaccination. Pediatr. Infect. Dis. J., 2005, vol. 24, no. 5, pp. S58–S61. doi: 10.1097/01.inf.0000160914.59160.41

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download
2. Figure 1. The distribution of patients with the serological status of АntiHBs+/AntiHBс– and with the serological status of АntiHBs+/AntiHBс+ in different age groups

Download (98KB)
Indexing metadata
3. Figure 2. Gender distribution of patients in the AntiHBs+/AntiHBс– and the AntiHBs+/AntiHBс groups

Download (75KB)
Indexing metadata
4. Figure 3. Quantification of the level of AntiHBs in the AntiHBs+/AntiHBс– and the AntiHBs+/AntiHBс+ groups

Download (81KB)
Indexing metadata
5. Figure 4. Quantification of the level of AntiHBs in different age groups

Download (134KB)
Indexing metadata
6. Figure 5. A phylogenetic tree constructed using the maximum likelihood method with T92 evolutionary model for full-length sequences of identified HBV variants (highlighted in bold) in relation to prototype isolates

Download (412KB)
Indexing metadata
7. Figure 6. A phylogenetic tree constructed using the maximum likelihood method with T92 evolutionary model for full-length sequences of identified HBV variants (highlighted in bold) in relation to other isolates identified on the territory of the Russian Federation

Download (616KB)
Indexing metadata

Copyright (c) 2026 Zheleznova A.S., Svirin K.A., Kartashov M.Y.

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС 77 - 64788 от 02.02.2016.